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白介素的临床应用及实验室检查 —— 检验科临检组 张丽 www.pumch.cn
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★ 什么是细胞因子 由免疫细胞（如单核、巨噬细胞、 T 细胞、 B 细胞、 NK 细胞等）和某 些非免疫细胞（内皮细胞、表皮细胞、纤维母细胞等）经刺激而合 成、分泌的一类具有广泛生物学活性的小分子蛋白质。 ★ 细胞因子分类 白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子、 趋化因子 细胞因子及其分类
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白细胞介素 ★ 什么是白细胞介素 将来自单核 - 巨噬细胞、 T 淋巴细胞所分泌的某些非特异性发挥免 疫调节和在炎症反应中起作用的因子称为白细胞介素（ interleukin ， IL ）。 简称白介素 ★ 生物学功能 白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导 T 、 B 细胞 活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用
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白细胞介素 -6 （ IL-6 ） 来源：致病原或细胞损伤刺激，由单核巨噬细胞， 内皮细胞及淋巴样细胞产生 组成：小分子糖蛋白 IL-6 的生物学功能：炎症，坏死以及肿瘤细胞刺激 下血清中 IL-6 升高 。
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巨嗜细胞 TNF- α 单核细胞 IL-6 IL-6 激活补体参 与炎症反应 肝脏 刺激 产生 CRP 等 急性时相 内皮 内皮 血栓形成 IL-6 的生物学功能
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IL-6 的临床意义 临床意义： 1. 术后、烧伤、急性感染、器官移植排斥反应等疾病时，患者体 液（血清、尿液、囊液、培养上清）中均可观察到 IL-6 明显升高。 可由此了解患者的病情和疗效 2. IL-6 与肿瘤：与浆细胞瘤、慢性淋巴细胞白血病、急性髓样白 血病、多发性骨髓瘤、 Lennet 淋巴瘤、霍奇金病、心脏黏液瘤、 宫颈癌等密切相关 3. 自身免疫性疾病如类风湿， SLE, 硬皮病以及银屑病等都可以 观察到 IL-6 升高
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白细胞介素 -8 （ IL-8 ） ★ 来源 ： 单核 - 巨嗜细胞产生； ★ 组成： IL-8 的分子量约 8KD ，主要活性形式为 72 个氨基酸 ★ IL-8 的主要生物学功能： 吸引和激活中性粒细胞，曾被命名为中性粒细胞 激活肽（ NAF ）、 粒细胞趋化肽（ GCP ）、中 性粒细胞激活因子（ NAF ）等
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IL-8 的临床意义 1. IL-8 与类风湿关节炎和麻风病密切相关， IL-8 趋化中性粒 细胞产生软骨降解酶引起滑膜损伤，在该病患者的滑液中可检 测到 IL-8 。 2 ．在某些与中性粒细胞积聚有关炎症和呼吸系统疾病的局部 或血清患者中 IL-8 也有明显增高，如肺纤维化、呼吸窘迫综合 征、慢性支气管炎、支气管扩张等。 3. IL-8 还与败血症休克、内毒素血症、输血溶血反应、酒精 性肝炎、胃炎、炎症性结肠炎、急性脑膜炎球菌感染等密切相 关，这些疾病患者 IL-8 升高水平与局部组织的炎细胞浸润程度 相一致。
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白细胞介素 -10 ★ 来源：主要由 TH2 细胞分泌产生 ★组成： 35-40KD, 二聚体形式 ★ IL-10 主要的生物学功能： 抑制活化的 T 细胞产生细胞因子； 抑制和感染单核巨嗜细胞， NK 细胞产生细胞 因子 IL-10 是一种具有免疫抑制功能的细胞因子
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IL-10 的临床意义 1. 抗炎性因子，拮抗炎症。肾小球肾病，肾衰病， HIV 感染早期，自 身免疫性脑炎急性期 IL-10 升高； 2. 参与器官移植排斥反应，表达水平与移植物存活时间正相关； 3. 某些肿瘤的生长因子，如骨髓瘤； 4. 与自身免疫性疾病相关，胶原诱导的关节炎中 IL- 10 水平升高。中 和 IL-10 后关节炎加重，给予 IL-10 治疗能明显抑制关节的炎症
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肿瘤坏死因子 -α （ TNF-α ） ★来源：主要由巨嗜细胞分泌； ★组成： 26 kDa ， 233 个氨基酸 ★ TNF-a 的主要生物学功能 参与系统性炎症 TNF-a---IL-1/IL-6---- CRP---- 急相反应
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TNF-a 的临床意义 1. 肿瘤： 许多肿瘤细胞可以产生 TNF, 多种肿瘤可 检测到 TNF 升高； 2. 风湿性关节炎患者滑膜中有大量 TNF; 3. 脓毒败血症、感染性肺炎等严重炎性疾病血清中 TNF 含量增高
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白介素的 临床应用 感染炎症相关疾病 在冠心病诊断中的应用 自身免疫性疾病 器官移植排斥反应
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IL-6 等细胞因子产生过程示意 巨嗜细胞 微生物 TNF- α 单核细胞 IL-8 粒细胞 IL-1/IL-6 CNS 内皮 肝脏 CRP LBP （脂 多糖 结合 蛋白）
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白介素在急性时相反应中比 CRP 出现更早
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IL-6 等在急性时相反应中比 CRP 更早出现 ★ TNF-a, IL-1 ， IL-6 ， IL-8 联合 CRP ，可以在炎症早期发现， 提高 CRP 检测的灵敏度 IL6 (+) CRP(-) 感染或者炎症早期 IL6(+) CRP(+) 提示感染，炎症 IL6(-) CRP(+) 提示感染，炎症
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IL-6 应用于新生儿感染 ★ 新生儿细菌感染的临床信号不特异而且早期时很微弱 ★ 血培养时间太长；假阴性结果 ★ 白细胞增多 / 白细胞减少不敏感； ★ 新生儿血象特殊性 - 淋巴与中性粒细胞比例倒置 ★ CRP 早期敏感度低 因此，更需要一个需要一个早期的敏感和特异的标志物
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新生儿感染血清标志物的诊断价值
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新生儿 IL-6 血清水平 ( 出生 24 小时内 ) IL-6 浓度 (pg/mL) 含义 < 15 排除感染； 15–150 局部感染； > 150 SIRS IL-6 浓度和 SIRS 病情严重程度相关； > 1000 若持续 3 天，则为高危患者；
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新生儿 IL-6 血清水平 ( 出生 24 小时后 ) IL-6 浓度 (pg/mL) 含义 < 15 排除感染； 15–150 局部感染； > 150 SIRS IL-6 浓度和 SIRS 病情严重程度相关； > 1000 若持续 3 天，则为高危患者；
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IL-6 可辅助诊断脓毒血症 L-6 值提示 脓毒血症病 人的预后 在脓毒血症 病人中， IL-6>1000 pg/ml 是脓毒血症 死亡的阳性 预测值
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IL-6 在脓毒血症中的应用
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细胞因子联合应用
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新生儿中， IL-6/8 对抗生素治疗的响应好于 CRP 和 PCT ★ 抗生素治疗 48 小时后， IL- 6/8 水平显著 下降； PCT 水 平没有显著变 化， CRP 升 高 ★ 可帮助临床获 取治疗进展， 减少不必要的 抗生素治疗强 度
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IL-6/10 在肺炎中升高并与肺炎严重程度相关 ★ IL-6 和 IL-10 在社区获得性肺炎患者中明显升高， IL-6/10 与肺炎的严重程度相关。比值持续升高，预示死亡几率随之 增高 预后不良 Cut-off 值 ： IL-6 27.2 pg/ml ； IL-10 ：值 3.15 pg/ml
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★ TNF-α, IL-1β, IL-2r, IL-6, IL-8 and IL-10 ★ 炎症因子组合使用，发挥各自特点，可以为临床提供更多信息！ ★ IL-6, 8, 10, 1 血清中升高的时相较早 ★ IL-6 24 小时候降低较明显 ★ TNF- α ， IL-8 值持续较高水平提示预后不良 ★ 在重症感染，复杂型的感染中推荐炎症因子配套使用， 并动态检测 临床使用选择
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白介素的 临床应用 感染炎症相关疾病 在冠心病诊断中的应用 自身免疫性疾病 器官移植排斥反应
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IL-6 与冠心病 炎症是冠心病（ CAD ）的病理基础，动脉粥样硬化是一个炎症性疾病 过程 IL-6 参与血管内皮细胞的损伤，促进血栓形成； IL-6 增强白细胞与心肌细胞黏附，加重心肌损伤 IL-6 水平异常增高可见于： 冠状动脉粥样硬化，心肌缺血， 心绞痛，充血性心力衰竭， 高血压 和急性心肌梗死
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IL-6 与冠心病
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IL-6+HCY 提示粥样硬化斑块易损性
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冠心病以及粥样硬化斑块易损性 推荐检测组合： IL-6+TNFα+CRP+HCY 更多炎症因子配套组合使用提供更多信息！
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白介素的临床应用 感染炎症相关疾病 在冠心病诊断中的应用 自身免疫性疾病 器官移植排斥反应
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白介素与自身免疫性疾病 什么是自身免疫性疾病 自身免疫性疾病（ autoimmune disease ）是由机体自身产生的抗体或者 致敏淋巴细胞破坏、损伤自身的组织和细胞成分，导致组织损害和器官功 能障碍的原发性免疫性疾病。 存在针对自身抗原的自身抗体或自身反应性 T 或者 B 细胞 常见的自身免疫性疾病有： 系统性红斑狼疮，类风湿性关节炎，强直脊柱炎，多发性硬化症，桥本甲 状腺炎及毒性甲状腺肿等
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炎症因子与类风湿性关节炎 IL-6 与 TNF-α 水平的高低反应 类风湿性关节炎严重程度 TNF-α 可以用于类风湿性关节 炎的治疗反应以及复发检测
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炎症因子与系统性红斑狼疮 ★ 有研究表明 TNF-a 与狼疮评分相关 ★ 有研究表明 IL-6 不仅与狼疮评分相关， 还与狼疮关节炎的超声结果和临床检查相 关。
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自身免疫疾病病情监控 推荐使用： TNF-α+IL-6+sIL-2R 联合检测为自身免疫疾病炎症状态监控提供更多 信息！
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白介素的临床应用 感染炎症相关疾病 在冠心病诊断中的应用 自身免疫性疾病 器官移植排斥反应
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移植物抗宿主反应（ GVHD ）
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在临床排斥反应出现前 3 ~ 8 天， sIL-2R 已明显升高 血清 sIL-2R 是心 / 肾器官移植排异的早期、灵敏 指标
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IMMULATE 1000 自动免疫分析仪 ★原理：使用特异性抗体包被珠做为固相，使用碱性磷酸酶标记试剂和化 学发光底物，包被珠盛放在专利技术的测试杯中。测试杯做为反应容器 进行免疫反应，温育，清洗和发生信号。 ★试剂组成： 液相：碱性磷酸酶及其底物 固相：聚苯乙烯珠（包被珠可以增大反应面积，增加了捕获效率。同时 结合动力保证了较大的灵敏度） 反应过程：
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特点： 1 ．酶放大化学发光使用碱性磷酸酶作为标记物，金刚 烷为底物，反应后发光，氧化反应在 424-500nm 快速发 光，发光强度是Ｉ在一分钟内的发光强的几十万倍，因 此设备具有高速且光强的特点。 ２．采用碱性磷酸酶标记，增加了试剂的稳定性，试剂 的稳定性好，效期长达一年。 ３．使用金刚烷作为发光底物，每个抗原抗体结合物可 产生几千个光子，并可持续稳定发光２０分钟。极大的 提高了试验测量的稳定性 ４．碱性磷酸酶直接结合在抗原或抗体上，而不影响抗 体结合抗原的特性，不影响发光 IMMULATE 1000 自动免疫分析仪
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IL-6 实验室检测 测定方法：固相酶标化学发光的免疫检测法 孵育时间： 60min 试剂保存条件： 2~8° ，效期 12 个月 标本处理：纤维蛋白的存在对检测结果有影响，离心前确保标本充分 凝集 标本用量： 100ul 血清 标本保存： 2~8° 一天， -20°6 个月 质控样本：高低 2 个水平 正常值：从未检测 ~5.9pg/ml 检测范围： 1000pg/ml 灵敏度： 2pg/ml 标本要求：轻度脂血，黄疸，溶血的标本影响较小。
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IL-8 的实验室检测 测定方法：固相夹心化学发光的免疫检测法 孵育时间： 30min 试剂保存条件： 2~8° ，效期 12 个月 标本处理：纤维蛋白的存在对检测结果有影响，离心前确保标本 充分凝集 标本用量： 50ul 血清 标本保存： 2~8° 两天（离心后检测）， -20° 长久保存 质控样本：高低 2 个水平 正常值：从未检测 ~62pg/ml 检测范围： 7500pg/ml 灵敏度： 2pg/ml 标本要求：轻度脂血，黄疸，溶血的标本影响较小。
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IL-10 实验室检测 测定方法：固相酶标化学发光的免疫检测法 孵育时间： 60min 试剂保存条件： 2~8° ，效期 12 个月 标本处理：纤维蛋白的存在对检测结果有影响，离心前确保标 本充分凝集 标本用量： 100ul 血清 标本保存： 2~8°6 小时， -20°6 个月 质控样本：高低 2 个水平（合成基质质控） 正常值：从未检测 ~9.1pg/ml 检测范围： 1000pg/ml 灵敏度： 1pg/ml 标本要求：脂血，溶血的标本影响较大。
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TNF-a 的实验室检查 测定方法：化学发光的免疫检测法 孵育时间： 60min 试剂保存条件： 2~8° ，效期 12 个月 标本处理：纤维蛋白的存在对检测结果有影响，离心前确保标本充分凝集 标本用量： 100ul 血清 标本保存： 2~8° 两天（当天检测）， -20°6 个月 质控样本：高低 2 个水平（人血清基质） 正常值：从未检测 ~8.1pg/ml 检测范围： 1000pg/ml 灵敏度： 1.7pg/ml 标本要求：轻度脂血，黄疸，溶血的标本影响较小。
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