寄生虫病的诊断技术 1.消化道与呼吸道寄生虫病的诊断 2.外寄生虫病的诊断 3.血液寄生虫病的诊断 4.组织内寄生虫病的诊断 主讲：王明成

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1 寄生虫病的诊断技术 1.消化道与呼吸道寄生虫病的诊断 2.外寄生虫病的诊断 3.血液寄生虫病的诊断 4.组织内寄生虫病的诊断 主讲：王明成
黄淮学院 生物工程系

2 一、消化道与呼吸道寄生虫病的诊断 许多寄生虫，特别是蠕虫，多数寄生在宿主消化道及其附属腺体中，而这些寄生虫的虫卵、幼虫、体节甚至成虫都通过粪便排出体外。因此，设法检查粪便可发现病原以确诊。

3 （1）   虫卵检查法 直接涂片法:取50%甘油水溶液或普通水1~2滴滴于载玻片上，镊取黄豆大小的被检粪块与之混匀，剔除粗粪渣，抹薄涂匀，盖上盖玻片镜检。本法最为简便，但检出率不高。为提高阳性检出率，每个样本应检多片。适用于虫卵数量多时。 漂浮法：应用比重较虫卵大的漂浮液，使蠕虫卵、球虫卵囊等浮于液体表面，易于集中检查。漂浮集卵法对某些线虫卵、绦虫卵和原虫卵囊有很好的检出效果。缺点是高比重的漂浮液易使虫卵和卵囊变形，检查时必须迅速，也可在制片时补加一滴清水。适用于比重小的虫卵。 沉淀法 ：用水处理粪便，经离心或自然沉淀，使虫卵沉淀集中，更易于检查。 适用于比重大的虫卵。 锦纶筛兜淘洗法：适用于宽度大于一定孔径的虫卵 虫卵计数：麦氏计数法，EPG（每克粪便中的虫卵数）

4 （2） 幼虫检查法 1.漏斗幼虫分离法（贝尔曼法）：取粪便15~20克，放在漏斗内的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一小试管。
（2）   幼虫检查法 1.漏斗幼虫分离法（贝尔曼法）：取粪便15~20克，放在漏斗内的金属筛上，漏斗下接一短橡皮管，管下再接一小试管。 2.粪便培养法：在培养皿底部加滤纸一张，而后将欲培养的粪便加水调成硬糊状，塑成半球形，放于皿内的纸上，并使半球形粪球的顶部略高出平皿边沿，使加盖时与皿盖相接触。将此皿置25℃温箱中，注意保持皿内湿度（应使底部的垫纸保持潮湿状态）。经7天后，多数虫卵即可发育成第三期幼虫，并集中于皿盖上的水滴中。将幼虫吸出置载玻片上，放显微镜下检查。 3.毛蚴孵化法：日本血吸虫

5 (3) 粪便内原虫检查方法 球虫卵囊检查法，同前1粪便检查。 隐孢子虫检查：特殊染色沙黄-美蓝染色。 结肠小袋纤毛虫：苏木素或碘特殊染色。

6 二、血液寄生虫病诊断 1.蠕虫幼虫的检查(如丝虫目线虫的幼虫) 1.1直接镜检法(幼虫多时)
  1.1直接镜检法(幼虫多时)   1.2溶血染色法(幼虫少时) 方法是采血于离心管中。加入5%醋酸溶液以溶血。待溶血完成后，离心并吸取沉淀检查。 2.血液原虫检查   2.1直接镜检法:采动物末梢血，将采出的血液滴在洁净的载玻片上，加等量的生理盐水与之混合，覆以盖玻片，立即放显微镜下用低倍镜检查，发现有运动的可疑虫体时，可再换高倍镜检查。由于虫体未染色，检查时应使视野中的光线弱些。   2.2涂片染色法: 2.3离心集虫法: 血液中的虫体较少时

7 离心集虫法 其操作过程是，采病畜抗凝血6~7毫升，以每分钟500转的速度，离心5分钟，使其中大部分红细胞沉降；而后将含有少量红细胞，白细胞和虫体的上层血浆移入另一离心管中，补加一些生理盐水，以每分钟2500转的速度离心10分钟。取沉淀物制成抹片，按上述染色法染色检查。此法适用于伊氏锥虫病和梨形虫病。 其原理是锥虫和感染有梨形虫的红细胞较正常红细胞的比重为轻，所以在第一次沉淀时，正常红细胞下降，而锥虫和感染有梨形虫的红细胞尚悬浮在血浆中。第二次离心沉淀时，则将其浓集于管底。

8 三、组织或组织液内寄生虫病诊断 淋巴结穿刺、染色检查（泰勒虫柯赫氏蓝体） 取腹水抹片、染色检查(适用于弓形虫病) 生殖道原体检查法：
寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中，也存在于公牛的包皮鞘内，应采取以上各处的病料寻找虫体。

9 组织或组织液内寄生虫病诊断 1.淋巴结穿刺、染色检查（泰勒虫柯赫氏蓝体） 2.取腹水抹片、染色检查(适用于弓形虫病) 3.生殖道原体检查法：
寄生于生殖道的虫体主要有牛胎儿三毛滴虫和马媾疫锥虫。 牛胎儿毛滴虫存在于病母牛的阴道与子宫的分泌物、流产胎儿的羊水、羊膜或其第四胃内容物中，也存在于公牛的包皮鞘内，应采取以上各处的病料寻找虫体。

10 外寄生虫病的诊断-病料的采集 寄生于动物体表的寄生虫主要有蜱、螨、虱等。对于它们的检查，可采用肉眼观察和显微镜观察相结合的方法。
蜱寄生于动物体表，个体较大，通过肉眼观察即可发现。 螨和虱有些个体较小，常需刮取皮屑，于显微镜下寻找虫体或卵。 刮取皮屑的方法甚为重要，应选择患病皮肤与健康皮肤交界处，这里的螨较多。刮取时先剪毛，取凸刃小刀，在酒精灯上消毒，使刀刃与皮肤表面垂直，刮取皮屑，直到皮肤轻微出血（此点对检查寄生于皮内的疥螨尤为重要）。 在野外进行工作时，为了避免风将刮下的皮屑吹去，可根据所采用的检查方法的不同，在刀上先蘸一些水或5%的甘油溶液，这样，可使皮屑粘附在刀上。将刮下的皮屑集中于培养皿或试管内，带回供检查。 蠕形螨病，可用力挤压病变部，挤出脓液，将脓液摊于载玻片上供检查。

11 外寄生虫病的诊断-检查方法 1.肉眼检查： 适用于痒螨
1.肉眼检查： 适用于痒螨 2.显微镜检查：适用于疥螨，将刮下的皮屑，放于载玻片上，滴加50%甘油溶液，覆以另一张载玻片。搓压玻片使病料散开，分开载玻片，置显微镜下检查。 3.虫体浓集法 先取较多的病料，置于试管中，加入10%氢氧化钠溶液。浸泡过夜（如急待检查可在酒精上煮数分钟），使皮屑溶解，虫体自皮屑中分离出来。而后待其自然沉淀（或以2000转/分钟的速度离心5分钟），虫体即沉于管底，弃去上层液，吸取沉渣检查。

12 蜱螨的形态比较 项目 蜱 螨 形态 大、肉眼可见 小、肉眼不易见 体壁 皮革状，体上有短毛或无毛 膜状，体表有长毛 口下板 明显，有齿
隐入 ，无齿或无口下板 须肢 明显，分节 有许多螨须肢不明显 螯肢 高度角质化，末端有齿 发育不充分，成液状或杆状 气孔 在第三、第四对腿附近 有些螨气门在头胸部或无气门

13 硬蜱与软蜱形态比较 项目 软蜱 硬蜱 盾板 背面无盾板 背面有盾板 腹板 无几丁质 大多有腹板 假头
隐于虫体前端腹面，背面不能见到，假头小，近方形 假头凸出于虫体前端，背面可见，假头大，多形态 口下板 不发达 ，齿小 发达 吸血时间 时间短，夜间吸血 吸血时间长，白天吸血 产卵 多次 一生产一次卵 体壁 软 硬

14 项目 疥螨 痒螨 寄生部位 表皮隧道 皮肤表面 采食方式 咀嚼式 刺吸式 形态 口器短, 基部背面有2个刺或刚毛;肢短圆锥形, 后两对肢全部或几乎全部被遮于腹面下, 无肛吸盘和尾突。 体长圆形, 口器长, 基部背面无刺或刚毛;肢长圆锥形, 前两对肢粗大, 后两对细长突出体缘;体后缘有肛吸盘（生殖吸盘） 和尾突各一对; 痒螨一般较大, 肉眼可见 寄生时间 终身寄生 发育时间 8~22天 10~12天 诊断部位 病、健皮肤的交界处 毛密处

15 寄生虫病的常规控制措施 1.控制传染源：驱虫、环境卫生。 2.切断传播途径：环境卫生、饲养卫生、消灭中间宿主和传播媒介。
3.保护易感动物：化学治疗、免疫接种、定期保健。

16 驱虫药的选择与应用 1.选择：安全、高效、广谱、使用方便、价格低廉。 2.选准驱虫时机：根据发育时间、感染季节动态、成熟前驱虫、长期给药。
3.确定驱虫对象： 3.1根据流行病学资料； 3.2根据体质状况； 3.3根据饲养阶段； 3.4针对多宿主寄生虫，所有带虫动物均应同时驱虫。 4.驱虫动物的管理：专门的场所，驱虫后5天内应集中管理，粪便无害化。 5.驱虫效果评价：