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实验3 邻甲苯胺法测定血糖
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目的要求: 掌握邻甲苯胺法测定血糖的原理及方法
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实验原理: 血样中的葡萄糖在酸性环境中加热时，脱水生成5-羟甲基-a-呋喃甲醛(羟甲基糖醛)，后者与邻甲苯胺缩合成蓝色的醛亚胺(Schiff碱)，颜色深浅与葡萄糖含量成正比.利用此呈色反应，可根据待测血样光密度值，从标准曲线上求得葡萄糖的含量。
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操作步骤: 1. 新鲜抗凝全血样品2500r/min离心15min,分离血浆备用。 2. 取干燥20mL试管6支，编号，按下表操作：
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试剂 (mL) 试管号 空白管 测定管 1 2 3 4 血浆 － 0.10 葡萄糖标准液（0.2mg/mL） 0.25 0.50 0.75 1.00 蒸馏水 1.0 0.9 邻甲苯胺试剂 2.0
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以空白管校正吸光度零点，读取各管620nm波长的吸光度。 以1、2、3、4管吸光度作纵坐标，葡萄糖含量作横坐标，绘制出标准曲线。
混匀各管置沸水浴中加热15min后，取出，用流水冷却。 以空白管校正吸光度零点，读取各管620nm波长的吸光度。 以1、2、3、4管吸光度作纵坐标，葡萄糖含量作横坐标，绘制出标准曲线。 根据测定管吸光度读数，从标准曲线上查得0.1mL血浆中葡萄糖含量，然后再计算出1000mL被检血浆中葡萄糖含量。 根据下式也可计算出每升血浆中葡萄糖含量。
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本法的空腹血糖正常值为3.9~5.6 mmol/L。 血糖（mmol/L）= × 标准管浓度× 0.1×180 测定管吸光度 标准管吸光度
1000 0.1×180 测定管吸光度 标准管吸光度
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思考题 血糖测定的临床意义主要有哪些？
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