第四章 肽类和蛋白质类药物
第一节 概 述 一、多肽和蛋白质的概念 由多个氨基酸通过肽键连接而成的链状化合物称为多肽。 50 个以上氨基酸残基组成的多肽称蛋白质。 多肽和蛋白质具有不同的结构。 蛋白质结构与其生物学活性之间的关系非常密切。 蛋白质变性：当蛋白质受环境因素的影响，从原来的有规 则的空间结构变为无序松散状态时，其生物活性将会散失， 称为蛋白质的变性。
酶 肽键 + H 2 O 二肽 H2OH2O
二、多肽和蛋白质理化性质 1. 酸碱性 2. 胶体性质 3. 离子结合 （ 1 ）盐析 （ 2 ）有机溶剂沉淀反应 （ 3 ）加热沉淀反应 （ 4 ）金属盐沉淀法（ pH>pI 时） （ 5 ）生物碱试剂和某些酸类的沉淀反应
4. 变性作用 天然蛋白质因受物理或化学因素的影响，分子构象发 生变化，致使蛋白质的理化性质和生物学功能随之发生 变化，但一级结构未遭破坏，这种现象称为变性作用。 变性后的蛋白质称为变性蛋白。 导致蛋白质变性的因素：热、紫外光、激烈的搅拌以及 强酸和强碱等。
5. 紫外吸收 6. 颜色反应 （ 1 ）茚三酮反应 （ 2 ）双缩脲反应 （ 3 ）酚试剂反应
三、多肽和蛋白质药物 1. 多肽类药物 （ 1 ）多肽类激素 ①下丘脑 - 垂体多肽激素：促甲状腺素释放素、促生长抑制素等 ②甲状腺激素：甲状旁腺素，降钙素等 ③胰岛激素：胰高血糖素、胰解痉多肽等 ④消化道激素：肠抑胃肽，胃泌素等 ⑤胸腺激素：胸腺肽等 ⑥心脏激素：心房肽等 （ 2 ）多肽类细胞生长调节因子：表皮生长因子等 （ 3 ）其它多肽类药物：谷胱甘肽、胎盘素等
第二节 多肽和蛋白质类药物的一般制备方法 一、生物材料的选择 1. 选择原则 （ 1 ）材料来源丰富易得； （ 2 ）有效成分含量高； （ 3 ）制备工艺简单，难于分离的杂质少； （ 4 ）成本低经济效益好的生物材料或微生物材料 为原料。 材料选定后，必须尽量保持新鲜，尽快加工处 理，否则冷冻保存。
二、材料的预处理 1. 机械法 常用的有匀浆器，研钵，机械捣碎机。 2. 物理法 反复冻融法；急热骤冷法；超声波法；加压破碎法。 3. 化学法 用稀酸、稀碱、浓盐、有机溶剂或表面活性剂处理细胞，可 破坏细胞结构释放出内容物。 4. 酶解法 用纤维素酶、半纤维素酶处理植物细胞，酶解 细胞壁，得到细胞的内含物。
三、多肽和蛋白质药物的提取与合成 （一）提取法 1. 水溶液提取 （ 1 ）盐浓度 （ 2 ） pH （ 3 ）温度 2. 有机溶剂提取法 一些与脂质结合比较牢固或分子中非极性侧链较多的 蛋白质或多肽，不溶或难溶于水、稀盐、稀碱中， 常用不同比例的有机溶剂提取。
（二）化学合成法 多肽和蛋白质的化学合成是从 1882 年 Curticus 报道 的马脲酰甘氨酸，经过和实际半个多世纪对各种保护 基和缩合方法的精心设计应用，使得合成方法日趋完 善。
四、多肽与蛋白质类药物的纯化 1. 根据溶解度不同 主要有盐析法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、加热沉淀 法、结晶法、双水相萃取法等。 2. 利用分子结构和大小的不同 可采用凝胶色谱、超滤、 SDS-PAGE 来分离。 3. 利用电离性质的不同 常采用的方法有离子交换法、电泳法等。
4. 利用生物功能专一性的不同 常用的是亲和色谱技术，近年来还发展出了亲和膜分 离技术及亲和过滤技术。 5. 利用疏水性的不同 利用多肽和蛋白质疏水性不同的纯化方法有疏水相互 作用色谱法、反向色谱法。
粉浆蛋白 浆液 浆水（弃去） 稠浆 100 目上渣 100 目下浆 分离 稠浆 上清液（弃去） 清洗 上清液（弃去） 酒精沉淀 上清液 沉淀物（弃去） 100 目下渣 清洗、干燥 沉淀 上清液（弃去） 沉淀 100 目上渣 喷雾干燥
粉浆蛋白的药理作用和临床应用 粉浆蛋白具有降低胆固醇、阻止尿钙流失，促 进肾功能，改善贫血，防止肥胖等明显的健身功 效；同时有促进人体健康，均衡营养、增强体质 等重要的保健作用。