胚胎工程.

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第 1 节、从受精卵谈起 第1节、从受精卵谈起 第三章 胚胎工程. 高等动物个体发育的阶段划分 胚胎发育 胚后发育 直接发育(爬行类、鸟类、哺乳类) 变态发育(部分两栖类、昆虫等)
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专题3:胚胎工程 体外受精和早期胚胎培养.
3.2 体外受精和早期胚胎培养.
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胚胎工程

四、试管动物技术 1.概念: 2.过程

四、试管动物技术 1.概念:   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程

四、试管动物技术 1.概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程 精子 卵子

四、试管动物技术 1.概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程 精子 受精卵 卵子

四、试管动物技术 1.概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程 精子 受精卵 早期胚胎 卵子

四、试管动物技术 1.概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程 精子 移植 子宫 受精卵 早期胚胎 卵子

四、试管动物技术 1.概念: 通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程   通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经过移植产生后代的技术 2.过程 精子 移植 子宫 受精卵 早期胚胎 卵子 个体

(1) 卵母细胞的采集和培养 (1)如何使雌性动物排出更多的卵子 (2)对实验动物小鼠、兔和小家畜如猪、羊动物如何采集卵子

(1) 卵母细胞的采集和培养 (1)如何使雌性动物排出更多的卵子 促性腺激素处理 (2)对实验动物小鼠、兔和小家畜如猪、羊动物如何采集卵子

(1) 卵母细胞的采集和培养 促性腺激素处理 从输卵管中冲取卵子,又叫(冲卵) (1)如何使雌性动物排出更多的卵子 (2)对实验动物小鼠、兔和小家畜如猪、羊动物如何采集卵子 从输卵管中冲取卵子,又叫(冲卵)

(3)对于大家畜或大型动物如何采集卵子 (4)采集的卵子是否马上可以受精

从屠宰场刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。 利用超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 (3)对于大家畜或大型动物如何采集卵子   从屠宰场刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。   利用超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 (4)采集的卵子是否马上可以受精

从屠宰场刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。 利用超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 (3)对于大家畜或大型动物如何采集卵子   从屠宰场刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。   利用超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 (4)采集的卵子是否马上可以受精 不能。需体外培养至MII中期

(2)精子的收集和获能 1)收集的方法: 2)获能处理:

(2)精子的收集和获能 1)收集的方法:  假阴道法、手握法、电刺激等 2)获能处理:

(2)精子的收集和获能 1)收集的方法:  假阴道法、手握法、电刺激等 2)获能处理: 培养法:啮齿动物、家兔和猪 化学法:牛、羊

(3)受精 获能的精子+成熟的卵子(MII)

(3)受精 获能的精子+成熟的卵子(MII) 受精卵

(3)受精 获能的精子+成熟的卵子(MII) 或受精液 获能液 受精卵

(3)受精 获能的精子+成熟的卵子(MII) 或受精液 获能液 受精卵 发育培养液

(3)受精 获能的精子+成熟的卵子(MII) 或受精液 获能液 受精卵 胚胎 发育培养液

3、胚胎早期培养   培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。

3、胚胎早期培养   培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同 小鼠、家兔 试管婴儿

3、胚胎早期培养 培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同 小鼠、家兔   培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同 小鼠、家兔 试管婴儿

3、胚胎早期培养 培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同   培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同 8个或16细胞胚阶段: 小鼠、家兔 试管婴儿

3、胚胎早期培养 培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同   培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷冻保存。 桑椹胚或囊胚阶段: 牛、羊 不同动物胚胎移植时间不同 8个或16细胞胚阶段: 小鼠、家兔 8~16个细胞胚阶段: 试管婴儿

五、胚胎移植 1.概念:

五、胚胎移植 1.概念: 将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。

五、胚胎移植 1.概念: 将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。 供体:提供胚胎的个体。

五、胚胎移植 1.概念: 将雌性动物的早期胚胎,或者通过其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之发育为新个体的技术。 供体:提供胚胎的个体。 受体:接受胚胎的个体。

2.胚胎移植的生理学基础

2.胚胎移植的生理学基础 1)供体和受体相同的生理环境 2)早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收 集提供了可能 2)早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收 集提供了可能 3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生 免疫排斥 4)胚胎与受体建立正常的联系,但遗传 物质没有改变。

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理……

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 冲卵

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 冲卵 质量检查、培养

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 胚胎移植 冲卵 质量检查、培养

3. 胚 胎 移 植 的 基 本 程 序 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种 胚胎移植 冲卵 妊娠检查 质量检查、培养 分娩(胚胎移植的犊牛)

4.胚胎移植成功与否要有两个条件

4.胚胎移植成功与否要有两个条件 (1)胚胎移植一般应在同种的雌性供体和受体之间进行。 (2)进行胚胎移植的供体和受体的生理状态要相同。

六、胚胎分割 1.概念: 2.特点:

六、胚胎分割 1.概念: 采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。 2.特点:

六、胚胎分割 1.概念: 2.特点: 采用机械方法将早期胚胎切割成2等份,4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。 后代具有相同的遗传物质,属无性生殖。

3.选择的胚胎:

桑椹胚 哺乳动物受精卵的发育 8细胞 4细胞 2细胞

3.选择的胚胎:   发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。

3.选择的胚胎:   发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。 4.使用的主要仪器:

3.选择的胚胎:   发育良好的,形态正常的桑椹胚或囊胚。 4.使用的主要仪器:   实体显微镜和显微操作仪

牛胚胎性别鉴定和分割示意图

七、胚胎干细胞 1.概念: 2.特点:

七、胚胎干细胞 1.概念:   简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。 2.特点:

七、胚胎干细胞 1.概念: 简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。 2.特点: 1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显。

七、胚胎干细胞 1.概念: 简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞。 2.特点: 1)形态:体积小,细胞核大,核仁明显。 2)功能:具有发育的全能性。可分化为成     年动物体内任何一种组织细胞。     体外培养可增殖不分化。

全能细胞  桑椹胚及以前: 能发育成完整个体 多能干细胞 (胚胎干细胞)  内细胞团细胞、原始性腺细胞分离出来:  能分化出动物体内的任何组织 专能干细胞(成体干细胞)  如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等:  能分化出特定的组织

易难点分析 1.分清两个标志——受精的标志和受精完成的标志

易难点分析 1.分清两个标志——受精的标志和受精完成的标志   (1)受精标志:在透明带和卵黄膜之间观察到两个极体。

易难点分析 1.分清两个标志——受精的标志和受精完成的标志 (1)受精标志:在透明带和卵黄膜之间观察到两个极体。   (1)受精标志:在透明带和卵黄膜之间观察到两个极体。   (2)受精完成的标志:雌、雄原核的融合。

2.卵子和精子能够受精的前提条件

2.卵子和精子能够受精的前提条件   (1)成熟的精子并不代表具有受精能力,必须获能后方才具备受精能力。

2.卵子和精子能够受精的前提条件   (1)成熟的精子并不代表具有受精能力,必须获能后方才具备受精能力。   (2)动物排出的卵子并未成熟且成熟程度因动物种类不同而异,但只有达到减Ⅱ中期时,才具备与精子受精的能力。

3.胚胎分割、胚胎移植易混淆的问题   (1)材料选择:   (2)囊胚期分割要求:

3.胚胎分割、胚胎移植易混淆的问题   (1)材料选择: 发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。   (2)囊胚期分割要求:

3.胚胎分割、胚胎移植易混淆的问题   (1)材料选择: 发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚。   (2)囊胚期分割要求: 内细胞团均等分割,以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。

4.从细胞识别和生理上来分析两个保障 (1)同种生物精卵结合的保障 (2)防止多精入卵的保障

4.从细胞识别和生理上来分析两个保障 (1)同种生物精卵结合的保障   卵细胞透明带上存在精子的特异性识别的受体,只允许同种生物的精子与卵细胞结合。 (2)防止多精入卵的保障

4.从细胞识别和生理上来分析两个保障 (1)同种生物精卵结合的保障   卵细胞透明带上存在精子的特异性识别的受体,只允许同种生物的精子与卵细胞结合。 (2)防止多精入卵的保障   ①透明带反应。   ②卵黄膜封闭作用。

5.胚胎发育误区 误区一 受精卵进行细胞分裂和细胞分化,形成桑椹胚。 误区二 囊胚细胞开始分化,组成囊胚的细胞没有全能性。

5.胚胎发育误区 误区一 受精卵进行细胞分裂和细胞分化,形成桑椹胚。 纠正:受精卵进行细胞分裂,形成桑椹胚。 误区二 囊胚细胞开始分化,组成囊胚的细胞没有全能性。

5.胚胎发育误区 误区一 受精卵进行细胞分裂和细胞分化,形成桑椹胚。 纠正:受精卵进行细胞分裂,形成桑椹胚。 原因:细胞分化开始于囊胚 ,桑椹胚的形成没有经过细胞分化。 误区二 囊胚细胞开始分化,组成囊胚的细胞没有全能性。

5.胚胎发育误区 误区一 受精卵进行细胞分裂和细胞分化,形成桑椹胚。 纠正:受精卵进行细胞分裂,形成桑椹胚。 原因:细胞分化开始于囊胚 ,桑椹胚的形成没有经过细胞分化。 误区二 囊胚细胞开始分化,组成囊胚的细胞没有全能性。 纠正:囊胚细胞开始分化,但囊胚的内细胞团细胞具有全能性。

5.胚胎发育误区 误区一 受精卵进行细胞分裂和细胞分化,形成桑椹胚。 纠正:受精卵进行细胞分裂,形成桑椹胚。 原因:细胞分化开始于囊胚 ,桑椹胚的形成没有经过细胞分化。 误区二 囊胚细胞开始分化,组成囊胚的细胞没有全能性。 纠正:囊胚细胞开始分化,但囊胚的内细胞团细胞具有全能性。 原因:内细胞团将来发育成胎儿的各种组织,具有全能性。

误区三 卵裂期是指早期胚胎发育的时期。 误区四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是早期胚胎。

误区三 卵裂期是指早期胚胎发育的时期。 纠正:卵裂期是早期胚胎发育的一部分。 误区四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是早期胚胎。

误区三 卵裂期是指早期胚胎发育的时期。 纠正:卵裂期是早期胚胎发育的一部分。 原因:原肠胚属于早期胚胎,但不属于卵裂期。 误区四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是早期胚胎。

误区三 卵裂期是指早期胚胎发育的时期。 纠正:卵裂期是早期胚胎发育的一部分。 原因:原肠胚属于早期胚胎,但不属于卵裂期。 误区四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是早期胚胎。 纠正:胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是桑椹胚和囊胚。

误区三 卵裂期是指早期胚胎发育的时期。 纠正:卵裂期是早期胚胎发育的一部分。 原因:原肠胚属于早期胚胎,但不属于卵裂期。 误区四 胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是早期胚胎。 纠正:胚胎移植以及胚胎分割移植的操作对象是桑椹胚和囊胚。 原因:早期胚胎包括桑椹胚、囊胚、原肠胚。原肠胚不适于胚胎移植和胚胎分割移植。