第31章 单股负股RNA病毒 单股负股RNA病毒是指： 主要包括以下病毒： 基因组核酸为单股负股RNA的病毒。 副粘病毒科 弹状病毒科 丝状病毒科 波纳病毒科 复制方式相似，核衣壳螺旋对称，出芽方式释放，有囊膜及膜粒。

第一节 副粘病毒科 第二节 弹状病毒科 第三节 丝状病毒科 第四节 波纳病毒科

单股负股RNA病毒的部分特性 副粘病毒科 弹状病毒科 丝状病毒科 波纳病毒科 形状 直径 （nm） 囊膜 对称型 复制部位 宿主 范围 致病性 副粘病毒科 多形性 150—300 ＋ 螺旋对称 胞浆 脊椎动物 主要为 呼吸道疾病 弹状病毒科 子弹状 直 径 20 平均长170 温和性发热 致死性神经性疾病 丝状病毒科 丝状 直 径 80 长可达14000 人类、 未知宿主 出血热 波纳病毒科 球状 90 胞核 马、绵羊、猫、鸵鸟、(人？) 免疫介导的 神经性疾病

第一节 副粘病毒科 1、新城疫病毒 2、犬瘟热病毒 3、牛瘟病毒

1.新城疫病毒 Newcastle disease virus，NDV 属于副粘病毒科/副粘病毒亚科/腮腺炎病毒属. 核酸为单链负股RNA。 15586bp，包含6个基因， 分别编码3`-NP- P-M-F-HN-L-5`六个主要多肽 。 成熟的病毒粒子多呈球形 直径为120-300nm。 由螺旋形对称盘绕的核衣壳和囊膜组成。 囊膜表面有放射状排列的纤突，含有刺激宿主产生血凝抑制和病毒中和抗体的抗原成分。

病毒感染一般要经过吸附、穿入、脱衣壳、生物合成、装配及释出等六个阶段。 新城疫病毒 NDV的血凝素 可凝集人、鸡、豚鼠和小白鼠的红细胞。 病毒感染一般要经过吸附、穿入、脱衣壳、生物合成、装配及释出等六个阶段。 病毒吸附和穿入细胞是感染发生的关键两个阶段。

血清型与基因型： 抵抗力较强： NDV在室温条件下可存活1周左右 56℃存活30~90min 4℃可存活1年 -20℃可存活10年以上。 新城疫病毒 血清型与基因型： 只有1个血清型，(不同毒株的毒力差异较大)。 根据F蛋白基因cDNA的限制性酶切分析，可将NDV分为Ⅰ~Ⅸ 9个基因型。 抵抗力较强： NDV在室温条件下可存活1周左右 56℃存活30~90min 4℃可存活1年 -20℃可存活10年以上。 一般消毒药均对NDV有杀灭作用。

毒力 区分这三类毒株的3个致病指数依据： ① 病毒对1日龄雏鸡脑内接种的致病指数（ICPI） ② 42日龄雏鸡静脉接种的致病指数（IVPI） 新城疫病毒 毒力 ICPI MDT IVPI 强毒型（velogenic） ＞2.0 中毒型（mesogenic） 0.6~1.8 44~70h 弱毒型（lesogenic） ≤0.25 ＞68h 区分这三类毒株的3个致病指数依据： ① 病毒对1日龄雏鸡脑内接种的致病指数（ICPI） ② 42日龄雏鸡静脉接种的致病指数（IVPI） ③ 最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间（MDT）

致病性 鸡新城疫(ND)又称亚洲鸡瘟。 主要侵害鸡、火鸡、野禽及观赏鸟类。 是一种高度接触传染性、致死性疾病。 发病后主要特征： 新城疫病毒 致病性 鸡新城疫(ND)又称亚洲鸡瘟。 主要侵害鸡、火鸡、野禽及观赏鸟类。 是一种高度接触传染性、致死性疾病。 发病后主要特征： 呼吸困难，下痢，伴有神经症状；成鸡严重产蛋下降； 粘膜和浆膜出血。 病毒存在于病鸡的所有组织器官、体液、分泌物和排泄物中，其中以脑、脾、肺含毒量最高，以骨髓保毒时间最长。

⑤ 无症状型或缓发嗜肠型新城疫 (LEND ) 新城疫病毒 致病类型 ① 速发嗜内脏型新城疫(VVND) ② 速发嗜肺脑型新城疫(VPND) ③ 中发型新城疫(MND) ④ 缓发型新城疫(LND) ⑤ 无症状型或缓发嗜肠型新城疫 (LEND )

病鸡不愿走动，垂头缩颈，翅膀 下垂，状似昏睡，冠和肉髯暗红、 暗紫 病鸡嗉囊内充满液体内容物， 倒提时常从口内流出酸臭液体 病鸡不愿走动，垂头缩颈，翅膀 下垂，状似昏睡，冠和肉髯暗红、 暗紫 出现神经症状， 患鸡头颈向后或向一侧扭转。 有的病鸡表现眼结膜炎， 上下眼睑肿胀，结膜充血、出血

小肠盲肠的粘膜和浆膜出血 气管粘膜严重出血 腺胃乳头出血 肠粘膜有斑状出血，粘膜水肿 产蛋母鸡卵巢的卵泡出血

诊断 ① 临床症状、病理解剖 ② 病毒分离：9~11日龄鸡胚尿囊腔接种 ③ 血清学诊断： 病毒中和试验 ELISA试验 免疫荧光 新城疫病毒 诊断 ① 临床症状、病理解剖 ② 病毒分离：9~11日龄鸡胚尿囊腔接种 ③ 血清学诊断： 病毒中和试验 ELISA试验 免疫荧光 琼脂双扩散试验 迄今为止，血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)仍是一种快速准确的传统实验室手段。

新城疫病毒 防治 新城疫的预防工作是一项综合性工程。 饲养管理 防疫 消毒 免疫 监测 5个环节缺一不可。 不能单纯依赖疫苗来控制疾病。

预防常用疫苗： 活疫苗：ND-I系、ND-II系、 ND-IV系(LaSota) Clone30、N79 灭活疫苗：ND油乳剂灭活苗， ND-IB二联油乳剂灭活苗， ND-IB-EDS三联油乳剂灭活苗， ND-IB-IBD三联油乳剂灭活苗， ND-IB-EDS-AI 四联油乳剂灭活苗， 疫苗疗法：病初，产蛋鸡用ND-I系、 育成鸡用ND-IV系(LaSota)

2.犬瘟热病毒 Canine distemper virus，CDV 属于副粘病毒科/副粘病毒亚科/麻疹病毒属。 具有科的特性。 可用健康犬的淋巴细胞培养→传代后可在MDCK、Vero细胞或犬原代肺细胞上生长→盲传数代后产生CPE（合胞体）。 所有狗科、鼬科和浣熊科动物都易感， 全世界都有分布。 病犬的排泄物和分泌物中都有病毒， 主要经呼吸道传染，也可间接接触传播。

犬瘟热的症状有胃肠型、呼吸型和神经型三种 犬瘟热病毒 犬瘟热的症状有胃肠型、呼吸型和神经型三种 ①胃肠型：体温升高呈典型的双相热，精神沉郁、厌食、频繁呕吐、腹泻、脱水。 ②呼吸型：鼻、眼有粘液和脓性分泌物（两侧），咳嗽（先干性后湿性），呼吸音粗。 ③神经型：主要是嘴唇、眼睑抽动，流涎、空嚼等。当肌群（咬肌）反复、有节律的颤动时，对于诊断犬瘟热有重要的证病意义。

犬瘟热病毒

预防措施： 犬瘟热疫苗， 犬五联苗。

3.牛瘟病毒 Rindprest virus 属于副粘病毒科/副粘病毒亚科/麻疹病毒属。 具有科的特性。 可感染多种细胞，多用牛肾细胞或绒猴淋巴细胞系B95a培养。 可通过接触、气雾传递。 牛、羊、猪均可感染。

牛瘟属于OIE A类传染病， 我国已经消灭 必须严格检疫

第二节 弹状病毒科 Rhabdoviridae 本科病毒的粒子为子弹状，故称“弹状病毒科” 成员约有175种， 其中狂犬病毒是典型的代表。

一、分类 本科分为4个属： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属 另外还有一些鱼类弹状病毒及其他弹状病毒尚未分属。

一、分类 其中主要包括： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属 狂犬病毒——除南极洲的所有大陆 蒙哥拉病毒——非洲中部 拉各斯蝙蝠病毒——非洲中部及南部 杜文哈根病毒——南非 欧洲蝙蝠狂犬病毒1型、2型——欧洲 澳大利亚蝙蝠狂犬病毒——澳大利亚 其中主要包括： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属

一、分类 其中主要包括： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属 水泡性口炎印地安那病毒——美洲 水泡性口炎新泽西病毒——美洲 水泡性口炎安拉高斯病毒——阿根廷,巴西 鲤春病毒血症病毒——欧洲 白斑驹鱼幼鱼弹状病毒——欧洲

一、分类 其中主要包括： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属 牛暂时热病毒——亚洲、非洲、澳大利亚

一、分类 其中主要包括： 狂犬病毒属 水泡病毒属 暂时热病毒属 粒外弹状病毒属 传染性造血器官坏死病毒——欧洲,北美 病毒性出血性败血症病毒——欧洲,北美

二、弹状病毒科的特性 病毒粒子为子弹状， 核衣壳螺旋对称。 核酸：单分子负股RNA， 抵抗力较强， 11~15kb； 编码5种蛋白。 直径20nm，平均长170nm。 核衣壳螺旋对称。 核酸：单分子负股RNA， 11~15kb； 编码5种蛋白。 抵抗力较强， 但对热、紫外线、去垢剂敏感。

狂犬病毒

Rhabdoviruses G 糖蛋白纤突 M 蛋白 脂质双分子层 螺旋对称核衣壳 (RNA ＋N 蛋白)

Rhabdoviruses 含中和表位 L NS G 糖蛋白纤突 M 蛋白 脂质双分子层 螺旋对称核衣壳 (RNA ＋N 蛋白) 聚合酶 (2种) L NS M 蛋白 脂质双分子层 螺旋对称核衣壳 (RNA ＋N 蛋白)

内吞 吸附、穿入 细胞质内复制 H+

Need to make mRNA 1). 单分子负股RNA基因组 2). 病毒子含有RNA聚合酶 蛋白质 polymerase must be packaged in virion. 3). 病毒子含有RNA修饰酶 RNA modifying enzymes are packaged in virion. AAA 蛋白质 ＋mRNA －RNA

RNA 合成 full-length copy 5 mRNAs (+ve sense) = 帽 基因组：－RNA 转录 复制 (+ve) 3’ 5’ full-length copy 5’ 3’ (+ve) 复制 转录 5 mRNAs (+ve sense) AAA AAA AAA AAA 3’ 5’ (-ve) AAA = 帽

新合成的负股RNA 作为子代基因组 作为进一步复制的模板 作为进一步转录的模板 (+ve) (-ve) 3’ 5’ genome (-ve) AA

细胞膜 内质网 高尔基体

装配 细胞外 聚合酶 细胞内

几点注意 所有生物合成过程均在细胞浆内； RNA聚合酶和 RNA的修饰机构是由病毒自身编码的并存在于病毒子内。 没有早期和晚期之分。

三、兽医临床常见的弹状病毒 1、狂犬病毒 2、牛暂时热病毒

1、狂犬病毒 Rabies virus 弹状病毒科/狂犬病毒属； 具有科的特性； 狂犬病毒具有两种主要抗原。 一种为囊膜糖蛋白抗原，(保护性抗原) 能与乙酰胆碱受体结合使病毒具有神经毒性， 并使体内产生中和抗体及血凝抑制抗体。 中和抗体具有保护作用。 另一种为内层的核蛋白抗原， 可使体内产生补体结合抗体和沉淀素，无保护作用。

抵抗力： 两个概念： ① 自然病毒或街毒（street virus）：从患者和病兽体内所分离的病毒，其特点是毒力强； 狂犬病毒 两个概念： ① 自然病毒或街毒（street virus）：从患者和病兽体内所分离的病毒，其特点是毒力强； ② 固定毒（fixed virus）：经多次通过兔脑后毒力降低的病毒，可制做疫苗。 抵抗力： ① 易被紫外线、甲醛、50~70%乙醇、升汞和新洁尔灭等灭活; ② 其悬液经56℃30～60分钟或100℃2分钟即失去活力;对酚有高度抵抗力。 ③ 在冰冻干燥下可保存数年。

致病性 ① 可引起人畜共患的中枢神经系统急性传染病，称为狂犬病(rabies)又称恐水症(hydrophobia)。 狂犬病毒 致病性 ① 可引起人畜共患的中枢神经系统急性传染病，称为狂犬病(rabies)又称恐水症(hydrophobia)。 ② 多见于狗、狼、猫等食肉动物。

临床表现为特有的狂躁、恐惧不安、怕风恐水、流涎和咽肌痉挛，终至发生瘫痪而危及生命。 狂犬病毒 人多因被病兽咬伤而感染。 临床表现为特有的狂躁、恐惧不安、怕风恐水、流涎和咽肌痉挛，终至发生瘫痪而危及生命。 ⑤ 多数病例在肿胀或变性的神经细胞浆中，可见到1至数个圆形或卵圆形、直径约3~10μm 的嗜酸性包涵体，即内基小体（Negri body）

狂犬病毒

预防措施： 狂犬病疫苗、犬五联苗

狂犬病防治，不能只重人不重动物，只注重灭杀动物不注重免疫和监管。 2006年上半年，为了控制狂犬病疫情，云南牟定捕杀犬类5万多只，这则新闻曾经引发很大争议。后来，济宁、上海等地也陆续传出“打狗”行动的消息。而北京8月份还宣布，将对经铁路、航空运输的犬、猫等动物进行体温测量，严防病犬进京。 狂犬病防治，不能只重人不重动物，只注重灭杀动物不注重免疫和监管。

狂犬病： 该病主要通过破损的皮肤感染，而且人是终末宿主，不存在人与人间的传播。 欧美日等发达国家养犬十分普及，但没有犬引起的人狂犬病。 人畜共患病，每年发病和死亡的人数居世界第二。自1996年我国疫情逐年回升，2000年以后势头更猛据卫生部公布今年前7个月我国因狂犬病死亡1100多人，我国目前养犬8000万－2亿左右，外表健康犬的带毒率在2％以上。 该病主要通过破损的皮肤感染，而且人是终末宿主，不存在人与人间的传播。 欧美日等发达国家养犬十分普及，但没有犬引起的人狂犬病。

2、牛暂时热病毒 Bovine ephemeral fever virus，BEFV 弹状病毒科/暂时热病毒属； 又名“牛流行热病毒”或“三日热病毒”； 具有科的特性； 可感染牛，地方性流行，蠓、库蚊可传播； 发病率高达100%，死亡率只有1~2%。 肉牛和奶牛死亡率较高：10~20%

第三节 丝状病毒科 Filoviridae 本科病毒形态特殊 具有多形性，多为长丝状。 直径80nm，长度可达14000nm。

可引发人类的急性出血性败血症； 人畜共患； 传播媒介、自然贮主不明。 Hemorrhagic Fevers due to Ebola, Marburg Viruses

Ebola and Marburg viruses

第三节 丝状病毒科 Filoviridae 本科病毒形态特殊 具有多形性，多为长丝状。 直径80nm，长度可达14000nm。

可引发人类的急性出血性败血症； 人畜共患； 传播媒介、自然贮主不明。 Hemorrhagic Fevers due to Ebola, Marburg Viruses

Ebola and Marburg viruses

第四节 波纳病毒科 Bornaviridae 1895年，德国-萨克森州-波纳镇 发现马的一种传染病，以神经症状为特征。定名为“波纳病”。 1925年，确定病原为病毒 1999年，为该病毒建立新科“波纳病毒科”。

病毒的特性 球形，有囊膜，90nm； 单分子负股单股RNA，8.9kbp 细胞核内复制，产生核内包涵体 对热、脂溶剂、普通消毒敏感。 5个阅读框，编码6个蛋白。 细胞核内复制，产生核内包涵体 对热、脂溶剂、普通消毒敏感。

致病性 感染谱很广； 除感染马外，还有绵羊、牛、兔等； 可能与人类的某种神经性精神病有关。