国家肉牛牦牛产业技术体系繁殖技术岗位 徐照学 博士 研究员 2016.10 肉牛繁育技术 国家肉牛牦牛产业技术体系繁殖技术岗位 徐照学 博士 研究员 2016.10

母牛繁殖技术 发情鉴定 人工授精 妊娠与分娩 提高繁殖力 繁殖新技术

（一）发情鉴定 母牛的发情 母牛的性周期平均为2l天，范围18～24天，青年母牛个体差异稍大一些。普通奶牛常年发情 ，一般在产后30天第一次发情 。牦牛是季节性繁殖的家畜，牦牛的发情配种季节主要集中在7～8月份。

牛的发情可分为四个阶段

发情鉴定的三种方法： 外部观察法 在发情前期，爬跨其他母牛、神态不安，哞叫，但不愿接受他牛爬跨，外阴部轻微肿胀，粘膜充血呈粉红色，阴门流出透明粘液，量少而稀薄如清水样，粘性弱，此后神态更加不安定，放牧时到处乱跑，上槽时乱爬槽，且食欲减退。

到发情中期，母牛急于爬跨和追随其他母牛，很安静愿意接受其他牛爬跨，头低耳竖，闪腰耸尾，常作排尿姿势，阴门中流出多量透明粘液，粘性强，可拉成长条，呈粗玻璃棒状，不易扯断，粘膜充血潮红，阴唇肿胀明显。 到发情后期时，不再哞叫，不爬跨其他母牛，也拒绝接受他牛爬跨，流出少量粘液，半透明，粘性减退，粘液变为黄色或淡红色，阴唇肿胀消失。

阴道检查法 外阴部清洗消毒后，用消毒过的开膣器，插入母牛阴道内，打开照明装置，观察阴道粘膜颜色、充血程度，子宫颈口的开张、松弛状态，阴道内部黏液的颜色、粘稠度、量的多少，判断母牛的发情程度。 直肠触摸卵巢检查法通过检查两侧卵巢的质地、形状、大小，判断卵泡所处的时期。

在直肠检查过程中，检查人员应小心谨慎，避免粗暴。如遇到母牛努责时，应暂时停止检查，等待直肠收缩缓解时再行操作。直肠内的宿粪可一次排出。将手臂伸入直肠内向上抬起，使空气进入直肠，然后手掌稍侧立向前慢慢推动，使粪便蓄积，刺激直肠收缩，当母牛出现排便反射时，应尽力阻挡，待排便反射强烈时，将手臂向身体侧靠拢，使粪便从直肠与手臂的缝隙排出，如粪便较干燥，慢慢将手臂退出。

（二）人工授精 配种方式可分为自然交配和人工授精两种。目前在交通不便、牛群数量不大、人工授精技术和设备不完善的地区，没有繁殖记录的全年放牧牛群，对人工授精较难配种受孕的母牛个体，常采用牛自然交配方式。

人工授精借助于专门的器械，用人工方法采取公畜精液，经体外受精检查与处理后，输入发情母 畜的生殖道内，使其受胎的一种繁殖技术。 人工授精技术包括六个环节： 采精 精液品质评定 稀释 保存 运输 输精

1．操作规程 从液氮罐中取出细管冻精，投入38℃～40℃温水中解冻10秒钟，然后取出细管用挤干的酒精棉球把细管擦干，用灭菌剪刀剪去封口端，然后装入输精器。采用直肠把握输精法，将手深入直肠向下握着子宫颈，另一只手持输精管慢慢地插入宫颈口。输精管要前高后低，插入阴道5～10厘米后转为水平方向，直对子宫颈，以防错插入尿道。到达子宫颈口内或排卵一侧子宫角时注入精液。

输精枪 输精枪外套 细管剪刀 输精枪

精液剪口 安装细管精液

安装完细管精液输精枪

2．输精部位 一般要求达到子宫颈深部，即进入子宫颈口8～10厘米。如果深度过深，其受胎率并不见得提高，特别是青年母牛更不能勉强，否则容易引起子宫创伤。

3．输精量 细管冻精每支为0.25毫升，内含直线前进运动精子数在1000万个以上。在显微镜下检查精子活力不应低于0.35。每次输精用一支。

4．输精次数 在一个情期内大多采用一次输精，只要掌握好发情适期，这样可以省精液、液氮和药品消耗，输精时要掌握适深、慢插、轻注、缓出，防止精液倒流。

5 ．输精时间 一般认为，在排卵前0～12小时即发情盛期过后直至末期输精受胎率最高。在生产中，排卵时间的确定，必须从外阴部肿胀度、阴道粘膜的变化、粘液量和质的变化、子宫颈口开张的程度、是否接受公牛的爬跨、直检卵巢卵泡的变化等方面综合分析，才能找出最适宜配种时间。输精的最佳时间是牛出现静立发情后的12～24小时。实际工作中，如上午发现母牛接受爬跨安静不动，应于下午或傍晚配种；如下午接受爬跨，应于第二天清晨配种。

6 ．输精中应注意的几个问题 冷天输精时，要保持温度的恒定，即要求输精管和解冻后精液同温，以免对精子造成温差打击。 认真耐心地坚持把精液输送到子宫颈深部。个别牛努责弓腰，应采取拍腰，缓解努责，等努责过后再插入输精管。 输精管进入子宫颈口后如推进有困难，可能由于子宫颈粘膜皱襞的阻碍，应改变角度或稍后退，然后再插入，切忌硬插。

遇子宫角下垂或子宫不正，连带子宫颈改变生理位置，可用手轻握子宫颈，慢慢向上提拉，使它顺应输精管的方向就容易插入。 输精时如发现母牛子宫或阴道有炎性分泌物，应停止输精，进行治疗。 输精后如发现有倒流现象，应立即补输一次。

（三）妊娠与分娩 1．妊娠诊断 妊娠诊断，尤其是早期妊娠诊断，是一项十分重要的工作，因为，如果已确定妊娠，可以加强饲养管理，采取保胎措施，防止假发情引起误配，对于已检查出未曾妊娠的母牛，应密切注意下次发情，及时组织配种。妊娠诊断的方法有：

外部观察 输精后的母牛，如果20天、40天两个情期不见发情，就初步可以认为已经妊娠，母牛如果已孕，还表现膘情有所好转，被毛光泽，食欲有所增加。5个月后可以明显看出腹围增大。 阴道检查 可以作为妊娠诊断的辅助方法。妊娠20天后，粘膜呈苍白，粘膜表面血管网不清晰，干燥无光泽，上面有一层粘稠的胶状物，阴道粘液量少而粘稠，混浊，不透明，呈灰白色。

直肠检查 排卵这一侧的卵巢上有妊娠黄体。妊娠侧子宫角增大，两个子宫角的位置、大小、形状、软硬度均不对称。子宫角间沟逐渐消失。在妊娠3个月后，在髂内动脉的分枝上，可以摸到较粗的子宫中动脉，触压此血管，有一种“滋滋”的血液往后冲动的感觉。妊娠4个月以后能明显地摸到如蚕豆大小的子叶。

B超检测 怀孕43天 怀孕50天 怀孕66天 怀孕89天

2 ．分娩预兆 肉牛的妊娠期平均为280天；怀公犊时妊娠期要比怀母犊长。

母牛临产前，在生理上发生一系列变化，主要有以下征兆：产前2～3天，乳头可挤出初乳，当出现漏乳现象后数小时至1天左右即可分娩；产前1周堵在子宫颈口的子宫颈塞(栓)溶化变为透明黏液，临产前0.5～1小时排出，吊在后面；临产前数天，尾根两侧下陷，只能摸到一堆松弛的组织，呈塌陷状；临近分娩的母牛起卧不安，频频排尿，头不时回顾腹部，尾部不时高举。

3 ．分娩与助产 胎儿产出期一般持续0.5～2小时（范围为0.5～6小时）。胎衣排出期的时间比较长。一般在产出胎儿后4～6小时(范围0.5～18小时)，最长不超过24小时。如超过上述时间即可认为是胎衣不下，属病理现象。

母牛分娩大多为顺产，但也需进行助产。如果胎儿能自然娩出，而且母牛体力尚可，则不需要助产，暂时等待，密切注意母牛有什么变化即可。如发现倒生时，应及早拉出胎儿，防止胎儿腹部进入产道后脐带有可能被压在骨盆底下，造成窒息死亡。胎儿娩出后，立即去除口、鼻部粘液，防止窒息，同时要剪断脐带，用5％浓碘酊浸泡脐带彻底消毒，防止感染破伤风。

4 ．产后护理 产后母畜的护理 注意外阴部的清洁，最好每天能将沾在母牛外阴部及其周围的恶露洗净。垫草要经常注意更换，保持干净。要观察恶露排出情况，产后恶露的彻底排出一般为10～12天，如果产后3周还有分泌物排出，表明子宫内发生了病理变化，需进行药物治疗。 及时补充体内水分。母牛产后全身虚弱，十分疲劳，这时补充15～20千克温热的麦麸水汤(麦麸l千克、盐50～l00克，加红糖0.25～0.5千克)，以补充分娩时体内水分的消耗和体力的恢复。

新生犊牛的护理 犊牛产出后要注意保暖，冬季和早春产犊，要转到温室饲养。及时哺乳，产后吃初乳越早越好。初乳浓稠，含有丰富的抗体，有轻度通便作用，对新生犊牛的抗病力及健康发育有着重要的意义。

六）强化繁殖人员管理 ► 从母牛产犊开始就密切关注母牛子宫净化及其恢复情况； ► 提高发情牛鉴定准确率及检出率； ► 从取送、解冻精液到输精过程每个环节都要按规程要求去操作；

► 配种后要对妊娠牛全程做好防流保胎工作，特别是妊娠前后三个月尤为重要； ► 强化繁殖数据、信息的管理与应用，对总结分析繁殖上存在的问题，提高繁殖管理水平大有益处； ► 对相关技术岗位人员的考核要与繁殖相关控制点结合进行。

（四）提高繁殖力 1、繁殖力的概念 繁殖力是指家畜维持正常生殖机能、繁衍后代的能力。对于种公畜来讲，其繁殖力就是生产力。繁殖力的高低直接影响到家畜数量的增加，质量的提高及生产力水平，企业的经济效益。

2 ．影响繁殖力的因素 遗传因素 是影响家畜繁殖率的主要因素。 遗传因素 是影响家畜繁殖率的主要因素。 营养因素 饲料能量不足，不但影响幼龄母牛的正常生长发育，而且推迟性成熟和适配年龄。如果饲料中缺乏矿物质，尤其是磷，则会推迟性成熟。北方地区缺乏硒，易引起青年牛初情期推迟，成年母牛不发情、发情不规律。钙缺乏能导致骨质疏松、胎衣不下、产后瘫痪等。饲料中维生素A不足，容易造成母牛流产、死胎和弱胎，还常发生胎衣不下。

环境因素 母牛在炎热的夏季，配种受胎率降低。公牛由于气温升高，造成睾丸及附睾温度上升，影响正常的生殖能力和精液品质，也影响繁殖力。 冻精质量与输精技术的因素 精液品质不佳不仅影响母牛的受胎率，而且易造成母牛生殖疾病。输精技术水平的高低是影响繁殖率的重要因素。对发情母牛输精时间掌握不当，或对母牛早期妊娠诊断不及时、不准确，而失去复配机会，都会影响母牛受胎率的提高。

疾病因素 生殖系统的疾病，直接影响正常繁殖机能，如卵巢疾病导致不能排卵或排卵不正常；生殖道炎症直接影响精子与卵子的结合或结合后不能正常着床等。

3 ．提高繁殖力的措施 积极治疗繁殖机能障碍 对异常发情、产后50天内未见发情的牛只，应及时进行生殖系统检查，对确诊患有繁殖机能障碍的牛只，应及时进行治疗。

提高母牛受配率、受胎率 ①提高适龄母牛比例，加强对基础母牛的保护。定期清群、治疗或淘汰各类发情异常或劣质母牛，抓好母牛膘情，做好发情鉴定和适时配种工作，减少或避免漏配、失配、误配，提高母牛受配率。及早诊断母牦牛妊娠与否，对避免母牦牛空怀，提高受胎率和防止母牦牛流产有着重要作用。在生产中要加强放牧管理及冬春的补饲，使牦牛群早日复壮、发情，在配种季节母牦牛群配备体质好、性欲旺盛、配种能力强的壮龄公牛。

②熟悉母牛繁殖情况，做好牛群登记组织工作。 ③狠抓上年空怀母牛的适时配种，对上年空怀母牛，下一年早春来到时要充分注意母牛发情补配工作。 ④抓好犊牛按时断奶工作，促进母牛性周期活动和卵泡发育，能提早发情，提高受配率。

⑤及时检查和治疗母牛不孕症，找出不孕的原因和发病规律，才能找出防治母牛不孕症的有效措施和方法。 ⑥根据母牛不同的生理阶段，合理、全面、均衡、适量地提供营养成分，以满足母牛自身维持和胎儿生长发育、哺乳的需要，确保母牛处于良好的繁殖状态，过高过低的营养水平均会影响母牛发情受孕，导致代谢疾病。

防止流产 对妊娠后5个月的母牛要精心饲养，禁止饲喂发霉、腐败、变质的饲料；加强管理，要熟悉母牛的配种日期和预产期，防止踢、挤、撞；对役肉兼用的母牛要合理使役，怀孕四、五个月后要掌握使役强度，防止使役过重或急赶引起流产，临产前1～2个月停止使役。对妊娠母牦牛，严禁乱打和追赶，进出圈舍时注意拥挤，防止流产。

提高犊牛成活率 狠抓孕牛饲养管理，改善母牛的饲草、饲料品种，特别对长期喂麦秸和棉籽饼者，冬春要加喂青干草或青贮饲料，春夏及早供应青草，有利于胎儿生长和犊牛成活。抓好接产、助产和初生犊牛护理和培育工作。

推广应用繁殖新技术 目前母牛的发情、配种、妊娠、分娩、犊牛的断奶培育等各个环节都已有较为成熟的控制技术，如同期发情、超数排卵、冷冻精液、人工授精、诱发双胎、胚胎移植、性别控制、诱导分娩等，都可以快速提高牛特别是良种牛的繁殖效率。

（五）繁殖新技术及利用

1.胚胎移植技术 选用良种母牛通过激素的处理，使其卵巢上有多个卵泡生成（也既是进行超数排卵），再用优秀的种公牛精液进行人工授精，然后将受精后的早期胚胎从子宫里取出，分别移植到多头生理状态相同的仅有一般生产性能的母牛子宫内让其怀孕，最后产出多头优良后代，这就是通常所说的“借腹怀胎”。

牛是单胎动物，自然状态下一胎只能产一犊，若按照牛繁殖年龄10岁计算，其一生最多只能留下7～8个后代，对奶牛而言，只能留下3～4头母犊，而利用胚胎移植技术可以克服自然条件下动物繁殖周期和繁殖效率的限制，其繁殖后代的速度是自然状态下的十几倍甚至几十倍，从而快速增加良种牛的数量。

牛胚胎移植技术在纯种扩繁上的意义： 1.充分发挥优良母牛的繁殖潜力 2.缩短时代间隔，及早进行后裔测定 3.诱发肉牛产双胎 4.代替种畜的引进 5.保存品种资源 6.作为研究手段 7.通过胚胎移植进行奶牛品种改良 8.利用胚胎移植进行纯种奶牛扩繁

鉴于胚胎移植的诸多优点和高额费用，将胚胎移植应用于我国商品肉牛生产是不合理的，但应用于纯种扩繁则是快速而实用的手段。

1）同期发情技术 同期发情又称同步发情，就是利用某些激素人为地控制并调整一群母畜发情周期的进程，使之在预定时间内集中发情，集中配种。

同期发情不但用于周期性发情的母牛，而且也能使乏情状态的母牛出现性周期活动。例如卵巢静止的母牛经过孕激素处理后，很多表现发情；因持久黄体存在而长期不发情的母牛，用前列腺素处理后，由于黄体消散，生殖机能随之得以恢复。因此，可以提高繁殖率。 用于母牛同期发情处理的药物种类很多，方法也有多种，但较适用的是孕激素阴道栓塞法以及前列腺素法。

孕激素阴道栓塞法 将含孕激素的栓塞物放在子宫颈外口处，其中激素即渗出。处理结束时，将其取出即可，或同时注射孕马血清促性腺激素。 前列腺素法 前列腺素的投药方法有子宫注入和肌肉注射两种，前者用药量少，效果明显，但注入时较为困难；后者虽操作容易，但用药量需适当增加。

孕 激 素 法 同 期 发 情 机 理

前 列 腺 素 法 同 期 发 情 机 理

2）超数排卵技术 超数排卵简称超排，就是在母畜发情周期的适当时间注射促性腺激素，使卵巢产生比自然生理条件下更多的卵泡并排卵。 牛在自然状态时一个情期只有一个卵泡发育成熟并排卵，受精后只产一犊。进行超数排卵处理，可诱发多个卵泡发育，增加受胎比例，提高繁殖率。 超数排卵是胚胎移植技术中不可缺少的一个环节，因为只有能够得到足量的胚胎才能充分发挥胚胎移植的实际作用， 提高应用效果。

FSH ＋ CIDR ＋ PG 法 牛 超 排

3）非手术冲胚 采卵前先检查黄体数，估算可收集胚胎数。在第一、二尾椎骨之间硬膜外腔麻醉，麻醉剂用盐酸普鲁卡因或利多卡因2～10 ml，肌肉注射静松灵1～1.5ml。插入冲卵管，先进入排卵较多一侧的子宫角，钢芯反复引导至大弯前，充起气球固定冲卵管。依子宫大小及冲卵管在子宫内位置的深浅，注入8～20ml空气。采卵时应注意，前1～2次冲洗对卵的回收很关键，子宫角不要充得太满，以后液量逐渐增加。每次轻缓地按摩子宫角，力争彻底回收，应回收90%～100%注入子宫的液体。一侧冲洗5～6次,约消耗500 ml冲胚液。

冲胚示意图

胚胎移植 （1）胚胎装管 一般用0.25 ml塑料细管，三段液体夹二段空气，中段放胚胎。胚胎的位置可稍靠近出口端，以便于推出。 （2）移植操作　移植前检查受体牛的黄体，黄体的基部充实，一般最大直径处约为1.5cm。将受体母牛麻醉，用1.5～3 ml利多卡因硬膜外鞘注射，0.3～1 ml的静松灵全身镇静。移植时，彻底消毒外阴，扒开受体母牛阴唇，插入移植器至子宫颈外口，将手臂伸入直肠，顶开阴道保护鞘或保护膜，轻缓地通过子宫颈进入移植侧(黄体侧)子宫角，移植器行至大弯或更深部位时，缓慢地推钢芯将胚胎注入。

3）胚胎移植