Prusiner等应用化学方法提纯瘙痒病原因子, 分离得到了具有高度感染性的组分— 一种分 子量为27-30kd的特殊糖蛋白,将其定名为“ 糖蛋白侵染子”(缩写为prion)过去的中文 译名为朊病毒,现译为朊粒,其对应的单体 称为“朊粒蛋白”(PrP)。

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Prusiner等应用化学方法提纯瘙痒病原因子, 分离得到了具有高度感染性的组分— 一种分 子量为27-30kd的特殊糖蛋白,将其定名为“ 糖蛋白侵染子”(缩写为prion)过去的中文 译名为朊病毒,现译为朊粒,其对应的单体 称为“朊粒蛋白”(PrP)。

朊粒蛋白( PrP ) 分子量为27-30kd的单体,称为“朊粒蛋白”(PrP)。 PrPC含四个α-螺旋,几乎没有β-折叠。而PrPSC链上有变构,转换成四个β-折叠。

微生物检验 1.标本采集 以检测蛋白酶抗性的PrPRES为诊断 标志,取脑脊液和病变组织等标本, 应立即检测或冻存待用,非固定标 本用做免疫印迹,固定标本用作染 色镜检,或做免疫组化检测。

标本直接检查 1.电子显微镜检查 羊瘙痒病相关 纤维(SAF)是朊粒感染的标志之一。 有两种存在形式: I型纤维直径为 1.电子显微镜检查 羊瘙痒病相关 纤维(SAF)是朊粒感染的标志之一。 有两种存在形式: I型纤维直径为 11~14nm,Ⅱ型纤维直径为27~34nm。

2.目前诊断朊粒感染的依据主要依 赖神经病理学检查,海绵状病变稀 疏地分布整个大脑皮层,神经元消 失,星状细胞增生,典型病变为融 合性海绵状空泡,空泡周围有大量 淀粉样斑块,用 HE和PAS染色清晰 可见。PrP淀粉斑也是朊粒的特异标 志, CJD病人中约有10%阳性。

3.快速简易的免疫学方法 prpSC是人朊粒感染的特异标志,用 病人的脑组织经蛋白酶有限消化去除 正常细胞的PrPC,然后用斑点免疫

4.PrP基因检测 取病变神经组织细胞或外周血白细胞 测定第20号染色体短臂上的PrP基因 序列,可诊断遗传型朊粒感染性疾病。 用PCR扩增出PrP全基因,用位点特异 性的寡核苷酸探针杂交,筛选出突变 基因,再进行序列分析,找出PrP基 因突变的位点。

5.朊粒的分离 可用猴、羊、豹、猫及豚鼠等动物进 行感染试验,但用动物分离人朊粒成 功率较低,最近制备的含有人PrP基 因的转基因小鼠对人朊粒敏感,但用 动物分离朊粒的时间的较长,一般需 200天以上,不适于实验室检查。目 前仍以病理检查作为诊断朊粒感染的 手段。