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实验室生物安全 和职业防护 上海市临床检验中心
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涉及病原微生物实验室生物安全法 律法规与监督管理 中华人民共和国传染病防治法 法律 : 中华人民共和国传染病防治法 病原微生物实验室生物安全管理条例、医疗废物管 理条例 法规 : 病原微生物实验室生物安全管理条例、医疗废物管 理条例 传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动 物模型的暂行管理办法、传染性非典型肺炎病毒研究 实验室暂行管理办法、人间传染的病原微生物名录 规章 : 传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动 物模型的暂行管理办法、传染性非典型肺炎病毒研究 实验室暂行管理办法、人间传染的病原微生物名录 《实验室生物安全通用要求》( GB19489 - 2004 )、 《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》( WS 233 - 2002 )、《生物安全实验室建设技术规范》 标准 : 《实验室生物安全通用要求》( GB19489 - 2004 )、 《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》( WS 233 - 2002 )、《生物安全实验室建设技术规范》 上海市病原微生物实验室生物安全管理实施细则、 上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范 规范 : 上海市病原微生物实验室生物安全管理实施细则、 上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范
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实验室生物安全 操作者 操作对象 环境
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重硬件,轻软件 把生物安全当做科学实验之外的 “ 行政 ” 任务 谁来强制执行? 目前存在的普遍问题
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经血或体液传播的职业暴露 经皮肤或粘膜暴露 HIV 、 HBV 、 HCV 感染为主 传播方式:针刺或其他锐器损害 病毒入皮肤抓伤、皮损、擦伤、烧伤 病毒因意外溅入眼、鼻、口 三种病毒不会经空气传播
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HBV 、 HCV 和 HIV 职业感染 的相对危险性 病毒HBVHCVHIV 健康工作者的血 清阳转率( % ) 3 - 35 1 - 28 0.12 - 0.4 每 ml 血中病 毒颗粒数 10 2 - 10 8 10 - 10 6 10 - 10 3 针头刺伤的 传播概率 6 - 30 0.75 - 10 0 - 3 美国 CDC
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全球卫生保健人员被针刺伤 病种 传染力 流行率 ( 中国 ) ( 中国 ) HBV 30% 14% HCV 6% 4.1% HCV 6% 4.1% HIV 0.3% <0.1% HIV 0.3% <0.1%
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健康工作者 HIV 感染的职业危险 暴露类型经皮损粘膜经皮损和粘膜未知皮肤 报告数量 截 至 99 年 6 月 475210 单次 HIV 暴露的 危险性(%) 0.30.03<0.03
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HIV 职业暴露平均感染率 皮肤破损 0.33% ( 0.2-0.5% ) 粘膜接触 0.09% ( 0.06-0.5% )
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增加 HIV 感染的危险因素 接触血液量大,接触时间又长 受损伤口深 造成伤口的器械上有明显的血迹 器械曾插入静脉或动脉内(采血的针头) 接触的患者在事故后 60 天内死于 AIDS HIV 培养物 病人处于急性感染与发病期 CD4 低, VL 高
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上海市发生 HIV 职业暴露 疾控中心 医院 医院 妇产科 妇产科 护士 护士 检验科 检验科
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要求做的几个要素 组成生物安全组织体系 生物安全危害评估,明确危害防护 等级 建立实验室生物安全防护设施设备 建立实验室生物安全手册,包含安 全行为规范、安全操作规程、培训、 健康监护、应急处置预案
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上海市临床检验实验室生物安全实施方法 实验室生物安全自我评估, 明确防护等级 向当地卫生监督部门上报备案 人员培训,合格颁上岗证 当地卫生监督部门现场检查 当地卫生监督部门批准
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实验室感染取决于 病原微生物自身性质:毒力、感染量、侵 入途径 感染对象状况:免疫状况(性别、种族、 年龄、怀孕、免疫耐受、免疫抑制、疾病 等) 实验室安全防护措施力度(生物安全): 安全操作技术、安全设备、实验室设施的 安全构造
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不同病原微生物的感染剂量
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实验室主要生物危害途径
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实验室感染传播链及其控制手段 容器中的病原体 泄漏 预防接种 感染途径 / 感染剂量 传播 个人防护装备 易感宿主 规程 / 设备 潜伏期 传染病监测
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危害评估的原则 病原微生物危害程度 不同的实验活动
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病原微生物危害程度分类主要依据 微生物的致病性。致病性越强,导致的疾病越严重,其等 级越高 微生物的传播方式和宿主范围。它们可能会受到当地人群 已有的免疫水平、宿主群体的密度和流动、适宜媒介的存在 以及环境卫生水平等因素的影响 当地所具备的有效预防措施。包括:通过接种疫苗或给予 抗血清的预防(被动免疫);卫生措施,例如食品和饮水的 卫生;动物宿主或节肢动物媒介的控制 当地所具备的有效治疗措施。包括:被动免疫、暴露后接 种疫苗以及使用抗生素、抗病毒药物和化学治疗药物,还应 考虑出现耐药菌株的可能性
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《病原微生物实验室生物安全管理条例》 第一类 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微 生物,以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物 第二类 是指能够引起人类或者动物严重疾病,比较容 易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间 传播的微生物 第三类 是指能够引起人类或者动物疾病,但一般情况 下对人、动物或者环境不构成严重危害,传播风险有 限,实验室感染后很少引起严重疾病,并且具备有效 治疗和预防措施的微生物 第四类 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病 的微生物
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不同的实验活动的危害 对于同一病原微生物而言,从事不同的实 验活动,操作者接触微生物的数量、浓度、 可能的感染途径是不同的,一旦暴露,其后 果也是不同的 对于不同的实验活动均应进行危害评估, 以指导操作者采取合适的生物安全防护
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根据以上实际情况,临床微生物实验室 及免疫学病原体筛检的防护标准应该是 病原体危害程度分类 实验活动 BSL 级别 各类肠道致病菌 3 类( VC 2 类) BSL-2 各类呼吸道致病菌 3 类( TB 2 类) BSL-2 各类条件致病菌 3类3类3类3类BSL-2 乙型肝炎病毒 3类3类3类3类BSL-2 丙型肝炎病毒 3类3类3类3类BSL-2 爱滋病病毒 2类2类2类2类BSL-2 梅毒螺旋体 3类3类3类3类BSL-2
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实验室生物安全组织体系 法人 责任部门 实验室负责人 实验室生物安全 管理员 人物
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BSL-1
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BSL-2 必须强调对污染的针头或利器的使用要 非常谨慎。 对易于通过气溶胶途径传播的微生物、 具有增加工作人员暴露气溶胶或高度飞 溅物的程序 二级生物安全防护水平微生物操作必需 在一级生物安全防护水平的基础之上, 增加生物安全柜、高压灭菌器、安全离 心机罩帽、防溅罩或面罩等。
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BSL-2 标准的 BSL-2 实验室除了满足 BSL-1 的要求以外,在门上增 加了生物危险标志、 II 级生物安全柜。按国标( GB19489- 2004 ), 还要配备高压蒸汽灭菌器、洗眼器
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良好的实验室操作 技术( SOP )
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实验室操作与技术 工作时进出受约束或受限制 禁止吃、喝、吸烟 禁止用口移液 将溅洒和气溶胶减到最少 每天对工作面消毒 将废物消毒 保持对昆虫和啮齿类动物的控制
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实验室操作与技术:采用机械 式移液装置
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实验室操作与技术:洗手
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实验室操作与技术:微生物实验 室的准入
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安全设备(初级屏障) 防护服 实验室工作 外套 手套
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安全设备(初级屏障) 人员防护设备 面部保护 眼部保护
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安全设备(初级屏障) 高压灭菌锅 洗眼水站
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II 级生物安全柜的气流方向
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II 级生物安全柜的操作
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针与锋利器具的防范
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特殊措施 进入的原则和手续 生物危害警告标志 针对实验室的生物 安全手册 每年更新资料培训
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特殊措施 使用防水的运输容器
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病毒分離時液体落下 消毒用 70 %酒精 擦拭
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双重锁定转头盖
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生物安全转头 样品瓶外套是转头的一部分 样品瓶可于安全柜内打开 保证漏出的样品保留在瓶内
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仪器相关危险 干燥器爆裂、瓶子碎片和感染性物质飞出 培养物搅拌器,混合器,搅拌 器 产生气溶胶、喷溅和溢出 皮下注射针头意外接种 产生气溶胶或感染性物质溢出 离心机产生气溶胶、溅出和管子破裂 超速离心机管子破裂 高速搅拌器,组织匀浆器飞沫、渗漏和容器破裂 超声波破碎机、超声波清洁器产生气溶胶、听力受损、皮炎 冻干机(冷冻干燥机)产生气溶胶、直接接触污染 水浴和沃伯格浴微生物生长,叠氮化钠和一些金属 形成爆炸复合物
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Aerosol generating
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操作一次可产生各种严重程度 微生物气溶胶的活动
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健康和医疗监测 确保实验室人员的健康状况得到足够监测。 这样做的目的是监控因职业而导致的疾病 可通过以下工作达到上述目的: 根据需要,提供主动或被动免疫 为实验室获得性感染的早期检测提供便利 杜绝高度易感人群(如孕妇)从事高危险 性的实验室工作 提供有效的个体防护设施及规程
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健康和医疗监测 医疗监测须知 姓名: 致员工: 请妥善保管此卡。当有不明原因发热时,请将此卡交 给你的医生,并通知如下人员之一。 姓名: 工作单位: 家庭住址: 家庭住址: 持卡人 照 片 医疗联系卡的推荐格式(正面)
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健康和医疗监测 致医生: 持卡人工作单位是: 地 址: 电 话电 话:电 话电 话: 实验室名称: 在这里,有致病性的病毒、立克次氏体、细菌、原虫或寄生虫。 如遇到持卡人不明原因发热时,请给他的老板打电话,以了解该 患者曾暴露于何种病原体。 医疗联系卡的推荐格式(背面)
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培训 必需有培训证书或通过实验室安全考试 告知实验人员要认识和控制实验室的危险因素 是预防实验室获得性感染的关键,也是预防和 控制实验室事故和意外的关键 因此,在安全措施方面的继续教育是必须的 一个有效的安全规划起始于实验室领导者,他 应确保安全的实验室操作及规程已被融合到对 员工的基本培训中 安全措施的培训应该成为实验室新员工所不可 缺少的部分
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