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Cerebrospinal Fluid, CSF
脑脊液 Cerebrospinal Fluid, CSF
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Cerebrospinal fluid CSF is a clear colourless fluid contained in the subarachnoid space and ventricular system of the brain and spinal cord.
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一、概述overview (一)历史: (二)CSF的生成 : (三)CSF循环 : (四)CSF的功能 : (五)CSF的组成成分:
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(二)CSF的生成: 婴儿为50ml;成人为150ml
CSF生成率是0.3~0.4ml/min,每天分泌的量不超过400~500ml,4~8小时更新1次,每日更换3~4次。 (返回)
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(三)CSF循环: 脉络丛(脑室)主动分泌和超滤作用产生
侧脑室 室间孔 第3脑室 中脑导水管 第4脑室 正中孔和外侧孔 珠网膜下腔 珠网膜上矢状窦(静脉窦)吸收后进入静脉 返回
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(四)CSF的功能 1.保护功能 2.调节颅内压 3.代谢作用 返回
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(五)CSF的组成成分: Blood-brain barrier(BBB):The barrier exists between the blood and the central nervous system, the brain and the spinal cord. 1.易透过的物质:Na+,cl-,Mg2+,CO2,乙醇。 2.不易透过的物质:清蛋白,葡萄糖,尿素,氨基酸,肌酐,酮体,酶,乳酸。 3.最不易透过的物质:纤维蛋白原,胆红素,抗体,补体,胆固醇等。 返回
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二、CSF采集spinal tap (一)穿刺部位tap position: ——————————————————— CSF压力的正常值
卧位 坐位 —————————————————————————————————— 腰椎穿刺 ~180mmH2O ~400 mmH2O lumbar puncture 小脑延髓池穿刺 ~100 mmH2O cerebellomedullary cistem 脑室穿刺 ~120 mmH2O 或负数 lateral ventricle
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(二)腰椎穿刺适应证 lumbar puncture indication
不明原因剧烈头痛、昏迷、瘫痪脑膜刺激症 疑颅内出血,脑膜白血病,神经梅毒 锥管给药、造影、腰麻
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(三)禁忌证contraindication
疑有颅内高压者 处于休克,衰竭或濒危状态者 腰椎TB、穿刺部位有化脓性感染灶 颅后窝有占位性病变或伴有脑干症状者
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(四)标本采集specimen collection
无菌采集 压力测定 收集三管 T1 bacterial examination T2 chemical and immunological examination T3 cell count 各1~2ml,立即送检。
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二、CSF常规检查内容 content of CSF routin examination
(一)一般性状检查general examination 1.颜色colour 2.混浊度turbidness即透明度transparency 3.薄膜film形成和凝块 coagulum 4.比密specific gravity 5.pH
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1.颜色colour: 正常:无色透明 (1) 红色 病理:呈红色、红褐色、柠檬黄色或淡黄色。
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血性CSF的大致红细胞数 外观和性状 估计红细胞数/L 轻度浑浊 (500~1000)×106 粉红色 (1000~3000)×106
轻度浑浊 (500~1000)×106 粉红色 (1000~3000)×106 明显红色 大于5000×106 血性 大于10000×106
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区别新鲜出血和陈旧出血 三管试验: 穿刺出血:留取标本时,第一管为血性,以后两管颜色逐渐变淡,红细胞计数结果也依次减少。
珠网膜下腔出血:三管呈均匀红色。
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区别新鲜出血和陈旧出血 新鲜出血 陈旧出血 外观: 浑浊、易形成凝块 较透明 离心沉淀: 无色透明 红、褐、黄 上清液 OB(+)
新鲜出血 陈旧出血 外观: 浑浊、易形成凝块 较透明 离心沉淀: 无色透明 红、褐、黄 上清液 OB(+) 红细胞形态 :无变化或无皱缩 有改变 白细胞数: 不增加 继发性或反 应性增加 红细胞/白细胞 : 500 : 失去正常比例
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2.黄色:CSF黄变症cxanthochromin
出血性 郁滞性 梗阻性 黄疸性 其他色素
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3.其他颜色 棕色或黑色 绿色 米汤样浑浊 乳白色
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2.混浊度即透明度 观察方法:在腰穿后1小时取CSF 3~5ml,置无色透明玻璃试管内,在自然光线下进行观察。 报告: 清亮 微混 混浊
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3.薄膜形成和凝块 normal: pathology: purulent meningitis——往往1~2小时内形成薄膜,凝块或沉淀
tuberculous meningitis——12~24小时形成膜状物或纤细凝块 neurosyphilis——出现小絮状凝块而不形成薄膜 subarachnoid cavity obstruct——其远端部位的CSF因蛋白含量呈黄色胶胨状
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4.比密 正常:1.006~1.008 增高:cephalitis、meningitis、brain hemorrhage、brain verminosis and tumor,etc。
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5.PH 正常:7.31~7.34
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二、显微镜检查 microscopic examination
CSF细胞的种类 CSF主要来源于血液中的细胞 去向主要通过淋巴系统引流、变性和血液回流。 正常: 病理:
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1.细胞计数 (1)细胞总数 (2)白细胞计数法 (3)红细胞计数 (4)白细胞正常值:0~10 × 106/L 2.白细胞分类 (1)直接法: (2)染色法: 正常 淋巴:单核 = 7:3
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4.临床意义: clinic significance
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(1)CSF中性粒细胞增多:脑膜炎症,特别是急性炎症的渗出期;出血和脑挫伤等。
(2)淋巴细胞占优势:急性病毒感染、急性细菌性感染的恢复期、慢性细菌性感染或霉菌性感染,肉芽肿等。 (3)嗜酸细胞增多:见于脑寄生虫病、变态反应性疾病。 (4)白细胞增多,原始/幼稚增多:急性脑膜白血病。
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(5)吞噬细胞:如出现多见于中枢神经出血、炎症、外伤等,最常见于珠网膜下腔出血。
(6)肿瘤细胞:脑、脊髓或软脑膜恶性肿瘤,特别是肉瘤如黑色素肉瘤或髓母细胞瘤 (7)细胞数×106/L:化脑、流脑极度增高大于1000×106/L以中性粒细胞为主。 结脑初以中性粒细胞为主,后淋巴细胞增多,10~500×106/L。
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(三)化学检查chemical examination
1.蛋白质protein: 部位 蛋白含量(mg/l) 脑室 ~150 脑池 ~250 腰部脊髓珠网膜下腔 ~400
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1)蛋白定性:正常阴性 (1)潘氏法(Pandy’s):蛋白+石炭酸——不溶性蛋白盐白色沉淀,沉淀量与蛋白量成正比结果易于观察。
方法特点:样本用量少,操作简单,灵敏度高,总蛋白大于0.25g/l即可阳性。 (2)Ross-Jone’s:球蛋白+半饱和硫酸铵——白色 沉淀 特点:检测球蛋白,敏感性较弱。 (3)Nonne-Apett’s(诺-爱) 特点:先测球蛋白,除去球蛋白后,再以加热醋酸法测白蛋白,特异性高于潘氏,但操作较繁,极少选用。 (4)李文生试验Levinson’s:用磺硫酸、氯化高汞分别沉淀蛋白根据两管沉淀物比例以区分化脑/结脑。
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2)蛋白定量 (1)比浊法:磺基水杨酸(沉淀白蛋白) —硫酸钠(沉淀球蛋白)浊度法。 特点:操作简单,敏感性不如考马氏亮蓝法,必须先离
心,以排除细胞及细胞蛋白的影响。 (2)染料结合法:考马氏亮蓝法G-250 特点:灵敏度高,标本用量少,重复性好,但对球蛋白 的显色过浅,使结果偏低;对pH要求较严;形成的考 马氏亮蓝-蛋白复合物易黏附器皿,影响比色杯清洗 困难,要用95%乙醇或甲醇清洗。 (3)化学结合法:邻苯三酚红钼络和法 特点:敏感度同上,色素不吸附器皿,国产价格低廉,故应用较广。
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3)临床意义clinic significance
增高 脑梗阻、脑炎、脑出血、脑软化、及脑退行性变、颅内占位病变等。 减低 CSF鼻漏、耳漏、颅内压增高、甲亢。
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2.葡萄糖glucose 腰穿: 2.5~4.4mmol/L 小脑延髓池:2.8~4.2mmol/L 脑室: 3.0~4.4mmol/L
CSF中葡萄糖含量取决于以下几种因素: 1.血液葡萄糖的浓度 2.血脑屏障的通透性 3.CSF中葡萄糖的酵解程度 4.携带运转系统的功能
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1)定性(半定量):基本同尿糖班氏法 2)定量:葡萄糖氧化酶法 3)临床意义: 增加:糖尿病、早产儿、新生儿、脑水肿、脑溢血。 下降:化脑减少最明显、霉脑、结脑、脑瘤、神经梅毒、低血糖。
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3.氯化物chloride CSF中氯化物主要是NaCl含量高于血中正常normal: 120~130mmol/L
临床意义clinic significance: 减低 见于结脑最明显、流脑、化脑、低氯血症,病毒性脑炎无显著变化。 增高 见于尿毒症、肾炎。
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(四)细菌检查bacteriologic examination
1.direct smear Gram’stain Neisseria menigitidis、streptococcus pneumoniae Acid-fast stain tubercle bacillus India ink preparation Cryptococcus 2.bacterial culture Staphylococcus aureus、streptococcus pneumoniae、Hemolytic streptococcus 、Escherichia coli Neisseria menigitidis、Haemophilus influenzae
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三、选择检验项目 (一)蛋白 1.蛋白电泳: (1)CSF和血清蛋白电泳的正常值 蛋白成分 脑脊液(%) 血清(%) 前白蛋白 2~6 无
蛋白成分 脑脊液(%) 血清(%) 前白蛋白 ~ 无 白蛋白 ~ ~68 α1球蛋白 ~ ~6 α2球蛋白 ~ ~13 β球蛋白 ~ ~12 γ球蛋白 ~ ~20
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(2)临床意义: 前白蛋白 白蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白
(2)临床意义: 前白蛋白 白蛋白 α1球蛋白 α2球蛋白 舞蹈病 脑血管 脑部感染 脑部肿瘤 帕金森氏 疾病 β球蛋白 γ1球蛋白 γ2球蛋白 退行性变 周围神经炎 多发性硬化症 脑肿瘤 病毒脑
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(2)比值增加:神经梅毒、多发性硬化症、脑脊髓膜炎、结节病等。 减低:脊髓压迫症、脑瘤、化脑的急性期。
2.蛋白商 protein quotient 指球蛋白与清蛋白的比值 (1) 球蛋白 按公式计算:比值= —————— 清蛋白 正常:0.3~0.7 (2)比值增加:神经梅毒、多发性硬化症、脑脊髓膜炎、结节病等。 减低:脊髓压迫症、脑瘤、化脑的急性期。
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3.免疫球蛋白immuneglobulin
CSF免疫球蛋白正常值 类型 参考值(mg/L) IgA ~6 IgG ~40 IgM ~13 IgE
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CSF免疫球蛋白正常值 IgG亚型 占IgG总量的百分比(%) IgG ±8 IgG ±8 IgG ±4 IgG ±2.5
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1970年 Tourtellotte 建议:IgG CSF比值=IgG CSF/Alb CSF(≤0.28)
1972年Delpech和Lichtblau建议:IgG指数 1977年Tibbling对此指标进行标记化 IgG CSF/Alb CSF —————————— ≤ 0.7 IgG S/Alb S 1975年Tourtellotte为了更好地评价中枢神经IgG合成率创立了每日中枢神经IgG合成率(IgG SYN): IgG SYN=[(IgG CSF-IgG S/369)-(Alb CSF-AlB S/230)×IgG S/AlB S × 0.43] × 5 (mg/dl)≤3.3mg/dl
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4.髓鞘碱性蛋白 myelin basic protein,MBP MBP测定作为多发性硬化症的辅助诊断指标,但缺乏特异性。急性中枢神经系疾病如神经梅毒、脑血管意外、外伤等。 正常:<4ug/L
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(二)酶学检查 enzyme labeled compound assay
有关疾病CSF酶诊断指标的选择 疾病名称 CSF酶 细菌性脑膜炎 LDH及其同工酶、LYS、腺甘酸激 酶、CK及其同工酶 病毒性脑膜炎 LDH及其同工酶、ADA 恶性肿瘤 脱氧腺甘酸酶、CK同工酶、烯醇化酶 软脑膜继发性肿瘤 LDH同工酶 脑血管疾病 CK同工酶、AST、ALT 脑损伤 CK、AST、NSE、腺甘酸激酶 结核性脑膜炎 ADA、LYS
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(三)其他other 1.乳酸lactic acid: 正常 小于2.8mmol/L
增高:脑缺氧、缺血、脑损伤、出血、脓肿、多发性硬化症、细菌性脑膜炎和结脑等。 2.环磷酸腺苷adenosine phosphate cAMP 正常 13.0±2.3nmol/L 增高:当脑和脑膜疾患时,由于细胞代谢紊乱而导致CSF中cAMP含量的改变,且较蛋白、糖、细胞计数敏感。
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四、细胞学检查cytology examination
(一)细胞收集方法 1.沉淀室法: 2.微孔薄膜筛滤法: 3.玻片离心法: 4.纤维蛋白网细胞捕获法:
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CSF基于近代细胞学、免疫学理论分为六大类细胞
(二)细胞检查 CSF基于近代细胞学、免疫学理论分为六大类细胞 1.CSF腔壁细胞(脉络丛细胞,室管膜细胞,珠网膜细胞) 2.免疫活性细胞(小淋巴细胞,转化型淋巴细胞,淋巴样细胞,浆细胞) 3.单核吞噬细胞(单核细胞,激活型单核样细胞,巨噬细胞) 4. 多形核粒细胞(中性粒细胞,嗜酸性粒细胞) 5. 肿瘤细胞 6. 污染细胞(软骨细胞,骨髓细胞)
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(三)常见细胞形态及临床意义 小淋巴细胞 与血中淋巴相似 正常CSF主要细胞,占 60~70%。增加见于慢性 细菌、病毒感染
细胞 形态 意义 小淋巴细胞 与血中淋巴相似 正常CSF主要细胞,占 60~70%。增加见于慢性 细菌、病毒感染 大淋巴细胞 正常偶见 意义同小淋巴细胞 激活淋巴细胞 着色较大淋巴淡 增加见于感染、珠血、脑梗 、 脑瘤 单核 与血中单核相似 正常CSF中占30% 增加见于病毒性脑膜炎 单核样激活细胞 浆多,有突起 正常少见,意义同单核 细胞 浆细胞 与血中相似 正常无 增加见于炎症、肿瘤、珠 血等 巨噬细胞 由单核进一步激活 增加见于炎症、出血、外伤 核偏侧多见核仁1~2个 等疾病中后期
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脉络丛细胞 常成团出现,核 正常偶见,无诊断价值 圆偏于一侧,浆 常见于婴幼儿脑积水、脑室 丰,粉红 /蓝灰 穿孔或造影术后
细胞 形态 意义 中性细胞 与血中相似 正常无 增高见于炎症、外伤、出血、 梗塞、恶性肿瘤 嗜酸细胞 与血中相似 正常小于1%,婴幼儿4% 增加见于结核、寄生虫、病毒 、脑瘤 脉络丛细胞 常成团出现,核 正常偶见,无诊断价值 圆偏于一侧,浆 常见于婴幼儿脑积水、脑室 丰,粉红 /蓝灰 穿孔或造影术后 白血病 与骨髓/血中幼稚 脑膜白血病 细胞相似 肿瘤细胞 核大,核仁多而 肿瘤 大,核染色质多
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大淋巴细胞
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单核细胞
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浆细胞
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浆细胞
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激活单核细胞
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退化及老化的中性粒细胞
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吞噬细胞
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印戒细胞
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吞噬细胞
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吞噬细胞
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化脓性脑膜炎
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急性淋巴细胞白血病
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淋巴瘤
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瘤巨细胞
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瘤细胞吞噬细胞
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裸核
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泡沫浆细胞
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室管膜细胞
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嗜碱性粒细胞
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嗜酸性粒细胞
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脂肪细胞
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珠网膜细胞
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转化型淋巴细胞
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(四)常见脑、脑膜疾患的CSF改变 疾病 压力 外观 凝固 细胞 蛋白 糖 氯化物 细菌
疾病 压力 外观 凝固 细胞 蛋白 糖 氯化物 细菌 化脑 ↑↑ 混浊 可凝固 中性细胞 中、明显↑ ↓↓ ↓ 化脓菌 结脑 ↑↑/↑ 透/混 薄膜 早中性、晚淋巴 中 ↓ ↓↓ 抗酸杆菌 病毒脑炎 ↑ 透 (-) 早中性、后淋巴 轻 正 正 (-) 新隐球菌脑↑ 透/微 (±) 淋巴 中 ↓ ↓ 隐球菌 脑室/珠血 ↑ 血性 (±) 红细胞 轻度增加 ↓ 正 (-) 脑瘤 ↑ 透 (-) 淋巴 轻度 正 正 (-) 脑脓肿 ↑ 微混 (±) 淋巴 轻度 正 正 (+)/(-)
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浆膜腔积液检验` serousmembrane fluid SMF
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visceral serous coat parietal serous coat Serous coat serous cavity
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Accumulation of serous fluid in serous cavity.
Serous cavity effusion: Accumulation of serous fluid in serous cavity.
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一、概述overview: 正常 病理 胸腔20ml以下积液 胸腔积液 pleural effusion 腹腔小于50ml积液
正常 病理 胸腔20ml以下积液 腹腔小于50ml积液 心包腔15~30积液 胸腔积液 pleural effusion 腹腔积液 peritoneal effusion 心包腔积液 ericardial effusion
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SMF检验的目的 aim of SMF examination
2.寻找病原
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二、标本采集要求 1.无菌术 2.抗凝 3.立即送检
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留取中段积液: 常规 ml 生化 ml 细胞学检验 ml 细菌 ml 厌氧菌培养 ml 结核菌培养 ml
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三、积液形成机理和常见疾病 浆膜腔积液 按性质和病因 漏出液(滤出液)transudate 渗出液 exudate
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漏出液 transudate 1、血浆胶体渗透压下降 2、毛细血管流体静水压升高 3、淋巴回流受阻
A transudate is derived fluid substance from plasma, which has passed through a membrane or been extruded from a tissue.
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渗出液exudate 见于细菌性胸腹炎、腹膜炎、心包炎、恶性肿瘤、结缔组织病等。
Material, such as fluid, cells or cellular debris, which has escaped from blood vessels and has been deposited in tissues or on tissue surfaces, usually as a result of inflammation.An exudate, in contrast to a transudate, is characterized by a high content of protein, cells or solid materials derived from cells.
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四、一般检查general examination
(一)理学检查physical examination 漏出液 渗出液 transudate exudate 1.量 2.色 淡黄、黄绿色 草黄、棕红、乳白、绿色 3.透明度 透明、微混 不同程度浑浊,因含有细菌 、细胞所致 4.比密 小于 大于1.018 5.凝固性 一般不凝固 一般凝固,但有大量纤溶酶 时可不凝固
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(二)化学检查chemical examination:
漏出液 渗出液 transudate exudate 1.PH: ± 一般偏低 2.粘蛋白试验: (-) (+) rivalta test 3.蛋白质总量: 小于25g/L 大于40g/L 4.葡萄糖测定: 与血糖相近 降低
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(三)酶学检查 enzyme labeled comound assay
Light提出: 可作为渗出液的指标 LD活性大于200u/L 积液LD/血清LD比值大于等于0.6
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(四)显微镜microscopic examination
1.细胞计数: 漏出液 渗出液 (意义不大) 小于100×106/L 大于500×106/L 2.分类: (有一定意义) 以淋巴和间皮为主 较多,各种细胞 3.病原体: 微生物、寄生虫 4.结晶体:
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(五)积液的实验室一般检查结果 检验项目 渗出液 漏出液 外观 比密 浑浊、不透明或血性 清晰、透明、淡黄色 总蛋白量(g/L)
检验项目 渗出液 漏出液 外观 比密 总蛋白量(g/L) 积液/血清蛋白比值 乳酸脱氢酶(LD) 积液/血清LD比值 白细胞数 /L (有核细胞数) 红细胞数/ul 凝固性 浑浊、不透明或血性 清晰、透明、淡黄色 大于 小于1.015 大于 小于30 大于 小于0.5 大于200U/L 小于200U/L 大于 小于0.6 大于500×106/L,以 小于100×106/L单个 中性细胞为主 核细胞超过50%,以 淋巴、间皮细胞为主、 大于100/ul,尤其是 小于100/ul但创伤性积 恶性肿瘤积液 可大于100 可凝固 不易凝固
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近年来,国内外用1972年Light推荐的渗出液诊断标准,已被广泛接受:
1.LDH大于200U/L 2.蛋白质(积液/血清)大于0.5 3.LDH(积液/血清)大于0.6,恶性肿瘤大于 1.0。 结论: 1.以上三项中二项符合即为渗出液,反之为漏出液。 2.但仍有5%误判,特别是大于40岁以上的。
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五、选择性检验项目 (一)蛋白 1.铁蛋白(IBP): 含量可作为肿瘤性积液与结核性胸膜炎性积液的鉴别诊断指标
(一)蛋白 1.铁蛋白(IBP): 含量可作为肿瘤性积液与结核性胸膜炎性积液的鉴别诊断指标 癌性积液铁蛋白常大于600ug/L
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2. 纤维连接蛋白(fibronectin,FN)
恶性腹水FN173.9±65ug/ml,非恶性13.4±6.8ug/ml
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3.纤维蛋白原降解产物(FDP) 恶性肿瘤大于结核性胸膜炎及腹膜炎大于肝硬化 如果积液FDP大于1000mg/L,提示恶性积液的可能性较大
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4. C反应蛋白(CRP) 漏出液小于等于10mg/L 渗出液大于10mg/L
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可明确提供TB感染依据,是一种快速诊断指标
5.抗结核菌体蛋白衍生物(PPD) 可明确提供TB感染依据,是一种快速诊断指标
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(二)酶 1.溶菌酶(lysozyme,Lzm): 胸水<65ug/ml提示恶性可能 >80ug/ml提示结核可能
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2.腺苷脱氢酶总活性测定(adenosine deaminase,ADA)
以ADA活性大于50u/L为限,可区分结核性胸腔积液和恶性积液
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3.淀粉酶(amylase,AMY): 食道破裂唾液经穿孔处流入胸腔,胸腔积液AMY增加; 大多数胰腺炎患者或胰腺创伤等所致腹腔积液中,可高达血清几倍到几十倍。
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4.碱性磷酸酶(AKP): 大多数小肠扭转穿孔患者的腹腔穿刺液中增加。 积液AKP/血清AKP>0.1,有助于恶性和非恶性积液的鉴别。
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(三)肿瘤标志物检测examination of tumor mark
1.Carcinoembryonic,CEA: 积液中CEA>20ug/L 积液CEA/血清CEA>1 应高度怀疑为癌性积液
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2.AFP: 3.HCG(HCGβ链): 4. CA-125
100
六、浆膜腔脱落细胞学检测
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七、良性与癌性胸腹水的鉴别 比较项目 良性 癌性 外观 血性少见 多为血性 总蛋白 炎性多>40g/l 20~40g/l
比较项目 良性 癌性 外观 血性少见 多为血性 总蛋白 炎性多>40g/l ~40g/l 铁蛋白 <500ug/L >500ug/L 纤维连接蛋白 ± 6.8ug/L ±6.5ug/L LDH <250U/L >250U/L ADA >40U/L <40U/L 唾液酸 <340mg/L >340mg/L 总胆固醇 <2.8mmol/L >3mmol/L 积液同血清胆固醇比 > <0.3 CEA <20ug/L >20ug/l 积液同血浆CEA比 < >1.0 CA 正常 升高 染色体分析 绝大多数为二倍体 超二倍体及多倍体多见 多为非倍体并有各种畸变 细胞学检查 仅为炎性细胞 可见癌细胞
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习 题
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B 脑脊液静置12~24h后出现薄膜见于下列何种疾病 A.化脓性脑膜炎 B.结核性脑膜炎 C.珠网膜下腔梗阻 D.流行性乙型脑炎
E.脑脊髓梅毒 B
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D 珠网膜下腔出血患者,采集的三管脑脊液呈现下列何种变化: A.第一管血性,后两管逐渐变淡,上清液无色透明
B.第一管血性,后两管逐渐变淡,上清液淡红色或黄色 C.三管均红色,上清液均五色透明 D.三管均红色,上清液淡红色或黄色 E.第三管血性,上清液呈现黄色 D
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正常脑脊液蛋白电泳含量最高的是: A.α1球蛋白 B. α2球蛋白 C.β球蛋白 D.γ球蛋白 E.白蛋白 E.
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漏出液中的LD与血清LD的比值常: A.<0.6 B.< 0.5 C.<0.4 D.<0.3 E.<0.1 A
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