SARS 病人标本的采集、运输和保藏 SARS病人标本的采集 SARS病人标本的运输和保藏、 SARS病人标本采集安全操作原则

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1 SARS 病人标本的采集、运输和保藏 SARS病人标本的采集 SARS病人标本的运输和保藏、 SARS病人标本采集安全操作原则
标本采集器械要求 标本采集的防护措施 废弃物的处理

2 SARS病人标本的采集 标本采集对象 临床诊断为“非典型肺炎”（SARS）的病人；SARS疑似病例； 根据需要可采集密切接触者和社区健康人群 标本采集人员 医院医务人员负责采集住院病人(确诊和疑似病例)的标本； 各级疾病控制中心的医务人员负责采集密切接触者和社区健康人群的标本。；

3 标本采集要求 应尽早采集住院病人标本，须在入院后24-48小时内完成；
采集单位应指定专人对标本负责登记、收集、管理，并认真填写“非典型肺炎或疑似病例标本采集登记表”； 所有标本的收集，运输和保藏都应装在有螺旋盖的塑料管中，以防止开或关标本管时，产生气溶胶。有标本的塑料管用清洁塑料袋包裹严实； 4). 密切接触者和社区健康人群、每份标本必须标明编号及采集日期； 5). 标本应立即送当地疾病预防控制机构，如不能立即送交，可置于-20℃以下冰箱短暂（24小时之内）保存。

4 标本采集种类 病毒分离和用于提取RNA标本的采集时间，位置及质量直接关系到能否成功分离到病毒或RNA的活性，而标本保存与运输不当也会影响病毒的分离。 为提高病毒的分离率。在用于病毒分离的样品采集的数量、类型和地点方面，实验室与流行病大夫应达成共识。一般来说，病毒分离用样品应与血样同时采集，以便做血清学诊断和证实SARS病毒是该SARS爆发的病因。 由于每种样品有不同的需要，决定采集何种类型的样品将依赖于地方上运输和贮存的条件、财力及设备情况。 因为在发热3天内更容易分离出病毒，所以用于病毒分离标本的收集不能耽搁到实验室血清学确诊之后。

5 咽拭子和鼻咽拭子 发热72小时内采集。最好用生理盐水将无菌棉拭子沾湿，但不要用标本运输液，以防青霉素过敏。
鼻咽拭子是将棉签平行于上颚插入鼻孔，保持几秒钟，吸收分泌物；拭抹双侧鼻孔。 咽拭子采集是用棉签适度用力擦拭双侧咽后壁部位，应避免触及舌部； 采完后迅速将然后把拭子放到有旋转盖的并装有病毒保存液的带垫圈的螺口塑料管冻存管中,在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖； 在48小时内冷藏运输到实验室（4-8℃）。如果没有病毒保存液，等渗盐溶液、组织培养液或磷酸盐缓冲液也可使用

6 嗽口液： 发热72小时内采集。含漱液通过用小体积（5-10ML）的无菌盐水含漱获得， 并收集液体到有旋转盖的50ml塑料管离心管中. 痰液 只采集重症病人，无时间限制。病人将痰液咳入无菌平皿中，然后用棉签刮取痰液放入含4～5 ml样本运输液的螺口试管中。病人将痰液咳入无菌、内装4～5 ml标本运送液、带垫圈的50ml螺口塑料管中。 4). 下呼吸道标本（适用于气管插管病人） 只采集重症病人，无时间限制。收集气管吸取液或支气管灌洗液5~10ml放入无菌、带垫圈的50ml螺口塑料管中。

7 血清采集 血清标本收集流程： ·收集5ml静脉血加入到消毒的试管中，写明收集日期和病人的号码（ID） ·全血应离心1000g, 10分钟，用于分离血清 ·血清分离前，血标本应保存在4-8℃，最多不能超过24小时 ·全血不能冻 ·如果没有离心机，血标本应冷藏放置，直到血细胞块从血清中的完全析出 ·小心吸取血清，避免吸到红血球；在无菌条件下，移至灭菌的血清管中。 ·在运输前，血清贮存在4-8℃ 须采集病人的急性期和恢复期血清。双份血清对于确定病因非常重要，因此首先要强调配对，尽量采集到双份血清，采集3-5ml全血于带垫圈的螺口管中，不加抗凝剂；待血液凝固后,分离血清,-20℃以下冷冻保存；采集时间：第一份血清应在入院后24-48小时内采集；第二份血清应在发病后10~14天采集，用于IgM检测；第三份为恢复期血清，应在发病后22~50天或出院当日采集。1）尽早采集急性期血样，最迟不晚于发病后7天。恢复期血样则在发病后2～4周采集。由于非典型肺炎感染后抗体出现较晚，因此应在发病后4－6周采集第三份血清。 详细登记有关病例的姓名、性别、年龄等基本信息，发病日期、采样日期等。下边的表1.供工作人员参考。

8 全血（应在入院后24-48小时内采集） 采集5~10 ml全血放入已加抗凝剂、带垫圈的螺口管中；4℃条件下立即送至有关实验室。 粪便标本 粪便5-10g放入无菌50ML螺口管塑料瓶内；含10ML PBS或盐水, 4℃条件下立即送至有关实验室。 尸检组织标本 病人死亡后应尽早进行解剖，采集肺、气管、肾、脾、肝、心脏、脑、血凝块等组织和淋巴结等重要器官标本；每一采集部位分别使用不同消毒器械；每种组织应多部位取材，每部位应取20~50g，淋巴结2个，分别置于50ml无菌螺口塑料管中，尸解标本对于病原学研究非常重要，应尽量多采集。立即置于-70℃以下保存或冷送至有关实验室。

9 (二)、SARS病人标本的运输和保藏、 1．标本的运输 1）．标本运输要求 (1) 血标本的运输 ·标本应尽快运送到实验室，不要总是等着收集更多的标本再送, 将标本放在有封口的塑料袋中,用聚脂盒子或保温瓶或专用密闭盒（金属或硬塑料材质）内，用吸水纸等填充物固定好，置于保温箱内；由专业人员专人运送；短途运送（市内）加冰保冷即可；长途运送需加干冰保冷。将标本送检单和调查表放在塑料袋中，再用胶带在聚脂盒中的上部固定。安排运送日期; 安排日期确定后，通知接收实验室，标本运送的时间和运输方法 2）．标本运送相关材料 标本运送液（MEM）：牛血清5%，青霉素2000U/ml，链霉素200ug/ml（也可用庆大霉素，其终浓度为每毫升 1mg），制霉菌素25U/ml，用2% NaHCO3调PH值7.4（由省或市疾控中心配制提供）；如无标本运送液，等渗盐溶液、或磷酸盐缓冲液也可使用；标本密封袋；专用标本运送箱；专用不干胶标签、标记

10 2． 标本保藏 1). 血标本的贮存：血清标本：分装为多管冷冻保存，分装时最好能用两种颜色的试管盖，使急性期与恢复期血清从外观上容易分开。 (1)在检测实验室外 ·如能在24-48小时内能将全血送达检测实验室，那么全血可以冷藏（4-8 ℃）保存 ·如不能按上述时间送达，那么必须用离心机离心分离血清，将血清在无菌条件下移到有旋转盖的血清管中，再送至检测实验室 ·没有离心机时，保存全血在在4-8℃ 24小时，待直到血块从血清中完全析出，在无菌条件下，用吸管吸上清至灭菌的血清管中。 ·在48小时内无菌血清应带冰送检，或保存在4-8℃最多不能超过7天 ·长期保存血清必须在-20℃，在运输时使用冰盒运送到检测实验室。反复冻溶已经被证明会影响IgM 抗体的效价 在检测实验室内 ·在检测实验室，血清长期保存应冷冻在-20℃ 2). 病毒分离标本：标本运送至实验室后，应尽快进行接种细胞分离，48h内能进行接种的可置于4℃保存，如未能接种应置～70℃或以下保存。

11 保藏单位 地市级、省级和国家级疾病预防控制机构 地市级疾病预防控制机构负责标本安全收集，短期保存；
省级疾病预防控制机构负责长期安全保藏和管理下级单位及本单位采集的标本； 地市、省级疾病预防控制机构不得擅自进行标本交换； 国家级疾病预防控制机构负责国家SARS标本的长期保藏，建立专门SARS国家资源库，进行统一保藏和管理。由国家调拨使用。

12 标本保藏设备 专用普通冰箱： -20ºC以下冰箱，用于保藏血清标本，避免与其他实验材料混用；
标本数据的储存和管理设备。

13 SARS病人标本采集安全操作原则 1、非典型肺炎标本采集时要严格执行采集人的生物安全防护要求，采集人必须穿好防护鞋套、衣裤、帽子、眼罩、口罩和手套。标本采集完毕后，首先消毒手套，然后带着手套依次脱掉帽子、眼罩、口罩、衣裤和鞋套，最后脱去手套，再用消毒巾擦拭面部和双手。采集样品必须放入无菌塑料管内，加无菌外包装后才能传送。 2、样本检验采取就地检验的原则，当地医院能开展的项目在当地检测，同时将血清样本和咽拭子等相关样本送省或地级市疾控中心检验。

14 标本采集器械要求 用于血液收集的基本耗材包括：医用（5ml和10ml）一次性注射器, 5 ml(真空)针管; 止血带; 无菌拭子; 血清储藏管; 标本标签; 创可贴; 可封性塑料袋; 标本采集表格; 带有冰袋的冰盒; 棉拭子。 全血收集管：10ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈) 血清保存管：2 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存） 粪便保存管：50 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存） 鼻咽拭子保存管：10 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存） 痰液保存管：50 ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈)，可耐深低温（液氮保存） 尸检组织冻存管：50ml螺口塑料管(外螺旋、带密封垫圈) 记号笔：油性，防水

15 标本采集的防护措施 1．标本采集时，采集人必须穿戴连体式隔离衣、防护鞋套、眼罩、N95级防护面罩和乳胶手套（2层）；
2．标本采集完毕，首先消毒并脱掉外层手套，然后戴内层手套依次脱掉帽子、眼罩、口罩、衣裤和鞋套，最后脱掉手套，再用消毒巾擦拭面部和双手。 3．防护材料要求 防护服：使用防水面料防护服 防护眼镜：应具备宽阔视野、高透光度和良好防溅性的产品 鞋套：应选用较厚材质的产品； 半高雨鞋 乳胶手套：外科手术用手套； 防护口罩：符合“N95”标准； 全面性呼吸防护器：选用密封性能好、呼吸阻力较小的产品。

16 废弃物的处理 所有感染性材料（血液，鼻咽拭子，咽拭子，痰液标本，尸检标本）及接触感染性材料的物品，均应在P-3级生物安全实验室的生物安全柜（Ⅱ级）中操作；其废弃物应置于牢固塑料高压袋中密封，高压121℃，30分种或焚烧。

17 国际上感染性实验室标本的包装和运送的要求
.运送至实验室时诊断标本的正确包装 • 运送至实验室的诊断标本必须被装在大小合适的螺旋盖容器里，比如装血清样本用的2-5ml的容器（血清管）。 •拧紧盖、封好管口（如用封口膜或防水的塑料袋），必须把标本管的盖和存放标本的容器顶部都要封好。 • 密封好的标本放置在大小合适的塑料袋里，并须与少量的有吸收能力的物质（如棉花）一起放入容器中。使用热力密封机密封塑料袋，或者用防水的胶带密封，或者使用带拉链的塑料袋密封。 • 所有标本必须放置在双层密闭的塑料袋里。同一位患者的2份以上的密封的标本可以放在同一个塑料袋内并封好，不同患者的标本不应放在同一个袋里。

18 SARS 病人标本的采集、运输和保藏 密封的塑料袋 封口膜或胶帯 有螺旋盖的血清管 标本 能吸收液体的材料 从同一个病人来的标本
以放在同一个塑料袋内并封好，不同患者的标本不应放在同一个袋里。 密封的塑料袋 封口膜或胶帯 有螺旋盖的血清管 标本 能吸收液体的材料 从同一个病人来的标本

19 • 把标本的详细情况及与标本有关的额外信息和运送者及预期接受者的具体地址写在一张纸上并密封在塑料袋里，并用胶布粘在塑料容器外面一份。
• 装标本的密封口袋必须放在二级带螺旋帽盖的塑料容器里。如果标本已经正确地双层密封在一个塑料袋中，不同患者的标本可以放在同一个二级塑料容器里。另外有吸收力的物质应该放置在二级塑料容器里吸收漏夜。单个容器里包装的标本总数取决于一级容器的大小和附属的包裹品的数量（塑料袋和有吸收力的物质）。不同标本的数量在2-6个之间。 • 把标本的详细情况及与标本有关的额外信息和运送者及预期接受者的具体地址写在一张纸上并密封在塑料袋里，并用胶布粘在塑料容器外面一份。 • 密封的塑料容器应该装在绝缘的容器中（聚苯乙烯），有纤维板的外包装或专门的标本容器（与疫苗的运载工具相似）。绝缘的容器和外包装必须与IATA危险物品条例包装制度650相符合。此包裹应该装有冰袋或另外的装有冰的塑料容器，但是不应装有干冰。 封口膜或胶帯 带螺旋帽盖的塑料瓶

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21 能吸收液体的材料 • 单个包裹包装的最大体积是500ml，因为每一个血清标本通常大约1-2ml，500ml的限度不是一个问题。 • 绝缘容器的内部应该另外装一些物品以防止塑料容器在运送时发生移动。 • 用这种方式包装的标本不需要危险物品的声明，但是如果空运，航运单上应包括以下文字： 诊断标本包装符合IATA650-包装规则， 外包装标明如下文字： • 贴上一个额外的标签：提示有条件时需冷冻保存 • 此盒子应使用宽胶带密封，注意不要将标签覆盖。 • 可以从VWR，货运号为VWR 获得合适的可以重复使用的二级容器 二级容器上应标明： 发货人姓名及地址; 收件人姓名及地址; 诊断标本; 包裹按照国际航空运输协会的包裹说明650号文件。

22 • 运送病毒分离物至参考实验室时必须将标本放在带螺旋帽的无菌管内，如1.8ml 冻存管。管盖应用封口膜或防水塑料带密封。
2.运送病毒分离物至参考实验室时的正确包装： • 运送病毒分离物至参考实验室时必须将标本放在带螺旋帽的无菌管内，如1.8ml 冻存管。管盖应用封口膜或防水塑料带密封。 • 每个密封好的管应该放置在二级灭菌容器中，此二级容器内装有有吸收液体的物 质（如棉花）吸收漏夜。同一来源的或认为是同一来源的分离物可以包装在一个二级容器内。不同来源的或认为是不同来源的，装有分离物的管子，应装在不同的二级容器内。 • 完整的冻存管运送装置应将冻存管放在绝缘的容器内（聚苯乙烯），并有纤维板 的外包装。此绝缘容器和外包装必须与IATA危险物品条例包装制度602相符合，必须是配套装置，不同厂家制造的组件不能混用。此冻存管应放置在有聚苯乙烯的绝缘包装的盒子内。为了达到最好的效果，绝缘的包装应预先贮存在冷冻冰箱内或在包裹内装满干冰，在放置试管装置之前至少冷冻6个小时。

23 单个包裹包装的最大容器为50ml，因每一病毒分离物通常为1ml，50ml的限度已够用。
•在试管装置周围的空间装满干冰，绝缘容器的盖放置在顶部。顶部不要密封，以便于干冰的蒸发。 •放在包裹里的所有病毒分离物的清单应用胶带贴在绝缘盖的顶部，放置在纤维板外包装下。 •外包装应标明以下信息： * 运送者的姓名、地址和联系电话/传真 * 货物代号分类数字代号（UN）和正确的运送物名称 UN2814指可感染人类的感染性物质（麻疹病毒） UN1845指干冰 * 包裹内干冰的重量，当开始装运时应记录在外包装上 * 收货人的姓名、地址和联系电话/传真 * 感染性物质标签请参考6或6.2章 * 各种标签参照9章 •此盒子应使用宽胶带密封，注意不要使宽胶带覆盖标签，并留有缝隙以便 干冰的蒸发。 •所有有感染性的物质的运送，必须有运送者的危险物品运送的声明。