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兽医微生物学 黑龙江八一农垦大学.

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1 兽医微生物学 黑龙江八一农垦大学

2 内容简介 绪言: 共六部分,介绍微生物与微生物学,微生物学简史、理论与技术、成就及应用。兽医微生物学的地位、任务与贡献。
绪言: 共六部分,介绍微生物与微生物学,微生物学简史、理论与技术、成就及应用。兽医微生物学的地位、任务与贡献。 细菌总论 : 共七章,介绍细菌的形态、构造、生理,消毒与灭菌,细菌生态、致病机理,遗传变异等。 细菌各论: 共八章,介绍重要病原细菌的形态、生化特性、致病性、微生物学诊断和免疫防治等。 真菌: 共四章,介绍真菌的分类、形态、生化及致病特性,真菌病的诊断与防治等。 病毒 : 共十章,介绍病毒的形态、构造、繁殖、遗传、培养,病毒的致病性。重要病毒形态、生化及致病特性,微生物学诊断和防治等。

3 第七章 主要引起猪发病的病毒

4 (Porcine pseudorabis virus,PPV)
伪狂犬病病毒  (Porcine pseudorabis virus,PPV) 由伪狂犬病毒引起的急性传 染病其特征是除猪外 ,剧烈的搔痒,呈现神经 症状而死亡,成年猪呈隐性 感染,仔猪症状重剧, 死亡率高。 伪狂犬病又称阿氏病,于 1902年由匈牙利Aujeszky首 次报道,故在一些文献中遂 以他的名字命名为Aujeszky 氏病(欧洲、日本)。 本病与狂犬病临床上有类 似之处,初期还误认为是 狂犬病,后来通过实验才 认定是不同于狂犬病的一 种独立疾病,才改用伪狂 犬病这一病名。 本病在世界各地均有发生, 除澳大利亚等极度少数 国家外,凡养猪地方几乎 都有

5 1.分类与形态 伪狂犬病毒属于疱疹病毒科, 疱疹病毒属。双股线状DNA 病毒,有囊膜。 2.分离培养 能在猪、牛、羊、兔肾原代 细胞和PK15传代细胞系 上繁殖,能引起细胞病变, 能形成蚀斑 3.抗原性 本病毒已发现有11种糖蛋白, 按照疱疹病毒糖蛋白的命名 法统一称为gB、gC、gE、gI、 gH、gK、gL、gM和gN等。 伪狂犬病病毒各毒株不能用 传统的血清学方法进行区分, 但各毒株间它们在毒力和 生物学特征等方面确实存在差异 在病毒的基因组中,大约有 一半基因被认为是非必需的。 如胸苷激酶(TK) 核糖核苷还原酶(PR)、 4.抵抗力 本病毒对外界环境抵抗力很强, 夏季在舍内干草上能存活30d 冬季达46d,在土壤中可存活3 个月。60℃经30min可灭活病毒 许多脂溶剂和消毒剂都能灭活 病毒。 5.病原性 自然发生于猪、牛、绵羊、犬、 猫等,除成猪外,对其它动物 均是高度致死性疾病,病畜极 少康复,但成猪症状轻微,很少 死亡。多发生于冬、春两季。 本病的特征为发热、奇痒及呈脑 脊髓炎的症状。但成猪常为隐 性感染,不出现剧痒,可见 有流产、死胎及呼吸系症状 新生仔猪除有神经症状外, 还可侵害消化系统。

6 6.微生物学诊断 采取大脑、三叉神经结、扁桃体、肺等 组织,接种乳兔肾、仔猪肾原代细胞或 (1)病原学诊断
BHK21传代细胞进行培养和鉴定本病毒 (1)病原学诊断 中和试验、酶联免疫吸附试验、乳胶凝 集试验、聚合酶链式反应。OIE规定, 病毒中和试验(国际贸易指定的方法) 和酶联免疫吸附试验 (2)血清学诊断

7 7.防制 弱毒疫苗对种猪第1次注射后,间隔 4~6周加强免疫1次,以后每隔6个 月注射1次,育肥猪群断奶时注射1次 直到出栏
灭活疫苗第1次注射后,间隔4~6周 后加强免疫1次,以后每6个月注射1 次,母猪产前1个月左右加强免疫1次 对发病猪群,应间隔3~4周用中和 试验反复进行血清学检查,阳性猪 进行隔离、淘汰,直到两次试验全 部阴性为止。培育健康幼猪群 在断奶后按窝尽快分开,隔离饲养, 到16周龄进行血清学检查,淘汰阳 性猪,把阴性猪集中起来建立新的 无本病猪群。美国和欧洲正在应用 猪伪狂犬病基因缺失疫苗和相应配 套的血清学鉴别诊断方法进行猪群 净化,分阶段实施猪伪狂犬病的根 除计划

8 (Hog cholera virus,HCV)
猪瘟病毒 (Hog cholera virus,HCV) 猪瘟是由猪瘟病毒引起的 猪的一种高度接触性传染 性、致死性传染病,其特 征为高热、稽留,小血管 变性引起广泛出血,梗塞 和坏死。     1810年,Tennessee首次报 道,我国何时发现和证明猪 瘟病毒存在,无明确文字记 载,约于1925年,东南大学 农科院开始研制免疫血清防 制H.C 不少国家采取严格防制措施宣 布消灭本病。他们是:澳大利 亚、加拿大、英国、冰岛、爱 尔兰、新西兰、Scadinavian  countries (包括挪威和瑞典) 瑞士、美国。美国从1962年— 1976年花了1.4亿$消灭了猪瘟。    我国是猪瘟疫性较多的国家 之一,自从50年代后期广泛 应用了兔化弱毒疫苗,采取 有效措施基本控制了流行, 许多地区已无本病发生,但 80年代以来,又有抬头趋势

9 属黄病毒科瘟病毒属,基因组为单股RNA。 构蛋白,从N’——C’,为P14/E0/E1/E2 ,
能在猪肾原化细胞和PK15传代细胞系 中增殖,无细胞病变 属黄病毒科瘟病毒属,基因组为单股RNA。 有囊膜,电镜照片上观察,表面具有脆弱 的纤突结构,基因组为单股线状RNA,长  12.2Kb,仅含有一个ORF。含有 4 种结 构蛋白,从N’——C’,为P14/E0/E1/E2 , P14 为核衣壳蛋白 CSFV对环境的抵抗力不强,含毒的猪 肉和猪肉制品12个月后仍有传染性, 20%氢氧化钠是最合适的消毒药  1.分类 与形态  2.分离 培养  3.抵 抗力

10 4.抗原性与血清型 猪瘟病毒与同属病毒中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)及边 界病毒之间抗原关系密切,CSFV与BVDV之间,基因组
序列有高度同源性,有血清学交叉反应 CSFV囊膜有三种糖蛋白,即gp44/48也称Erns、gp55也 称E2.gp33也称E1,其中E2是病毒的主要保护性抗原。 CSFV野毒株的毒力差异很大,分为强、中、低毒力毒株 但只有一个血清型

11 5.致病性 病毒主要经消化道、 呼吸道、结膜和生 殖道黏膜传播,也 可经胎盘垂直感染。 易感猪与病猪的直 接接触是病毒传播 的主要方式。各种
年龄的猪均易感 本病无明显的流行 季节性,一般以春、 秋多发。疾病的流 行形式主要取决于 猪瘟病毒的毒力。 强毒株感染呈流行 性,中等毒力毒株 感染呈地方流行性, 而低毒力毒株先天 感染(胎盘、胎儿 感染)一般呈散发 近年来,猪瘟的流 行发生变化,出现 散发的非典型猪瘟 也称为温和型猪瘟, 临诊表现症状轻, 死亡率低,病理变 化不典型,必须经 实验室检查才能确

12 6.微生物学诊断 病毒分离与NDV强化法:猪睾丸细胞接种 10×倍连续稀释待检病毒,37℃培养4天,
随后接种10 个PFU/NDV,连续培养4天, 如CPE可证明(必须设有对照组) 取脾和淋巴结接种于猪肾或睾丸原代培养 细胞分离本病毒,并用已知猪瘟抗血清鉴 定分离病毒 (1)病原 学诊断 RT—PCR :敏感性可达104TCID50, 敏感性可达1000倍 取扁桃体、脾、肾和回肠远端做直接荧 光抗体试验检查病毒抗原。兔体交互免 疫实验,是一种经典而实用的方法,能 准确的诊断猪瘟 荧光抗体病毒中和试验和酶联免疫吸附试 验。在国际贸易中,世界动物卫生组织 (OIE)建议应用荧光抗体病毒中和试验 酶联免疫吸附试验,过氧化物酶中和试验 (2)血清 学诊断

13 内认为较合适的猪瘟免疫程序。另外,也可采 用新生仔猪出生后立即接种猪瘟疫苗,2h后再 哺以初乳,免疫效果确实。为了防止猪群亚临
7.防制 坚持以预防接种为主的综合性防制措施,能 有效的控制猪瘟的发生和流行。平时应加强 饲养管理。搞好环境卫生,定期消毒。实行 自繁自养,对引进猪隔离观察2~3周,确认 健康后方可混群。应用猪瘟兔化弱毒疫苗进 行预防接种,免疫后4d产生坚强免疫力,免 疫期为1年以上 可参照下列免疫程序: 20日龄左右仔猪首免, 65日龄左右进行第2次免疫接种,这是目前国 内认为较合适的猪瘟免疫程序。另外,也可采 用新生仔猪出生后立即接种猪瘟疫苗,2h后再 哺以初乳,免疫效果确实。为了防止猪群亚临 床感染,也可加大免疫剂量,每头猪接种4头 份疫苗,免疫效果良好

14 猪繁殖和呼吸道综合征病毒 (Porcine reproductive and respiratory syndromevirus, PRRSV)
外引人注目的一种新 的猪传染病,1987年 美国的北卡罗纳,衣 阿华、明尼苏达等洲 的猪群首次暴发一种 以母猪繁殖障碍、仔 猪严重呼吸困难为特 征的传染病 我国哈兽研和广州 动检局在1995年底在 北京和广东某猪厂从 加拿大引进的杜洛克 种猪中,诊断了该病 该病刚流行时,因病因 不明,不同国家和地区 命名也不一,在美国曾 称为繁殖障碍综合征, 猪繁殖和呼吸综合征, 猪不育和呼吸综合征, 神秘病,在英国称蓝 耳病,荷兰称为猪流 行性流产和呼吸综合 1992年5月在美国明尼 苏达州召开此病的首次 国际会议上,决定统一 为PRRS

15 动脉炎病毒科动脉炎病毒属。病毒粒子呈卵圆形,有 囊膜,为单股RNA病毒。不能凝集鸡、豚鼠、小鼠、
1.分类与形态 动脉炎病毒科动脉炎病毒属。病毒粒子呈卵圆形,有 囊膜,为单股RNA病毒。不能凝集鸡、豚鼠、小鼠、 大鼠、兔、猪、羊、牛和鸭的红细胞。基因组SSRNA, 有8个阅读框,分别编码2种非结构蛋白和5种结构蛋白 2.培养 1991年荷兰中央兽医研究所首次分离到病原,他们采用 猪肺巨噬细胞(PAM)培养物,从感染的2-10日龄仔猪 肺扁桃体、脾及有病变器官的组织匀浆、感染母猪的血 液中分离获得

16 灭活。在PH< 或 > 7 的环境中,感染性损
现称为欧洲原型病毒株,也称欧洲型;美 国分离株为美洲型;两型结构蛋白同源性 为64—70%,两型病毒之间囊膜糖蛋白的 氨基酸同源性也较低,即使同一型内,也 存在毒力与抗原的差异。日本、我国分离 的均为美洲型 对乙醚、氯仿等脂溶剂敏感。病毒在低温下 能保持其稳定的感染性,但不耐热,深层组 织中可存活数年,但 4℃时存活 一个月, 37℃48 小时,56 ℃ 45分钟,病毒将彻底 灭活。在PH< 或 > 7 的环境中,感染性损 失90%以上 3.血 清型 4.抵 抗力

17 在自然流行中,本病仅见于猪,其他家畜未见发 病。本病传播迅速,主要侵害繁殖母猪和仔猪, 而肥育猪发病温和。猪场卫生条件差,气候恶劣,
5.致病性 该病以母猪繁殖障碍、仔猪的呼吸道症状和高死亡率 为特征,特别是感染本病后容易导致免疫抑制而继发 其他疾病。主要经呼吸道传播,因此,当健猪与病猪 接触,如同圈饲养,频繁调运,高度集中,更容易导 致本病的发生和流行。本病可也垂直传播 在自然流行中,本病仅见于猪,其他家畜未见发 病。本病传播迅速,主要侵害繁殖母猪和仔猪, 而肥育猪发病温和。猪场卫生条件差,气候恶劣, 饲养密度大可促进本病的流行。

18 6.微生物学诊断 (1)病原学诊断 (2)血清学诊断 将病猪的肺、死胎的肠和 应用间接酶联免疫吸附试验检 腹水、胎儿血清、母猪血
液、鼻拭子和粪便等进行 病毒分离,以中和试验鉴 定病毒 应用间接酶联免疫吸附试验检 测抗体。世界动物卫生组织 (OIE)规定用酶联免疫吸附 试验检测抗体

19 7.防制 (1)阳性场控制措施:早期病畜断奶,分地饲养,生产环 节均全进全出。两处或三处饲养:配种、妊娠、分娩在一
处保育与育肥在另一处或两处,各处间距0.5—1km;10日 龄断奶转入保育舍,保育舍饲养7周转育成舍(三处饲养时) (2)保育舍空栏法:所有猪只清出猪舍,用盐水和消毒剂 (甲醛和苯酚)彻底清洗和消毒,封闭空闲14天,再接收 仔猪。每批猪清出后均应进行此项工作 (3)免疫接种:用分娩母猪的胎盘、粪便混饲给配种前四周或产前四 周的母猪;国内外已有活、死苗问世,初产母猪在产前四周接种一剂 疫苗,经产母猪可在配种前每1~2年补免一次;公猪每窝免一次,仔猪 4~6周龄打一剂;(3~4M阳性率达80%)或生产时用一剂,10~19日龄 用0.5剂

20 猪细小病毒病病毒(porcine parvovirus infection virus,PPIV)
猪细小病毒病是一种由猪细小病毒(PPV)引起的母猪繁殖障碍(reproductive disorder)性疾病。 其特征是:怀孕母猪(尤其是头胎)发生死产、畸形胎、木乃伊胎、胚胎死亡、偶有流产,而母猪本身并不表现临诊症状。其他猪感染后也无明显的临诊症状。 本病一般呈地方流行性或散发,有时也呈现流行性(或称为“爆发”),这种爆发多见于畜群初次感染的情况

21 PPV属细小病毒科(Parvoviridae)中的 细小病毒属(Parvovirus)。PPV外观呈
圆形或六角形、无囊膜。成熟的病毒粒子 为二十面体等轴对称,有2~3个衣壳蛋白, 32个壳粒。病毒基因为单股DNA,约含有 5000个碱基对。本病毒只有一个血清型。 PPI能凝集豚鼠、大鼠、猴、鸡和猫、人 “O”型红细胞,不能凝集牛、绵羊、仓鼠 和猪的红细胞,其中以豚鼠红细胞最好 1.分类 与形态

22 2. 培养 PPV能在猪原代或次代肾,睾丸细胞及猪传代细 胞包括:PK15.CPK、IBRS—2.MVPK、ST
集脱落、圆缩死亡等细胞病变(CPE)。接种病 料时机,以细胞形成岛屿状阶段为宜,或制备细 胞液时同步接毒,以利于病毒增殖

23 3. 抵抗力 PPV对热具有强大的抵抗力,56℃ 30min 加热处理后,病毒的感染性和血凝(HA)
的抵抗力,在pH3.0—9.0之间稳定。能抗 乙醚、氯仿等脂溶剂,但对常用消毒剂敏 感,0.5%漂白粉、2%氢氧化钠5min可杀 死病毒 3. 抵抗力

24 4.致病性 可引起猪的繁殖障碍性疾病,其特征为感染母猪,特 别是初产母猪产出死胎、畸形胎、木乃伊胎、流产及
病弱仔猪。母猪本身无明显症状。病毒可经胎盘垂直 传播。在交配、人工授精时也可感染。健康猪与病猪 直接接触或暴露于被污染的圈舍,经消化道、呼吸道 感染。污染的畜舍空圈4.5个月,经通常方法清扫后 再放进易感猪时,仍有可能被感染。猪是唯一的易感 动物。一般呈地方流行性或散发。本病常见于初产母 猪。猪群发生感染后,本病可能在猪场中连续不断的 出现母猪繁殖失败。

25 6.微生物学诊断 (1)病原学诊断 (2)血清学诊断 取木乃伊胎儿或这些胎儿的肺 常用的有血凝抑制试验和血清中和 病料接种于猪肾、猪睾丸原代
细胞或PK15等传代细胞进行分 离培养,并用已知血清做血凝 抑制试验鉴定病毒 常用的有血凝抑制试验和血清中和 试验等。其中以血凝抑制最为常用 抗原用4个单位的标准血凝素,红 细胞用0.5%豚鼠红细胞,滴度1:8 以上判为阳性

26 6.防制 坚持自繁自养的原则,如果必须引 起种猪时,应隔离饲养半个月,经 过两次血清学检查,血凝抑制效价 在1:256以下或为阴性时,方可混
群饲养 在本病流行地区将母猪配种时间推迟 至9月龄以后,如欲提前配种,须进 行血凝抑制试验检查,只能在具有高 滴度的抗体时才能进行配种 免疫接种,母猪在配种前两个月,接 种猪细小病毒灭活疫苗,每头猪 2ml,免疫期6个月 发病的猪场要做到严格消毒。仔猪母 源抗体可维持14~24周,断奶时将仔 猪从污染猪群移到清净区,可培育出 血清阴性猪群。猪场发病后,凡经确 诊的流产母猪的后代,不能留作种用

27 猪传染性胃肠炎病毒 (Transmissible gastroenteritis virus of swine,TGEV)
又称幼猪胃肠炎,是一种高度接触传染性,以呕吐、严重腹泻、脱水,致2周龄内仔猪高死亡率为特征的病毒性传染病。      从1933年起,在美国的伊利诺斯州就有本病的记载,我国的四川、湖北、吉林、陕西、台湾、北京、广州等省市也有本病的发生

28 属冠状病毒科冠状病毒属,有囊膜,其上覆有 花瓣状纤突,基因组为单股RNA。病毒粒子由 3种主要结构蛋白构成,一种是磷蛋白( N,
膜结合蛋白(M或E1),主要包埋在脂质囊膜 中;第三种为大的糖蛋白(S或E2),它形成 病毒的突起。TGE病毒能凝集鸡、豚鼠和牛的 红细胞,不凝集人、小鼠和鹅的红细胞 1.分类 与形态 在胎猪肾、睾丸原代细胞上传几代后有细胞 病变(CPE),还可用IBRS- 2(猪肾)和 ST(猪睾丸)等传代细胞系培养病毒 2.培养

29 TGE病毒只有一个血清型,各毒株之间 有密切的抗原关系 3.抗原性 不耐热,56℃45分钟,65℃10分钟死亡 在阳光下暴晒6小时即被灭活。生石灰、 碱性消毒剂等均有效。TGE病毒对乙醚、 氯仿、去氧胆酸钠、次氯酸盐、氢氧化 钠、甲醛、碘、碳酸以及季胺化合物等 敏感  4.抵抗力

30 各种年龄的猪均有易感性,但10日龄以内的新生 仔猪发病,则死亡率较高,而断奶猪、肥育猪和 成年猪的症状轻微,大多数能自然康复。本病多
5.致病性 各种年龄的猪均有易感性,但10日龄以内的新生 仔猪发病,则死亡率较高,而断奶猪、肥育猪和 成年猪的症状轻微,大多数能自然康复。本病多 发生在冬春寒冷季节,发病高峰为1~2月份。一 旦发生,在猪群里迅速传播,数日内可使大部分 猪受感染。猪传染性胃肠炎常与大肠杆菌、轮状 病毒混合感染,导致哺乳仔猪和断奶仔猪死亡率 增高

31 6.微生物学诊断 (1)病原学诊断 (2)血清学诊断 取病猪的粪、肠内容物或空肠 常用病毒中和试验,用已知 抗原检测血清中的抗体,也
回肠段为病料,经口感染5日 龄健康仔猪,进行动物感染试 验,或将病料处理后接种猪肾 原代细胞进行培养,分离毒用 标准抗猪传染性胃肠炎血清作 中和试验进行鉴定 常用病毒中和试验,用已知 抗原检测血清中的抗体,也 可以用已知血清鉴定分离的 病毒。荧光抗体试验用于鉴 定分离的病毒

32 该疫苗也可以给生后1~2日龄仔猪口服接种,4~5天产生免疫力。
7.防制 冬季要加强防疫工作,防止本病传入。平时做好免疫接种工作,对妊娠母猪于产前45天及15天进行肌肉和鼻内各接种1ml猪传染性胃肠炎弱毒冻干疫苗,仔猪出生后吮食母猪的初乳能获得保护。 该疫苗也可以给生后1~2日龄仔猪口服接种,4~5天产生免疫力。 猪群发病时,立即封锁猪舍,隔离病猪,限制人员和犬、猫等动物出入,严格消毒周围环境、猪舍和用具等,未发病猪立即隔离到安全地方饲养

33 猪流行性腹泻 Porcine epidemic diarrhea, PED
又名流行性病毒性腹泻、流行性腹泻型、类冠 状病毒腹泻,是由肠致病性的PED病毒引起的 一种以腹泻、呕吐和脱水为主要特征的猪肠道 传染病。该病与猪传染性胃肠炎(TGE)非常 相似。

34 猪流行性腹泻病毒(PEDV)属冠状病毒科。 PEDV 在粪便中的病毒颗粒是多形的,但趋于圆形。有囊膜
1.分类与形态 猪流行性腹泻病毒(PEDV)属冠状病毒科。 PEDV 在粪便中的病毒颗粒是多形的,但趋于圆形。有囊膜 2 病毒培养 在猪肠组织上皮细胞和胎猪小肠组织绒毛上皮原代细胞 上生长,在无血清营养液中加入10µg /ml胰蛋白酶,可 使本病毒适应Vero、CV-1(非洲绿猴肾)等传代细胞

35 PEDV对乙醚和氯仿敏感;在50一 60 ℃条件下对热 敏感;对酸性条件敏感;从患病仔猪的肠灌液中浓缩
3 抵抗力 PEDV对乙醚和氯仿敏感;在50一 60 ℃条件下对热 敏感;对酸性条件敏感;从患病仔猪的肠灌液中浓缩 和纯化的病毒不能凝集红细胞 4 血清型 目前,还没有发现PEDV有不同的血清型 5 致病性 各种年龄的猪均有易感性,哺乳仔猪、架子猪或育肥猪 的发病率很高,尤以哺乳仔猪受害最严重。本病多发生 于寒冷季节,以12月和翌年1月发生最多,有时呈地方 流行性。传播速度比猪传染性胃肠炎稍感缓慢

36 6 微 生 物 学 诊 断 7 防制 病原学诊断 取病猪小肠段内容物,经滤器除菌处理后,
6 微 生 物 学 诊 断 病原学诊断 取病猪小肠段内容物,经滤器除菌处理后, 将滤液接种于胎猪肠组织原代细胞或Vero细胞系等培养 分离病毒。用直接免疫荧光试验鉴定分离毒。还可用仔 猪人工感染试验,选2~3日龄不喂初乳的新生仔猪,经 口感染病猪肠内容物悬液,如试验猪发病,再取小肠组 织做免疫荧光检查。 血清学试验 间接ELISA,用已知抗原检测血清中的抗 体。血清中和试验,用已知抗原检测血清中的抗体,也 可以用已知抗血清鉴定分离的病毒。直接荧光抗体试验 用于鉴定分离的病毒 7 防制 目前使用的疫苗有两种,一种是猪流行性腹泻氢氧化铝灭活 疫苗,另一种是猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二联灭活疫 苗,保护率达85%。其他措施参照猪传染性胃肠炎。

37 轮状病毒 Rotavirus,RV 轮状病毒引起多种幼龄动物以腹泻为主要症状的 一种传染病。1969年,Mebus et al 首次从犊牛
粪便中检出该病毒,包括羊、驹、鹿、兔、小鼠 、鸡、火鸡均涉及。人的轮状病毒感染也很普遍, 初步统计,婴儿肠炎一半是有轮状病毒引起。猪 腹泻是由14%轮状病毒引起

38 2 培养 3抵抗力 1 分类与形态 轮状病毒(Rotavirus),属呼肠孤病毒科轮状病毒属,
无囊膜,具有双层衣壳,形如轮状的圆形病毒,基因组 由11个节段的双股RNA组成。一些A群轮状病毒具有血 凝活性,能凝集绵羊、豚鼠及人O型红细胞 2 培养 病毒在MA-104(恒河猴肾传代细胞系)上分离或培养时, 需经10µg /ml胰蛋白酶处理才能生长良好 3抵抗力 对理化因素有较强的抵抗力。对温度、PH、化学试剂、消 毒剂等有抵抗力,在室温能保存7个月,对酸(pH 3.9)稳 定。0.01%碘、1%次氯酸钠和70%酒精可使病毒丧失感染力

39 5 致病性 4 血清型 根据轮状病毒RNA的11个节段电泳区带的分布,将其分为A、B、
C、D、E、F 6个群,其中A群宿主为人和各种动物,A、B、C、 E群宿主为猪,A、B群宿主为牛。病毒的结构蛋白分为VP1. VP2.VP3.VP4.VP5.VP6.VP7。根据VP7的差异,可将A 群轮状病毒分为14个血清型;根据VP4差异,约有8个血清型, 它们之间有部分抗原交叉。绝大多数哺乳动物轮状病毒属A群 5 致病性 本病毒主要存在于病畜的肠道内。虽各种年龄的动物都可感染, 但对幼龄动物具有明显的病原性,成年动物多呈隐性经过。一 般根据该病发生在寒冷季节,幼龄动物突然发生黄白或灰暗色 水样腹泻,发病率高而死亡率低的特点

40 6 微生物学诊断 (1)病原学诊断 (2)血清学诊断 常用荧光抗体试验,用于鉴定 最常用的方法是取开始腹泻24
小时内的粪便或小肠内容物, 经高速和超速离心浓缩病毒后 做电镜检查。还涂片用直接荧 光试验检查病毒。也可用恒河 猴胎肾传代细胞(MA-104)培养 分离病毒,并用荧光抗体试验 鉴定病毒 常用荧光抗体试验,用于鉴定 分离的病毒。ELISA,用已知 抗原检测血清中的抗体。PAGE 电泳法:(用苯酚——氯仿抽 提法,提取猪粪便中轮状病毒 核酸,电泳,分析其电泳条带 有时受粪便中免疫复合物及非 特异性反应干扰

41 7 防制 只能对症治疗,加强护理,停乳(少排乳) 给糖盐水或给葡萄糖—甘氨酸电解液,防 我国研制的猪轮状病毒感染疫苗有两种,一
止脱水,酸中毒,继发感染 我国研制的猪轮状病毒感染疫苗有两种,一 种是猪源弱毒疫苗,另一种是猪轮状病毒和 猪传染性胃肠炎二联弱毒疫苗。后者给新生 仔猪吃初乳前肌肉注射,30分钟后吃奶,免 疫期达1年以上;给妊娠母猪分娩前注射, 使新生仔猪获得母源抗体被动免疫

42 猪圆环病毒 (Porcine circovirus,PCV)
猪圆环病毒感染是由猪圆环病毒引起猪的一种传染病,以贫血、黄疸、消瘦、腹泻、呼吸困难为特征。能引起猪体多系统进行性功能衰弱。又称猪断奶后多系统衰弱综合征(PMWS)

43 1.分类与形态 2.分离与培养 属于圆环病毒科圆环病毒属。无囊 膜,基因组为单股DNA PCV能在PK15和猪睾丸细胞增殖,
不形成细胞病变(CPE)

44 3.抵抗力 4.血清型 圆环病毒在环境中极其稳定,能抵 抗60℃ 30min,以及pH3~9 PCV在猪体内长时间演变过程中,
产生变异株,对猪有致病性为 PCV-Ⅱ型;没有致病性的能持续 污染PK15细胞的毒株为PCV-Ⅰ型

45 5.致病性 猪圆环病毒感染主要感染6~14周龄猪, 病猪体质下降、贫血、黄疸、消瘦、 腹泻、呼吸困难,剖检时肠系膜和气管
淋巴结显著肿大,肺部隆起的橡皮状硬 块,脾脏肿大,肾脏有白色病灶,胃在 靠近食管区常有大片溃疡,盲肠和结肠 黏膜充、出血等特征性病变

46 6.微生物学诊断 应用免疫荧光或原位 核酸杂交进行诊断
(1)病原学诊断 (2)血清学诊断 用PK15和ST传代 细胞分离鉴定病毒 应用免疫荧光或原位 核酸杂交进行诊断

47 7.防制措施 健全兽医卫生管理制度,断脐、断尾、剪耳号时一定要认真消毒。
定期驱虫。定时补铁,断齿和断尾。合理的接种疫苗,保证猪群有一致的高水平的免疫力。 猪舍应通风良好,经常清洗,严格消毒。坚持全进全出的饲养制度。 将病猪及早从生产群中移出或扑杀,并加强消毒,切断传播途径,杜绝疫情传播

48 谢谢观赏!


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