人感染H7N9禽流感病毒 病原学特点及实验室检测.

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1 人感染H7N9禽流感病毒 病原学特点及实验室检测

2 病例1 病例2 病例3

3 既往禽H7Nx病毒简介

4 欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、 捷克、西班牙、瑞典
HPAI H7N7 、 H7N3、 H7N1 LPAI H7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9 HPAI H7N3 LPAI H7N9 LPAI H7N9 LPAI H7N8、H7N9（Korea） HPAI H7N3（Pakistan） HPAI H7N3 LPAI H7N9 HPAI H7N7、 H7N3 、 H7N4 禽中暴发的H7 2006年前暴发的均为HPAI H7 欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、 捷克、西班牙、瑞典

5 近年来人感染禽流感病毒病例 血清学证据： 人感染H4, H5, H6, H7,H9,H10, H11 AIVs. 病毒亚型 病原来源
时间/国家 病例数/临床表现 A/H7N7 鸥 1980/美国 3/结膜炎 鸭 1996/英国 1/结膜炎 A/H5N1 禽 1997/香港 18/ILI，肺炎 A/H9N2 鸡 1998/中国广东 5/ ILI，肺炎 1999/香港 2/ILI A/H7N2 2002/北美（Virginia） 1/ILI，血清学诊断 2003/香港 1/ILI 2/ ILI，肺炎 2003/荷兰 89/结膜炎、ILI、肺炎; 1名死亡病例 2003至今, 15个国家 602/ ILI, 肺炎 A/H7N2(NY/107) 来源不清 2003/北美(New York)， 1/肺炎 A/H7N3 2004/加拿大 2/结膜炎、ILI; 1名LPAI；1名HPAI A/H5N2 2005/日本(Ibaraki) 13/无临床症状，血清学诊断 2007/英国(Wales) 1/结膜炎、ILI 2007/香港 1/ ILI A/H10N7 2004/埃及( Ismaillia) 2/ ILI 来源于疫区的鸟 2010/悉尼(New South Wales) 7/上呼吸道感染症状、结膜炎 血清学证据： 人感染H4, H5, H6, H7,H9,H10, H11 AIVs. CDC. Avian Influenza A Virus Infections of Humans.

6 HPAI LPAI H7感染人（>100人） 89/ Netherlands H7N7 1 died 4/USA H7N7
2/ Mexico H7N3 1/ Canada H7N3 1/USA H7N7 1/USA H7N7 1996 2002 2006 2007 2003 2004 1959 1977 1/England H7N7 1/ USA H7N2 7/ Italy H7N3 4/ Wales H7N2 1/ Canada H7N3 1/ USA H7N2 1/ Norfolk H7N3 LPAI H7感染人（>100人） 美国、英国、意大利、荷兰、加拿大

7 H7N9病毒 共25株 均为LPAI 无感染人病例 亚洲：7株 均来自野禽 5株—韩国 2株—蒙古

8 H7N9的致病力和传播力 HPAI H7N3和LAPI H7N9均不需经过适应便可在小鼠体内有效复制，且均能在雪貂上下呼吸道有效复制。
LPAI H7N9 LPAI H7N9 LPAI H7N9 Nose (white bars) , lung (black bars) HPAI H7N3和LAPI H7N9均不需经过适应便可在小鼠体内有效复制，且均能在雪貂上下呼吸道有效复制。 高致病性的HPAI H7N3致小鼠死亡，在雪貂模型中可通过接触传播，但LAPI H7N9在雪貂模型中不传播。

9 中国地区H7 AIV 亚型：H7N1, H7N2, H7N3, H7N7, H7N8 野禽居多 LPAI
A/Baer's pochard/HuNan/414/2010(H7N1) A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2) A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3) A/duck/Hubei/126/1985(H7N8) A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7) A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7) A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1) A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1) A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3) A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3) A/magpie-robin/China/28710/93(H7) 亚型：H7N1, H7N2, H7N3, H7N7, H7N8 野禽居多 LPAI

10 人感染H7N9禽流感病毒 实验室检测

11 核酸检测

12 病毒分离 从3个病例中分离到3株病毒 A/Shanghai/1/2013(H7N9) A/Shanghai/2/2013(H7N9)
A/Anhui/1/2013(H7N9)

13 序列测定 PB2 PB1 HA NP NA MP NS PA 6个内部片段来源于H9N2 三株H7N9病毒为同一基因类型

14 序列特点 耐药性分析 对烷胺类药物是耐药的，即M2蛋白25-42位氨基酸发生S31N突变。 HA连接肽分析
HA蛋白339位连接肽由单个（PKGRGLFG）碱性氨基酸组成，根据既往研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。 受体结合位点及其它重要位点分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 位氨基酸属于禽源受体结合位点（为QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 位氨基酸受体结合位点（为LSG） PB2蛋白627位氨基酸为K，提示致病性增强。 NS1蛋白92位氨基酸为D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。

15 HA核酸同源性比较

16 H7进化树 红色标记为本次病例 ●H7 人感染病例

17 N9 进化树 红色标记为本次病例

18 PB2进化树 红色标记为本次病例 ●H7 人感染病例

19 检测方法 2010年及之前下发的H7引物不再用于检测。 今天下发新的H7和N9检测引物（real-time PCR）。

20 检测策略 不明原因肺炎病例标本检测： 建议各流感监测网络实验室收到不明原因肺炎标本后，要在12小时内进行标本处理和核酸检测，同时进行甲型通用引物，甲型H1N1流感病毒，季节性H3N2流感，A（H5）、A (H7N9)亚型流感病毒的检测。如果H5或H7亚型检测阳性，在生物安全三级实验室进行流感病毒的分离鉴定，无病毒分离条件的实验室，将标本在24小时内送国家流感中心进行复核鉴定和病毒分离。

21 谢谢！