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C 用某人的胰岛素基因制成的DNA探针,检测下列物质,能形成杂交分子的是 ①该人胰岛A细胞中的DNA ②该人胰岛B细胞的mRNA
③该人胰岛A细胞的mRNA ④该人肝细胞的DNA C A、 ① ② ③ ④ B、 ① ② ③ C、 ① ② ④ D、 ②
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1.3 基因工程的应用
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一、植物基因工程硕果累累 1996年-2001年,短短5年中,全世 界转基因作物的种植面积增长了30倍。 2001年,全世界转基因植物种植面
积突破5×106hm2。 四种转基因作物种植面积比例: 大豆63%, 玉米19% 棉花13%, 油菜5%
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我国转基因作物种植面积位居世界第四
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抗虫转基因植物 抗病转基因植物 转基因植物 抗逆转基因植物 利用转基因改良植物品质
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转基因抗虫水稻(绿色植株)与对照(黄色枯萎植株)
抗虫棉(左)和普通棉(右)的叶子
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1.抗虫转基因植物 从某些生物中分离出具有杀虫活性的基因,将其导入作物中,使其具有抗虫性 方法: Bt毒蛋白基因、蛋白酶抑制剂基因、淀粉酶抑制剂基因、植物凝集素基因等 目的基因: 转基因抗虫棉;转基因抗虫水稻等。 成果:
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引起植物生病的病原微生物有:病毒、真菌和细菌
2.抗病转基因植物 引起植物生病的病原微生物有:病毒、真菌和细菌 抗病毒基因: 病毒外壳蛋白基因(CP基因) 病毒的复制酶基因 目的基因 抗真菌基因: 几丁质酶基因 抗毒素合成基因 成果: 抗烟草花叶病毒的转基因烟草 抗病毒的转基因小麦、甜椒、番茄等。
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3.抗逆转基因植物 成果: A.利用调节细胞渗透压的基因,提高作物抗旱和抗盐碱能力; B.将鱼的抗冻蛋白基因转入番茄,提高番茄的抗冻能力。
C.将抗除草剂基因导入农作物中,在喷洒除草剂时,杀死杂草而不杀死农作物。
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4.利用转基因改良农作物品质 成果: A.将富含赖氨酸的蛋白质的编码基因导入玉米,获得的转基因玉米赖氨酸含量提高30%。
B.将控制番茄成熟的基因带入番茄,获得转基因延熟番茄,储存期可以达2个月。 C.将与植物花青素有关的基因导入矮牵牛中,转基因矮牵牛出现颜色变异。
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二.动物基因工程前景广阔 1.用于提高动物生长速度 2.用于改善畜产品品质 3.用转基因动物生产药物 4.用转基因动物做器官移植的供体
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将外源生长激素基因导入鲤鱼体内,9个月后转基因鲤鱼比对照组重1.5Kg。
转入生长激素基因的鱼(上)和同龄的鱼 1.用于提高动物生长速度 目的基因: 生长激素基因 例如: 将外源生长激素基因导入鲤鱼体内,9个月后转基因鲤鱼比对照组重1.5Kg。 2.用于改善畜产品品质 例如: 将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,使转基因奶牛中乳糖含量大大降低。 目的基因: 肠乳糖酶基因
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抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、α-抗胰蛋白酶
3.用转基因动物生产药物 (1)乳腺(房)生物反应器: 指以转基因雌性动物个体的乳腺分泌乳汁来生产所需药品。 成果: 抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素、α-抗胰蛋白酶
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(药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子等调控组件重组)
目的基因: 药用蛋白基因 过程: 构建基因表达载体 (药用蛋白基因与乳腺蛋白基因启动子等调控组件重组) 获取目的基因 (药用蛋白基因) 显微注射 (哺乳动物受精卵中) 形成胚胎 将胚胎送入母体动物 发育成转基因动物 (只有在产下的雌性动物个体中,转入的基因才能表达) 动物进入泌乳期 (分泌的乳汁中包含所需要的药物) 优点: 产量高、质量好、成本低、易提取
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(2)膀胱反应器 优点: 1、收集产物蛋白比较容易,不必对动物造成伤害。 2、可以从动物一出生就收集产物,不论动物的性别和是否正处于生殖期。
3、从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
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4.用转基因动物做器官移植的供体 供体动物: 猪 存在难题: 免疫排斥 (T细胞) 解决方法: 将供体基因组导入某种基因调节因子,以抑制抗原决定基因的表达,或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
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三. 基因工程药物异军突起 1.基因工程药品 —— 胰岛素 传统生产方法的缺点 产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。
●一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4~5g胰岛素。 传统生产方法的缺点 产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。 可利用什么方法来解决上述问题? 利用基因工程方法制造“工程菌”,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。
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1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。
1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%~50%。 胰岛素是第一个基因工程药物。
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2.基因工程药品 —— 干扰素 干扰素是病毒侵入细胞后产生的一种糖蛋白。几乎能抵抗所有病毒引起的感染,是一种抗病毒的特效药。此外对治疗某些癌症和白血病也有一定疗效。 传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取,每300L血液只能提取出1mg干扰素。 1980~1982年,科学家用基因工程方法在大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素,是传统的生产量的12万倍。1987年上述干扰素大量投放市场。
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3.基因工程药品 —— 生长激素 治疗侏儒症的唯一方法,是注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前,要获得生长激素需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。 现利用基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。 人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。 目前我国生产的基因工程药物有白细胞介素-2、 干扰素、乙肝疫苗等。
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四. 基因治疗曙光初照 基因治疗是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗疾病的目的。这是治疗遗传病的最有效的手段。 基因治疗: 1.体外基因治疗 例如: 复合型免疫缺陷症的体外治疗 直接原因: 缺乏腺苷酸脱氨酶(ADA) 根本原因: 腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺失 方 法: 将ADA基因转入患者的淋巴细胞
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2.体内基因治疗: 例如: 囊性纤维病治疗 直接向人体细胞中转移基因
利用修饰的腺病毒作为载体,将治疗囊性纤维病的正常基因转入患者的肺部组织中。 ?
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体外基因治疗 导入 形成 重组 受体细胞 受体 细胞 体外培养 后导入 载体 + 治疗基因 患者 体内 直接导入 体内基因治疗
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3.基因治疗的发展现状: 处于初期的临床试验阶段 4.用于基因治疗的基因种类: 正常基因、反义基因和自杀基因
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五.基因芯片 基因芯片是特定序列的DNA片段(基因探针)
从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱;从病人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出病变图谱。 通过比较、分析这两种图谱,就可以得出病变的DNA信息。 基因芯片诊断技术以其快速、高效、敏感、经济、平行化、自动化等特点,将成为一项现代化诊断新技术。
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讨论: 1.基因芯片的用途? 2.基因芯片在临床诊断方面表现出的独特优势是什么?
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囊性纤维病病因 CFTR基因缺失3个碱基对 CFTR蛋白缺少一个苯丙氨酸,导致CFTR蛋白结构异常 CFTR蛋白转运氯离子的功能异常
患者支气管内黏液增多 黏液清除困难,细菌繁殖,肺部感染
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