医学微生物学实验.

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1 医学微生物学实验

2 Nomenclature: genus+species
种名 属名 S. aureas 金黄色 葡萄球菌 N. meningitidis 脑膜炎 奈瑟菌 E. coli 大肠 埃希菌

3 病原性球菌 Pathogenic cocci
葡萄球菌属 Staphylococcus 金黄色葡萄球菌 S. aureas 链球菌属 Streptococcus 链球菌 肺炎链球菌 S. pneumoniae 奈瑟菌属 Neisseria 脑膜炎球菌 N. meningitidis 淋病双球菌 N. gonorrhoeae

4 病原性球菌 生物学性状 致病性 免疫性 微生物学检查 防治 金葡 乙链 肺链 脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌 形态染色 培养 生化反应 抗原结构
抵抗力 致病物质 所致疾病 金葡 G+ 低 色素 溶血 4指标 SPA 强 耐药株 Coagulase staphylolysin PV Enterotoxin Exfoliatin TSST-1 <超抗原> 侵袭型疾病 食物中毒 假膜性肠炎 烫伤样皮肤综合征 毒性休克综合征 不强 直接涂片 分离培养 药敏 防止医源性感染等 乙链 荚膜 较高 菊糖- 胆汁溶菌- 弱 细胞壁成分 外毒素 （红疹毒素 链球菌溶血素） 侵袭性酶 化脓性感染 猩红热 风湿热、 急性肾小球肾炎 同型特异性免疫力 血清学（ASO） 青霉素G 肺链 矛头状成双 草绿色溶血 自溶酶 胆汁溶菌＋ 大叶性肺炎 牢固 荚膜多糖疫苗 脑膜炎奈瑟菌 G- 肾形成双 高 巧克力培养基 内毒素 流脑 体液免疫为主 疫苗 淋病奈瑟菌 咖啡豆成双 淋病 可自愈，免疫不持久 性传播疾病

5 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

6 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

7 1 病原性球菌的形态染色与培养 示教片： 菌落观察： 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌 （形状、大小、排列、染色 ）
1 病原性球菌的形态染色与培养 示教片： 葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、淋病奈瑟菌 （形状、大小、排列、染色 ） 菌落观察： 金葡、白葡、乙型溶血性链球菌 （形态、大小、表面、边缘、透明度、色素、溶血性）

8

9 Streptococcus pyogenes on blood agar,
illustration b-hemolysis. Streptococcus pneumoniae on blood agar, illustration a-hemolysis. Staphylococcus aureus on blood agar, illustration b-hemolysis. Staphylococcus epidermidis on blood agar With on hemolysis

10 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

11 2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 鉴定致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌得4大指标 色素 溶血素 甘露醇发酵 血浆凝固酶 耐热核酸酶
2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 鉴定致病性葡萄球菌与非致病性葡萄球菌得4大指标 色素 溶血素 甘露醇发酵 血浆凝固酶 耐热核酸酶 致病性葡萄球菌 金葡 金黄色 ＋ 非致病性葡萄球菌 表皮葡萄球菌 腐生葡萄球菌 白色或柠檬色 －

12 2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶试管法（示教） 检测哪种凝固酶？
2 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 0.5%琼脂粉＋牛肉汤＋甘露醇＋指示剂（溴甲酚紫） 血浆凝固酶试管法（示教） 检测哪种凝固酶？

13 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 结果观察： 标记后，稀释兔血浆各1滴 无菌操作，取菌苔少许，混匀，观察有无凝集 出现颗粒状凝集：＋
不凝集：－ S.a S.e

14 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 结果观察： 标记后，生理盐水各1滴 无菌操作，取菌苔少许，与N.S. 混匀，观察有无自凝
各加兔血浆1滴，混匀 结果观察： 出现颗粒状凝集：＋ 不凝集：－ S.a S.e

15 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

16 3 抗“O”试验 原理 方法 结果观察 完全不溶血的血清最高稀释度即为抗“O”抗体的效价。 正常参考值为 400单位以下。 试管号
1 2 3 4 5 生理盐水(ml) - 0.5 0.75 1：200血清(ml) 稀释倍数 1:200 1:400 1:800 还原溶血素“O”(ml) 0.25 摇匀，37C 水浴 45min 1％红细胞悬液(ml) 0.5弃去 结果观察 完全不溶血的血清最高稀释度即为抗“O”抗体的效价。 正常参考值为 400单位以下。

17 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）

18 平板分区划线法 1区(1/10) 烧接种环 2区(1/5) 4区 烧接种环 3区 烧接种环

19 第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 抗“O”试验（结果示教）
第四次 病原性球菌 病原性球菌的形态染色与培养 致病性葡萄球菌的分离和鉴定 甘露醇发酵（示教） 血浆凝固酶玻片法（操作，提供菌种） 血浆凝固酶试管法（示教） 抗“O”试验（结果示教） 粪便标本接种于SS培养基（每人一个，下次实验用）