6.5 芳胺类药物的分析.

Presentation on theme: "6.5 芳胺类药物的分析."— Presentation transcript:

1 6.5 芳胺类药物的分析

2 一、芳胺类药物的分类和基本结构 芳胺类药物 芳伯胺基未被酰化， 而在芳环对位有取代 的对氨基苯甲酸酯类 芳伯胺基被乙酰化，
并在芳环对位有取代 的酰胺类药物。

3 基本结构：均具有对氨基苯甲酸酯的母核。 芳伯胺基——有重氮化-偶合反应 酯键——易水解 侧链烃胺——具碱性
一）对氨基苯甲酸酯类药物的结构与性质 基本结构：均具有对氨基苯甲酸酯的母核。 芳伯胺基——有重氮化-偶合反应 酯键——易水解 侧链烃胺——具碱性

4 典型药物 苯佐卡因 盐酸丁卡因

5 盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺

6 主要理化性质 1.芳伯氨基特性：重氮化－偶合反应；易氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。
2. 水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸丁卡因外水解产物为对丁氨基苯甲酸（BABA）外，上述均为对氨基苯甲酸（PABA）。

7 主要理化性质 3. 弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具有弱碱性。但碱性较弱，不能用酸标准液直接滴定。
4. 其它特性：因结构中有芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐一般为白色结晶性粉末，易溶于水。

8 二）酰胺类药物类药物的结构与性质 基本结构：芳伯胺基被乙酰化，具有酰胺键。

9 典型药物 解热镇痛药 对乙酰氨基酚（扑热息痛） 抗麻风药 醋氨苯砜

10 典型药物 盐酸布比卡因 局部麻醉药 盐酸利多卡因 局部麻醉药 抗心律失常药

11 主要理化性质 1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸 水解后显芳伯氨基的特性反应。 注意空间位阻的影响。
2.水解产物易酯化：对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成 醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出乙 酸乙酯香味。

12 主要理化性质 3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基；醋氨苯砜酸 水解有酚羟基，可与FeCl3发生显色反应， 可相互区别。
4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显 碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可 相互区别。 5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成 有色配位化合物沉淀。

13 二、鉴别试验 （一）重氮化-偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯 氨基的药物，均可发生此反应。 Ar-NH2 重氮盐 橙黄~猩红色
OH- Ar-NH2 HCl 重氮盐 橙黄~猩红色 NaNO2 -萘酚

14 直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普鲁卡因胺

15 例： 盐酸普鲁卡因 ChP（2005） [鉴别] （1）本品显芳香第一胺类的鉴别反应
取供试品约50mg，加稀盐酸1m1，必要时缓缓煮沸使溶解，放冷，加0.1mo1/L亚硝酸钠溶液数滴，滴加碱性β-萘酚试液数滴，视供试品不同，生成由橙黄到猩红色沉淀。

16 水解后反应：对乙酰氨基酚、醋氨苯砜

17 盐酸丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N－亚硝基化合物的乳白色沉淀。

18 盐酸利多卡因和盐酸布比卡因酰胺基邻位上两个甲基，空间位阻较大，很难发生此反应。

19 （二）与三氯化铁反应 对乙酰氨基酚 + FeCl3 蓝紫色化合物

20 （三）与金属离子反应 1. 与铜和钴离子反应： 利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物，将其转入氯仿中，显黄色与氯化钴生成亮绿色沉淀。

21 2. 与汞离子反应 盐酸利多卡因在硝酸溶液中，与硝酸汞试液反应，呈黄色。 对氨基苯甲酸酯类药物呈红色或橙黄色。
盐酸利多卡因 + HNO3 + Hg(NO3)2 黄色 对氨基苯甲酸酯 ＋ HNO3 + Hg(NO3)2 红色或橙黄色

22 3. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的芳酰胺结构。 盐酸普鲁卡因胺被氧化成羟肟酸，与FeCl3反应生成紫色的羟肟酸铁。

23 (四) 水解产物反应 1. 盐酸普鲁卡因的鉴别 盐酸普鲁卡因 + NaOH 普鲁卡因↓ 油状物 对氨基苯甲酸钠 + 二乙氨基乙醇
 油状物 对氨基苯甲酸钠 + 二乙氨基乙醇 （使湿润的红色石蕊试纸变兰色） 对氨基苯甲酸钠 + HCl 对氨基苯甲酸（白色） HCl 沉淀溶解

24 盐酸普鲁卡因的水解产物反应

25 [鉴别] 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。
2. 苯佐卡因的鉴别 [鉴别] 取本品约0.1g，加氢氧化钠试液5m1，煮沸，即有乙醇生成；加碘试液，加热，即生成黄色沉淀，并发生碘仿的臭气。 苯佐卡因 + NaOH  乙醇 乙醇 + I2 + NaOH CHI3（碘仿臭气，黄色结晶） 碘仿反应： CH3CH2OH CH3CHO CHI3↓+HCOO- I2

26 (五) 其他鉴别试验

27 本品是以对硝基氯苯或酚为原料，得对氨基酚后，再乙酰化得对乙酰氨基酚。
三、特殊杂质检查 （一）对乙酰氨基酚的杂质检查 本品是以对硝基氯苯或酚为原料，得对氨基酚后，再乙酰化得对乙酰氨基酚。 Ch.P规定除一般杂质（酸度、氯化物、硫酸盐等）外，还需检查：

28 1、乙醇溶液的澄清度与颜色 本品外观应为白色结晶或结晶性粉末，易溶于乙醇。因其生产工艺用铁粉作还原，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生有色物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。 检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色； 如显混浊，与1号浊度标准液比较，不得更浓； 如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准液比较， 不得更深。 1、酸度 因生产过程中可能引进酸性杂质，本品水解以后也有醋酸生成，所以应检查酸度。 2、乙醇溶液的澄清度与颜色 本品外观应为白色结晶或结晶性粉末，易溶于乙醇。 3、有关物质 由于本品用对硝基氯苯为原料，可能引入对氯乙酰苯胺。药典对此项杂质采用薄层色谱法检查，采用硅胶GF254/氯仿-丙酮-甲苯（13：5：2）系统分离进行限度检查。

29 2. 有关物质检查：杂质来源：对氯苯乙酰胺、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌、醌亚胺等
检查方法：以对氯苯乙酰胺为对照品，采用TLC 法中的杂质（参比杂质）对照品法。 3. 对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与 亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化 合物，采用比色法。

30 (二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查
普鲁卡因的水解产物对氨基苯甲酸在贮藏过程中脱羧，氧化变成有色的对苯醌，使注射液变黄，疗效下降、毒性增加。 黄色

31 中国药典检查：TLC标准品对照法

32 四、含量测定 （一）亚硝酸钠滴定法 具芳伯胺基和潜在芳伯胺基的药物均可采用此法。 Ar-NH Ar-NHCOR Ch.P中的苯佐卡因、盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。

33 原理： 芳伯胺基或水解后生成芳伯胺基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，可用永停滴定法指示终点。
H + Ar-NH2 + RCOOH Ar-NHCOR + H2O Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O

34 测定的主要条件 重氮化的反应历程为： NaNO2 + HCl HNO NaCl HNO2 + HCl NOCl H2O

35 重氮化反应速度：氢溴酸＞盐酸＞硝酸、硫酸
(1) 加KBr增加反应速度 重氮化反应速度：氢溴酸＞盐酸＞硝酸、硫酸 KBr HCl HBr KCl HNO2 + HBr NOBr + H2O KKBr ∵ KHBr 比KHCl大300倍 ∴生成NOBr量大得多 ∴加快反应速度

36 实际滴定中盐酸用量远远大于其反应计量比1:2。 ①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。
(2) 加过量HCl加速反应 实际滴定中盐酸用量远远大于其反应计量比1:2。 ①重氮化速度加快； ②重氮盐在酸性介质中稳定； ③防止生成氨基偶氮化合物。 Ar-N2+Cl- + H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl 实际滴定用量摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.5~6 。

37 (3) 室温条件下滴定 温度高反应速度快，但过高，促使重氮盐分解。 每升高10℃，重氮化加快2.5倍，分解加快2倍。 Ar-N2+Cl- + H2O Ar-OH + N HCl (4) 滴定方法与速度 将滴定管尖端插入液面下，一次将大部分滴定液在搅拌下加入，然后提出液面，缓缓滴定至终点。

38 3. 指示终点的方法 (1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前： 无过量 无电流 HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零
(1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前： 无过量 无电流 HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零 HNO 永停在某一位置） (2) 外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl →2NO + I KCl + 2NaCl + 2H2O

39 例：盐酸普鲁卡因 ChP（2005） 取本品约0.6g，精密称定，照永停滴定法（附录ⅦA），在15～25℃，用亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1ml亚硝酸钠滴定液（0.1mol/L）相当于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。

40 基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因 侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱 性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比
(二）非水溶液滴定法 基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因 侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱 性弱，加醋酐可增加其碱性。因醋酐合乙酰氧离子比 醋酸合质子的酸性强，可增加碱性。 2(CH3CO)2O (CH3CO)3O CH3COO- 相当于 ［B]HCl + Hg(Ac)2 [B]HAc + HgCl2 [B]HAc + HClO4 [B]HClO4 + HAc

41 （三）分光光度法 1. 对乙酰基酚原料的含量测定 在0.4%NaOH介质中；257nm E1%1cm＝715
2. 对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上） 1片＋稀HCl 24ml + H2O ml 精密量 取5ml + 0.4%NaOH10ml + H2O ml λ257nm测定A。 W×1／1000×5／100×100＝C （g/100ml) W(g) = 200 ×C; C = A/715 ∴ 溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格

42 芳香伯胺化合物在中性条件下发生重氮化-偶合反应，生成有色的偶氮染料，进行比色测定。
（四）比色法 芳香伯胺化合物在中性条件下发生重氮化-偶合反应，生成有色的偶氮染料，进行比色测定。 pH4-9 盐酸普鲁卡因 +1,2-蒽醌-4-磺酸钠 棕红色化合物 max482nm处测定A

43 （五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定 盐酸普鲁卡因胺 + 荧胺 荧光物 pH7.5
λex400nm（激发波长）、λem485nm（发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。

44 （六）HPLC法 此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两者的含量，该法简单准确。 色谱条件：色谱柱为 C18 流动相为甲醇－1％HAc(40:60); 检测：UV检测器250nm.

45 小 结 1、掌握本类药物的分类及结构特征。 2、掌握本类药物的鉴别反应（重氮化－偶合反应、与金属离子反应）。
小 结 1、掌握本类药物的分类及结构特征。 2、掌握本类药物的鉴别反应（重氮化－偶合反应、与金属离子反应）。 3、掌握亚硝酸钠滴定法的原理与注意条件。

46 END Thanks!