实 验 二 放线菌和真菌形态 的观察.

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1 实 验 二 放线菌和真菌形态 的观察

2 放线菌和真菌形态的观察 目的要求 实验材料 实验程序 思考题

3 目的要求 学习观察放线菌和真菌形态的基本方法 加深理解放线菌和真菌的形态特征

4 实验材料 放线菌和真菌培养物 放线菌培养物：青色链霉菌（Streptomyces glaucus）或“5406”产生菌（St. microflacus）四天培养物。 啤酒酵母（Saccharomyces cervisiae）24至28h液体培养物或斜面培养物。 黄曲霉（Aspergillus flavus）4d平面培养物。 各种真菌示范片。 显微镜、载玻片、接种环、解剖针、解剖刀、酒精灯、镊子等。 乳酚油、碘液、酒精、蒸馏水等。

5 实验程序Ⅰ 观察放线菌链霉菌的形态 观察酵母菌的形态 观察霉菌的形态

6 实验程序Ⅱ（观察放线菌链霉菌的形态） 个体形态直接观察法： 观察菌丝和孢子丝自然生长的性状，其中包括气生菌丝（较粗），基内菌丝（较细）和孢子丝的形状，如分枝状况及孢子丝的卷曲等，并绘图说明。 印片染色法： 印片 微热固定 石炭酸复红染色1min 水洗 晾干 镜检

7 实验程序Ⅲ（观察放线菌链霉菌的形态） 插片染色法： C插片培养4—6d，轻轻取出盖玻片，进行固定、染色、水洗、晾干、镜检。观察方法同“直接观察法”，观察基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状况，及分生孢子的形状。

8 放线菌的形态 特征：丝状分枝、 多核、 单细胞（细胞核之间没有分隔） “种籽” “枝” “花” “根”

9 实验程序Ⅳ（观察酵母菌的形态） 观察酵母菌形态和无性繁殖： 用高倍镜观察啤酒酵母的形态和出芽繁殖。
酵母肝糖染色法： 在洁净的载玻片上滴一小滴路哥氏碘液（Lugol），取一环酵母菌液与碘液混匀，盖上盖玻片，镜检，菌体呈淡黄色，肝糖粒呈红褐色。在高倍镜下观察菌体形态、出芽、芽簇、肝糖粒，并绘图。 酵母脂肪粒染色法： 在洁净的载玻片上加一滴，取一环啤酒酵母与福尔马林混匀，静止5min，加1滴美兰染色液，10min后再加一滴苏丹Ⅲ染色液，盖上盖玻片，镜检。原生质呈兰色，脂肪粒呈粉红色，而液泡无色。

10 实验程序Ⅴ（观察霉菌的形态） 观察黄曲霉菌丝分隔情况和分生孢子着生情况（着重辨认分生孢子梗、顶囊、小梗和分生孢子）：
在洁净载玻片中央加一滴酒精，用接剖针挑取黄曲霉培养物少许放入其中，再加入酒精和蒸馏水各一滴（重复一次），使分生孢子分散，便于观察。倾去酒精和蒸馏水，加一滴乳酚油（防止细胞变形和气泡产生，又可防止干燥以保持较长时间），盖上盖玻片，镜检、观察。 用同样方法制取青霉（Penicillium sp.）封片，示范片，观察菌丝有无分隔和分生孢子梗、小梗、及分生孢子排列方式，并绘图。 用同样方法制取镰刀霉（Fusarium sp.）封片，示范片，观察孢子丝和着生部位的构造，并绘图。

11 实验程序Ⅵ（观察霉菌的形态） 取黑曲霉（Rhizopus niger）5d平板培养物，用其皿盖，在低倍镜下观察菌丝体形态（假根、匍匐菌丝、孢囊梗及孢囊等）并绘图。 更好的是采用载片培养法，可制成永久的封片，更便于保存。 做蘑菇切片。观察担子菌担子着生情况及其孢子的形态等，示范片，并绘图。 观察梨头霉（Absidia sp.）或根霉的接合孢子，示范片，并绘图。

12 1.毛霉属

13 2．根霉属（假根处分枝）

14 镰刀—孢子囊形状呈镰刀形、长柱形、球形，有多细胞与单细胞之分。
新 月 藻 3．镰刀霉属 镰刀—孢子囊形状呈镰刀形、长柱形、球形，有多细胞与单细胞之分。

15 4．交链孢霉属 霉腐、致癌、过敏性鼻炎 交链—孢子囊链式相连 单个孢子呈纺锤形，有横和竖的隔膜将孢子分隔呈砖壁状。

16 思考题 在用放线菌菌苔直接观察气生菌丝和孢子丝的形态时，要注意些什么？ 在制取酵母菌的水浸片时，要注意哪些要点？
制取酵母水浸片时为什么不用水，而用乳酚油？