实验11 植物的组织培养.

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1 实验11 植物的组织培养

2 植物组织培养技术有何意义？ 快速繁育

3 植物组织培养技术有何意义？ 用花药培养法先后培育出优质高产的经济作物、粮食和蔬菜等新品种，广泛应用于果树和花卉的快速繁殖。
借助于组织培养生产人工种子，解决某些作物品种繁殖力差、结子困难或发芽率低等问题。 生产药物、食品添加剂、香料、色素、和杀虫剂等。例如：紫杉醇，生物碱、紫草素等。

4 植物组织培养技术有何意义？ 转基因植物的培育 植物去病毒

5 激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响
实验目的 1.进行菊花的组织培养 实验原理（基础知识回顾) 实验材料 实验步骤 思考和联系 2.尝试植物激素的应用 激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响 激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响

6 基础知识回顾 （一）植物组织培养的基本过程 细胞全能性 细胞分化的概念 离体植物细胞的脱分化和再分化

7 植物组织培养的基本过程

8 （二）影响植物组织培养的因素 培养基配制 外植体的选取 消毒接种 培养 移栽和栽培等

9 1、外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 2、培养基的配制(MS培养基) 大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S 微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等 3、不同植物激素使用顺序和使用量

10 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因： 5、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18—22℃ 每日光照12h
4、消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境原因： 5、pH、温度、光照 菊花： pH= 温度控制在18—22℃ 每日光照12h 植物组织培养用的培养基，含有植物生长发育所需要的各种营养物质，这些营养物质同样为细菌等微小的生物提供了适合的营养。在这种培养基上，细菌等微小的生物比植物细胞具有更强的新陈代谢能力，它们比植物细胞生长、繁殖得更快，而且它们会产生毒素，使培养的植物细胞很快中毒死亡。因此，植物组织培养要想取得成功，必须有效地防止细菌等的污染，保证培养材料、培养基、培养用具完全无菌。为了达到这一要求，就要在植物组织培养过程中进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作。

11 实验材料用具 培养瓶、镊子、超净台、灭菌锅、封口膜和橡皮圈、有棉球的广口瓶、酒精灯、三角漏斗、培养皿 MS培养基 萘乙酸、苄基腺嘌呤
发芽培养基 生根培养基

12 实验过程 冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 生芽 生根 移 栽 栽 培

13 思 考 1、高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？
此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。 2、培养过程中为什么需要进行光照 在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程。

14 3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？
培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 外植体的消毒（酒精、氯化汞） 接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 无菌箱中的培养； 移栽到消过毒的环境中生存一段时间。

15 结果分析与评价 （一）对接种操作中污染情况的分析 （二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化 （三）是否进行了统计、对照与记录
（四）生根苗的移栽是否合格

16 激素使用的先后顺序对细胞分裂和分化的影响
使用顺序 实验结果 先生长素，后细胞分裂素 有利于分裂但不分化 先细胞分裂素，后生长素 细胞既分裂也分化 同时使用 分化频率提高

17 激素的用量比例对细胞分裂和分化的影响 生长素／细胞分裂素比值 结果 比值高时 促根分化，抑芽形成 比值低时 促芽分化，抑根形成 比值适中
促进愈伤组织生长