猪 瘟 hog cholera(HC) classical swine fever(CSF)

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1 猪 瘟 hog cholera(HC) classical swine fever(CSF)

2 一、概况 二、病原学 三、猪瘟临床症状和病理变化 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 五、猪瘟诊断方法 六、猪瘟疫苗的研究 七、猪瘟防制策略
(一)集约化猪场当今主要疫病 （二）猪瘟流行动态 二、病原学 三、猪瘟临床症状和病理变化 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 五、猪瘟诊断方法 六、猪瘟疫苗的研究 七、猪瘟防制策略 八、对猪瘟一些问题的探讨

3 一、概况 (一)集约化猪场当今主要疫病 猪繁殖与呼吸障碍综合症(蓝耳病，PRRS) 断奶仔猪多系统衰弱症(圆环病毒、PCV2、 PMWS)
猪瘟(HC)     猪繁殖与呼吸障碍综合症(蓝耳病，PRRS)     断奶仔猪多系统衰弱症(圆环病毒、PCV2、 PMWS)      附红细胞体病(EPE)      HC+PRRS，PRRS+PCV2，PRRS+EPE等

4 （二）猪瘟流行动态 猪瘟(Hog Cholera,HC),又称古典猪瘟(Classical Swine Fever,CSF),猪的一种烈性传染病。已有170多年的历史,关于猪瘟流行起源,国际上尚无统一认识。 该病主要在南美和亚洲地区流行,西方一些国家（如捷克、爱沙尼亚、波兰、匈牙利、加拿大、美国、百里斯、巴拿马等）已宣布消灭了猪瘟，欧洲中部和东部绝大多数国家也靠疫苗控制猪瘟。

5 The OIE defines the requirements for CSF-free status as follows (OIE, 1998):
_ Absence of CSF for at least two years _ One year after slaughter of the last affected animal following a stamping out campaign with vaccination. _ Six months after slaughter of the last affected animal following a stamping out campaign without vaccination.

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7 二、病原学 猪瘟病毒抗原性猪瘟病毒只有一个血清型。
经典猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus.CSFV)以往被列入披膜病毒科(Togaviridae)瘟病毒属(Pestivirus)。1991年被列入黄病毒科，瘟病毒属。同属的还有牛病毒性腹泻病毒（BVDV）及边地病病毒。 猪瘟病毒抗原性猪瘟病毒只有一个血清型。

8 我国CSFV基因分型 　　 我国目前流行着2个基因群共4个基因亚群， 即基因2群中的Subgroup2.1、Subgroup2.2 Subgroup2.3亚群和基因1群中的Subgroup1.1亚群。 长江以北地区的CSFV流行毒株主要集中在Subgroup2.1 Subgroup2.2中,长江以南地区的CSFV，多集中在Subgroup2.1和Subgroup2.3中。

9 三、猪瘟临床症状和病理变化 典型猪瘟 非典型或温和型猪瘟 近些年急性型和亚急性型典型猪瘟很少见。 持续感染(亚临床隐性感染)
母猪繁殖障碍(妊娠母猪带毒综合征) 仔猪先天性感染(胎盘垂直感染) 免疫耐受(免疫力低下)

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27 四、我国猪瘟免疫效果检测情况 猪瘟实际免疫效果检测
四、我国猪瘟免疫效果检测情况 猪瘟实际免疫效果检测 作者 年份 省区 检测 方法 免疫合格率(%) 备注 王在时 2003 全国 ELISA 74.7%(5486/7347) 全国送检1# 何启盖 2000 6省 IHA 55.84%(421/754) 44个猪场 2# 卢建红 2002 湖南 65.8%(2102/3190) 田间样品 陆文俊 广西 76.9%(819/1065) 28个种猪场 母安雄 浙江 83.64%(722/845) 24个猪场 李勇 97.2% 种猪场 3# 王泽洲 四川 82.56%(895/1084) 13个种猪场 乔宏兴 河南 34.67%(147/424) 51个种猪场

28 注解 猪瘟免疫效果总体而言不理想，近年略有改善 1# HC双抗体阴性猪13.8%(1017/7347) 2# 农业部重点课题
2# 农业部重点课题 母猪合格66.70% 肥猪合格37.06% 仔猪合格22.02% 滴度为0：母猪7.26%,肥猪15.32%,仔猪 % 3# 母猪配种前免疫4头份 猪瘟免疫效果总体而言不理想，近年略有改善

29 免疫猪群猪瘟强毒抗体检测结果 作者 年份 省区 检测 方法 强毒感染率(%) 备注 王在时 2003 全国 ELISA
11.5%(844/7347) 全国送检1# 吴美洲 2000 湖北 10.1%(70/695) 28个猪场 王生祥 青海 9.26%(334/3605) 黄雨田 2002 新疆 27.98%(334/1194) 2# 郑世军 1997 北京 86.6%(26/30) 3# 王泽洲 四川 21.86%(237/1084) 13个种猪场

30 注解 1# 全国范围内可能为3%-30% 2# 全系种母猪，无临床表现但仔猪10日 龄左右大规模死亡，采取正确免疫程序 后疫病控制。
1# 全国范围内可能为3%-30% 2# 全系种母猪，无临床表现但仔猪10日 龄左右大规模死亡，采取正确免疫程序 后疫病控制。 3# 出现严重繁殖障碍母猪，猪群中猪瘟 强毒(野毒)感染十分普遍。

31 五、猪瘟诊断 病毒分离 动物接种试验 荧光抗体试验　 鸡新城疫病毒强化实验　 血清中和试验 猪瘟间接血凝试验 免疫酶测定技术PPA-ELISA

32 抗原捕获ELISA 复合捕捉封闭ELISA 间接ELISA 竞争ELISA RT-PCR 套式ＰＣＲ 鉴别 PCR 髓细胞检查法 ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ的联合应用,即ＰＣＲ －ＥＬＩＳＡ技术,

33 据报导ＲＴ ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法敏感、特异,比琼脂糖凝胶电泳敏感100倍，能够检测到350μＬ1∶100(相当于3
据报导ＲＴ ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ方法敏感、特异,比琼脂糖凝胶电泳敏感100倍，能够检测到350μＬ1∶100(相当于3.5ｍｇ)的典型热反应兔脾组织悬液中的Ｃ株ＣＳＦＶ和田间野毒样品中的ＣＳＦＶ。 这些样品基本包括了分布于我国的ＣＳＦＶ各基因亚型，适合于我国猪瘟诊断。

34 ＲＴ ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ的具体方法 ＲＴ ＰＣＲ－ＥＬＩＳＡ用ＰＣＲ ＥＬＩＳＡ试剂盒检测地高辛标记的ＣＳＦＶＲＴ ＰＣＲ产物。在20μＬ变性液中加入5μＬ地高辛标记的ＰＣＲ产物,混匀,置室温(15～25℃)10ｍｉｎ。然后加含10ｐｍｏｌ/ｍＬ生物素标记捕获探针(Ｐ5)的杂交液至250μＬ,混匀后取200μＬ加入链亲和素包被的微孔中,45℃振荡培养3ｈ。用250μＬ洗液洗3次,甩干后加200μＬ工作浓度的抗地高辛过氧化物酶(ａｎｔｉ ＤＩＧ ＰＯＤ),在37℃暗室中振荡30ｍｉｎ。洗5次后加200μＬＡＢＴＳ底物溶液,在37℃暗室中振荡30ｍｉｎ。测Ｄ405ｎｍ值。每次反应均设阳性对照、阴性对照和空白对照。阴性对照的Ｄ405ｎｍ应在0.1以下,Ｄ405ｎｍ≥0.1者为阳性。

35 六、猪瘟疫苗的研究 HCLV(兔化弱毒株)世界公认优良毒株 基因工程亚单位疫苗
病毒活载体疫苗以无致病力或低毒力的痘苗病毒(VAC)和伪狂犬病病毒(PRV)为载体,将猪瘟病毒E2基因与之重组研制出的基因重组疫苗,免疫动物后可对2种病毒产生良好的保护力。

36 DNA疫苗解放军军需大学已用猪瘟DNA疫苗成功保护了猪瘟病毒对猪的攻击。
cDNA标记疫苗标记疫苗是在分子水平上,将具有选择性标记的基因,克隆到致弱病毒全长cDNA中,免疫动物经过检测,可以区分抗体来自于自然感染还是标记疫苗免疫,从而断定动物发病情况。

37 七 猪瘟防制要点 加大免疫剂量2-4倍，不宜任意加大 用生理盐水稀释三联苗 科学免疫程序制订
七 猪瘟防制要点 加大免疫剂量2-4倍，不宜任意加大 用生理盐水稀释三联苗 科学免疫程序制订 种猪场对出现繁殖障碍母猪必须逐头检测HC抗体或扁桃体测毒。 < > 返回 退出

38 无滴度或低滴度母猪及带毒母猪必须淘汰。 种猪使用组织苗后，仔猪免疫程序应慎重。 持续免疫后，能达到保护猪场仅为64% < >
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39 母猪出现繁殖障碍或仔猪大规模死亡时，对猪群进行猪瘟苗紧急预防。
加强检疫、监测及贯彻综合防制措施 猪场通过综合防制完全可以有效控制HC 保持疫苗低温保存及冷链运输 < > 返回 退出

40 有母源抗体仔猪6周龄前免疫效果不良，应在7-9周龄免疫1次即可，两次免疫并不优于1次免疫
目前主要使用GPE-、PAV-2等弱毒苗 防止种猪及仔猪感染PRRS、PRV、PPV以免影响HCLV免疫效果。 < > 返回 退出

41 八 对猪瘟一些问题的探讨 种猪为什么会出现HCV带毒现象？ (育肥猪有HCV带毒现象吗？) 1 免疫剂量与免疫程序
八 对猪瘟一些问题的探讨 种猪为什么会出现HCV带毒现象？ (育肥猪有HCV带毒现象吗？)     1 免疫剂量与免疫程序 2  PRRS、PCV2、PRV、PPV感染对猪瘟免疫的影响 3 猪的牛病毒性腹泻(BVDV)感染。BVDV可引起猪亚临床感染甚或死亡，BVDV已遍及全国

42 佘永建等(2002)，四川，种猪场PRRS爆发猪瘟免疫合格率的相关观察结果表明 ：一切维持原状的猪场，PRRS爆发后，出现HC、PRRS、EPE、APP等。 猪瘟免疫合格率由100%下降为31.7%。再次紧急免疫后猪瘟免疫合格率提升为83.3% 类似研究宁宜宝等(2003)实验观察、杨汉春(2003)、李祥瑞(2002) 也有报导。 PRRS免疫与HCLV免疫不宜同时进行。 PRRS与MP免疫应有间隔，否则相互干扰。