Download presentation
Presentation is loading. Please wait.
Published by洞 宋 Modified 8年之前
1
Bioactivity of Antioxidants in Extruded Products Prepared from Purple Potato and Dry Pea Flours
报告人: 彭吕杨 指导教师:薛照辉 报告时间:2012年6月5日
2
文章简介 文章来源:Journal of Agriculture and Food Chemistry
作者:Balunkeswar Nayak,Rui Hai Liu Juming Tang, etc. 发表机构:华盛顿州立大学,康奈尔大学,美国农业部下属某机构。 发表日期: May 26, 2011
3
Contents 1 Introduce 2 Materials and Methods 3 Results 4 Discussion
4
1 Introduce 传统观点认为加工过的比未加工过的水果和蔬菜在抗氧化性方面较差。
这种观点是有误的:传统观点中以维生素C作为抗氧化的标准物,实际上维生素C对总的抗氧化活性只占到大约0.4%。 天然活性物质分为三种类型:游离型、可溶共轭型、结合型。
5
1 Introduce 许多研究已经揭示了马铃薯中具有许多抗氧化的活性物质,且具有一定的生理活性。
豆科植物作为蛋白质和膳食纤维的主要来源,同样具有抗氧化活性,同时有报道称其对人体健康有潜在的好处。 关于马铃薯和豆类混合物对抗氧化活性、消化、吸收研究报道较少。Liu之前的研究揭示水果、蔬菜、全麦活性提取物混合具有一定加和、协同作用。
6
细胞学定量评价(cellular antioxidant activity,CAA)
1 Introduce 细胞学定量评价(cellular antioxidant activity,CAA) free and bound forms 原材料和混合物 加工和未加工(膨化) 主要的试验内容和目的
7
2.1 Materials “Purple Majesty” potatoes peel slice blanch drum-dry pin-mill flour split dry peas mix purple potato flour (PPF) and dry pea flour (DPF):35:65, 50:50 and 65:35 PPF/DPF, w/w 得到产物被储存在-80℃下以供进一步的使用
8
2.2 Extraction of Free Phenolic Compounds
方法是Liu实验组的提取方法:1原材料;2混合物;3膨化物。 使用高速均质机将1-2g样品分散在50ml的80%的丙酮。 2500r/min 离心5分钟,取上清液。重复提取一次,也取上清液。 上清液在45℃下干燥,然后用溶于10ml水中,储存在-75℃下。
9
2.3 Extraction of Bound Phenolic Compounds
方法是Liu实验组的提取方法:1原材料;2混合物;3膨化物。 将1-2g样品的80%的丙酮2500r/min 离心5分钟。 弃去上清液,剩余物在氮气保护下,用20ml的2M NaOH在室温下消化1h。 盐酸中和后,用己烷去除脂质,用乙酸乙酯萃取5次。 将萃取物蒸发干燥,储存在-75℃下备用。
10
2.4 Determination of Total Phenolics
400μL去离子水和100μL提取物或者标准溶液在反应试管中混合 加入100μL福林酚试剂反应6min 再加入1ml 7%碳酸钠溶液和800μL去离子水,混合均匀 在室温下放置90min,在760nm下用MRX II DYNEX分光光度计测量 以标准等量没食子酸(GAE)作为衡量
11
2.5 Determination of Individual Phenolic Acids
样品中需要分析酚酸种类:绿原酸、咖啡酸、对香豆酸、阿魏酸。 仪器:Waters 515 HPLC pump 样品中酚酸浓度依靠纯的酚酸标准曲线来测定衡量。
12
2.6 Determination of Total Flavonoids
检测方法:改进的Sodium borohydride/chloronil (SBC) 经过一系列反应,使用MRX微型孔板检测仪检测反应物的吸光度 衡量样品中黄酮依靠:每克样品等量的儿茶酸的质量。
13
2.7 Measurement of Antioxidant Activity
检测方法:改进的oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay 原理:自由基破坏荧光探针, 使荧光强度产生变化原理,以维生素E水溶性类似物Trolox为定量标准,使用荧光微孔板分析仪进行分析。荧光强度的变化大小反映自由基破坏的程度。在抗氧化剂存在时,它可以抑制由自由基引起的荧光变化。抑制程度反映了它对自由基的抗氧化能力 衡量样品中黄酮依靠:每克样品等量的生育酚的质量。
14
2.8 Cellular Antioxidant Activity (CAA) Assay
肝癌细胞在37℃、5%CO2条件下,96孔板培养5-7代。 经过24h培养后,倒去培养基,使用PBS洗去死的细胞。 加入不同浓度提取物加上少量二氯荧光素 。 加入一定量ABAP,然后使用Fluoroskan Ascent FL检测仪5分钟测量一次,持续1h。最终衡量是采用EC50,即50%抑制率所需样品的质量。
15
3 Results
16
3 Results
17
3 Results
18
3 Results
19
3 Results
20
3 Results
21
3 Results
22
4 Discussion 以往研究只是研究自由型提取物,本文研究内容包括自由型和结合型,对总的活性物质研究提供更准确的信息。
研究表明PPF和DPF自由型酚类含量比结合型酚类多,经过膨化处理后的总酚含量会增加。可能原因加工破坏共轭键,将共轭酚转化为自由酚;或者是其他非酚类物质在加工过程中的流出。 对于ORAC实验,同样可以观测到结合型的大量减少,自由型的增加。可能原因是1破坏共轭碱;2对酶促氧化的抑制;3发生美拉德反应。作者查询FRAP、DPPH实验现象则是相反的,经过加工后自由型有所降低
23
4 Discussion 对于总黄酮含量,自由型的比例比结合型的比例高出许多。与之前不一样的,自由型和结合型在膨化处理后含量都有所提升。可能原因是:1植物细胞的破坏提供更好的可萃取性;2破坏高分子量的化学键,形成低分子量的化合物;3黄酮的互换现象。 对香豆酸是紫薯中最主要的酚酸,接着是绿原酸、咖啡酸、阿魏酸。对香豆酸和咖啡酸最主要发现在结合型中,而绿原酸则主要集中在自由型中,阿魏酸仅仅集中在结合型中。 对细胞定量评价试验中,更低的EC50意味更高的CAA值。50%PPF膨化产品具有更高的CAA值,更低的EC50值,同时比没有处理的原料高。而35%PPF和65%PPF则没有显著性的区别。这意味着50%PPF配方具有更好的加和和协同效果。
24
Thank You!
Similar presentations