管理肠道健康·实现无抗养殖 ——霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得 孙进华 博士、副研究员 东北农业大学动物科技学院.

Presentation on theme: "管理肠道健康·实现无抗养殖 ——霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得 孙进华 博士、副研究员 东北农业大学动物科技学院."— Presentation transcript:

1 管理肠道健康·实现无抗养殖 ——霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得 孙进华 博士、副研究员 东北农业大学动物科技学院

2 引起仔猪腹泻的原因 一、非传染性腹泻 ■ 营养性 ■ 生理性腹泻 ■ 应激性腹泻 仔断奶换料腹泻
■ 应激性腹泻 仔断奶换料腹泻 大多数人认为断奶腹泻是由于换料应激造成的，其实不够准确。 酶系发育不健全，蛋白酶、脂肪酶配方设计要求仔猪易消化的营养物质。

3 仔猪出生后消化酶的变化动态

4 引起仔猪腹泻的原因 二、传染性腹泻 （病原性） 病原菌引起： 1、细菌性腹泻（主要是革兰氏阴性菌） 2、病毒性腹泻 3、寄生虫性腹泻
4、霉菌毒素性腹泻

5 细菌性腹泻 主要致病菌： 致病机理： 大肠杆菌（黄、白痢）、沙门氏菌（副伤寒）、产气荚膜梭菌（红痢）、痢疾密螺旋体 （猪痢疾）。
致病菌能够吸附于肠粘膜绒毛细胞的表面，破坏小肠绒毛上皮细胞细胞； 影响营养物质消化吸收； 产生的毒素造成小肠脱水。

6 普通防控措施 添加抗生素 ■ 过量添加造成药物残留、危害人类健康；同时造 成小肠绒毛及隐窝的破坏，抑制后期仔猪生长；
■ 常量添加效果不够明显，并且持续反复刺激容易 造成耐药性的产生。

7 普通防控措施 改善养殖环境 ■ 养殖环境不是饲料企业所能控制的； 肠道环境
■ 肠道环境 添加益生菌在饲料生产过程中损耗过 大，效果不够明显。

8 霉菌毒素引起的腹泻 ■ 霉菌毒素破坏肠绒毛上皮细胞，造成营养物质消 耗吸收受阻、直肠温度升高。 ■ 引起脱水、呕吐、粘膜炎、消瘦、腹泻。
■ 主要引起腹泻的毒素：赭曲霉毒素（OTA） 、 烟曲霉毒素（FUM） 、呕吐毒素（DON）等。

9 霉菌毒素 ■ 霉菌毒素是谷物或饲料中霉菌生长产生的次 级代谢物。主要危害：致癌性、致突变性、致畸 胎性、致雌激素异常、致出血、免疫毒性、肾毒 性、肝毒性、皮肤毒性及神经毒性等 ■ 美国2002年就已经将霉菌毒素列为饲料安全 的第二大危险因素。 ■ 大多数霉菌毒素在动物采食饲料后的30分钟 内，就会释放到消化道中，小肠是霉菌毒素吸收 的主要场所。

10 影响畜牧业的霉菌毒素种类 ■ 黄曲霉毒素（Aflatoxins，AFB1） ■ 玉米赤霉烯酮（Zearalenone，ZEA）
■ 呕吐毒素（Vomitoxin DON） ■ T—2毒素（T-2 Toxin） ■ 赭曲毒素（Ochartoxins OTA） ■ 烟曲霉毒素（Fumonisins，FUM）

11 主要霉菌毒素的危害 霉菌毒素 黄曲霉毒素 呕吐毒素 玉米赤霉烯酮 T—2毒素 烟曲霉毒素 赭曲霉毒素 敏感动物 主要表现症状 所有动物
肝脏受损伤，生长延缓，免疫力下降 呕吐毒素 猪 呕吐，厌食，拒食，免疫抑制 玉米赤霉烯酮 猪、奶牛 （与DON几乎同时存在）异常发情、发情延迟、阴门肿大 T—2毒素 厌食、皮炎、干扰凝血 烟曲霉毒素 猪、禽 肺脏水肿，胚胎畸形，腹泻、生长受抑制 赭曲霉毒素 肾脏受损，腹泻，生殖器肿胀

12 霉菌毒素认识误区 1、原料外观很好，没有霉菌污染变化（原料的隐蔽性）； 2、养殖场没有表现霉菌毒素的症状（危害的隐蔽性）；
3、只认为发生黑变是发霉（不知道霉变也有白变，红变）； 4、只知道原料储存时发霉，不知道原料在田间已经污染霉菌。

13 饲料中霉菌毒素允许量标准 霉菌毒素种类 允许量（µg/kg） 黄曲霉毒素B1 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽饼粕≤50，豆粕≤ 30
玉米赤霉烯酮 玉米、配合饲料≤ 500 呕吐毒素 猪配合饲料≤ 1mg/kg T—2毒素 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽饼粕＜50，豆粕＜ 30 赭曲霉毒素A

14 三类被检饲料霉菌毒素污染情况 项目 能量饲料（玉米） 全价饲料 蛋白质饲料 检出率 超标率 黄曲霉毒素 83.90% 0% 100%
8.00% 烟曲霉毒素 77.30% 45.50% 91.70% 66.70% 72.70% 4.09% 赭曲霉毒素 60% 93.70% 18.70% 76.10% 41.30% T—2毒素 87.50% 97.80% 28.30% 呕吐毒素 69.20% 87.00% 47.80% 玉米赤霉烯酮 30.80% 21.40% 92.90% 35.70%

15 霉菌污染现状 ■ 玉米100%被霉菌污染，只是程度不同而已 ■ 受目前整体环境影响，已经不存在无污染的 地区
■ 传统认为北方干燥没有霉菌的概念，是完全 错误的，玉米采购标准由霉粒2%以下，放宽至5%

16 常规清除方法 1、物理脱毒： 高温、水洗、剔除、辐射等（费时、费力、费钱，不便规模操作）；
无机吸附剂：铝硅酸盐类矿物吸附剂，利用多层空间结构和表面形成的离子极性，吸附具有相同离子极性的霉菌毒素，对于没有相同极性和非极性的霉菌毒素吸附能力很差； 有机吸附剂（甘露聚糖、酵母细胞壁）吸附霉菌毒素。其对极性和非极性的霉菌毒素都有广泛的吸附作用。

17 常规清除方法 2、化学脱毒： 氯气、氨气、氢氧化钠、氢氧化钙、次 氯酸钠等（可减少少量的霉菌毒素，但会造成二次 污染）。

18 常规清除方法 3、生物脱毒： 微生物（乳酸杆菌等）、酶制剂（脂类氧 化酶、葡萄糖氧化酶等）。

19 如何保持肠道健康 如何更好的解决霉菌毒素污染？ 如何更科学的防治仔猪腹泻？

20 亿霉脱 了解一个新产品 ——亿霉脱 霉菌毒素吸附与抗腹泻双重功效

21 亿霉脱特色结构成分 ■ 结构成分一 埃洛石为含水层状硅酸盐矿物，其显微结 构为纤细型弯曲管状结构，这种管状结构对霉菌毒 素具有优异的吸附固定作用，不受霉菌毒素自身极 性影响，因而对于 ZEA等非极性的霉菌毒素具有良 好的吸收效果。

22 亿霉脱特色结构成分 ■ 结构成分二 高络合有机酸载铜蒙脱石 强大的比表面积，对具有极性的霉菌毒素 具有高效吸附及强有力的杀菌能力。

23 亿霉脱特色结构成分 ■ 结构成分三 酵母细胞壁提取物、甘露聚糖等多种有效 成分。 提升免疫，修复动物受损脏器，恢复器官 生理机能。

24 亿霉脱载体选择 ■ 蒙脱石是天然的层状硅酸盐纳米材料，每层厚度仅1 nm，颗粒细小，比表面积巨大，每立方毫米(半个米粒)能容纳三千亿个颗粒，每克粉剂就能覆盖110平米的篮球场大小的消化道表面，可加强黏膜屏障的作用；加上蒙脱石的不均匀电荷特性，基本层中带负电，层间带正电，使得蒙脱石具有强大的吸附能力。

25 亿霉脱载体选择 ■ 蒙脱石

26 生产工艺流程图 ■ 提纯 ■ 酸溶 ■ 酸洗 ■ 络合、加载

27 独特生产工艺

28 独特生产工艺 强酸洗脱蒙脱石里的阳离子加大蒙脱石的层间距离，扩大吸附空间，吸附率倍增。 强酸处理成胶浆避免机械加工对蒙脱石的破坏。
酸溶 强酸洗脱蒙脱石里的阳离子加大蒙脱石的层间距离，扩大吸附空间，吸附率倍增。 强酸处理成胶浆避免机械加工对蒙脱石的破坏。 强酸可以软化层间网状结构，形成柔韧型渔网结构，解决杂质及重金属堵塞微孔难于洗脱的技术难题。

29 独特生产工艺 用人工胃酸（复合有机酸模拟胃酸）清理假性蒙脱石，提高蒙脱石有效含量，防止假性蒙脱石在消化道中粘结食糜，影响营养吸收。
酸洗 用人工胃酸（复合有机酸模拟胃酸）清理假性蒙脱石，提高蒙脱石有效含量，防止假性蒙脱石在消化道中粘结食糜，影响营养吸收。 假性蒙脱石结构残缺或天然缺陷在消化道中无效。 有机酸清洗处理，假性蒙脱石封层洗虑，高效蒙脱石板框压滤，再加载干燥。 29

30 独特生产工艺 加载 在85度、真空度为-0.08MPa的条件下加载络合铜。真空减压情况下，层间网阔张，络合铜离子才能引入网内结合，常压后，层间网恢复，络合铜离子稳定载入，形成牢固的整体。 高压加载生态调控活性剂（天然提取香料诱食剂、益生菌、酵母细胞壁寡糖、短链脂肪酸酸奶诱食剂）。

31 亿霉脱加载工艺特点 因蒙脱石硅氧四面体和八面体组成的层结构 ，层结构之间是易于被取代的阳离子层，将多核 [Cu(AIO)n(H2O)4-n]Χ+络离子替代蒙脱石层间的Ca2+、 Na+等离子，同时Cu2+离子还可进入蒙脱石Si-O四面体 晶内孔和八面体中的空位，从而导致蒙脱石电价失衡 ，使矿物带有正电荷。而大多数细菌细胞壁表面带有 负电荷，载铜蒙脱石与细菌之间的静电引力，能使细 菌能够更有效地被大量吸附在矿物表面 。 蒙脱石、亿霉脱、大肠杆菌在pH为6时的Zeta 电位分别为-21mV、928mV、-22mV 。

32 亿霉脱的优势 ■有效的杀菌功能 ■有效的粘膜保护功能 ■强大的吸附脱霉、解毒能力
同时解决霉菌毒素污染及仔猪细菌 性腹泻，有效地保护仔猪小肠绒毛和隐窝。

33 亿霉脱的杀菌作用 ■ 实验1：大肠杆菌培养实验结果显示： 加入亿霉脱
培养液中天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶活性显著升高 。 在正常情况下,细菌胞内酶很少释放到菌体外,只有当细菌细胞膜结构发生变化,通透性明显增强时,胞内酶才能释放到菌体外。 加入亿霉脱 （终浓度2ug/ml)

34 亿霉脱对天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶的影响

35 杀菌原理 ■杀菌原理： 亿霉脱主要成分之一高络合酸洗载铜蒙脱 石带有较高的正电荷，大肠杆菌细菌表面带有负电 荷，库仑力的作用下，大肠杆菌被吸引到MMT-Cu表 面，MMT表面富集的Cu2-使细菌细胞膜通透性增加或 受损严重，酶从菌体内大量释放出来，从而导致细 菌死亡。

36 亿霉脱的粘膜保护作用 ■ 实验2： Caco-2细胞 是体外培养的肠上皮单层细胞
病原菌选用E.coli K88、S.choleraesuis

37 亿霉脱的粘膜保护作用 ①病原菌吸附实验 Caco-2细胞 裂解细胞 涂板 用Hankˊs液洗 计数 亿霉脱 DMEM 加入病原菌 加入病原菌

38 亿霉脱对病原菌吸附Caco-2细胞的影响

39 亿霉脱对病原菌吸附Caco-2细胞的影响 用 MMT-Cu 处理过的 Caco-2 细胞，使病原菌 E.coli K88和 S.choleraesuis 被的数量明显增加，与对照组相比，差异显著。 吸附的病原菌是否能够入侵细胞？

40 亿霉脱的粘膜保护作用 ②病原菌入侵实验 Caco-2细胞 裂解细胞 涂板 洗 计数 用Hankˊs液洗 亿霉脱 DMEM 庆大作用
加入病原菌 分别培养1、3、6h DMEM 加入病原菌 Caco-2细胞 分别培养1、3、6h 用Hankˊs液洗 庆大作用 裂解细胞 涂板 计数 洗

41 亿霉脱对病原菌吸附Caco-2细胞的影响 对照组病原菌入侵到 Caco-2 细胞内的数量并随时间的延长入侵数量在增加。而用亿霉脱处理过的 Caco-2 细胞，均可明显减少 E.coli K88和 S.choleraesuis 侵入到 Caco-2 细胞内的数量，与对照组相比，差异极显著。并随着作用时间的延长，可持续抑制E.coli K88、S.choleraesuis的入侵。

42 亿霉脱对病原菌吸附Caco-2细胞的影响 入侵致病菌对细胞的破坏情况？

43 亿霉脱的粘膜保护作用 ③病原菌对细胞的破坏试验 用培养基中LDH 的活性来判断细胞膜的完整性 C Caco-2细胞 Ⅰ Ⅱ
DMEM DMEM 分别培养1、3、6h C DMEM 加入病原菌 Caco-2细胞 分别培养1、3、6h Ⅰ 亿霉脱 加入病原菌 分别培养1、3、6h Ⅱ 分别在1、3、6h取培养液 检测LDH活性

44 检测1、3、6h培养液中LDH的含量 对照组为正常培养Caco-2细胞，试验组Ⅰ为致病菌感染组，试验组Ⅱ为添加亿霉脱致病菌感染组。

45 电镜扫描细胞表面 图 A 表示正常生理条件下的 Caco-2 细胞表面绒毛密集而整齐；
图 B 表示加入亿霉脱后，可见细胞表面有一层膜状物覆盖，好象与外界形成一层屏障，绒毛仍然排列整齐、致密。

46 电镜扫描细胞表面 图 C，D 可见，当E.coli K88和 S.choleraesuis 粘 附 于 Caco-2 细 胞 上时，可见绒毛萎缩而凌乱，绒毛变短，甚至细胞上绒毛已脱落，而且细胞破裂。表明 E.coli K88和 S.choleraesuis 粘附肠上皮细胞后，可破坏细胞的完整性，使细胞死亡。 由于致病菌粘附细胞后，可分泌一种不利于细胞存活的毒素从而破坏细胞膜的完整性，使细胞绒毛受损。

47 电镜扫描细胞表面 从图 E，F 可见，亿酶脱与 Caco-2 细胞共同温育后，E.coliK88和 S.choleraesuis 再粘附细胞时，可见绒毛排列依旧很整齐、致密，肠上皮细胞完好。 这充分说明亿霉脱，能阻止病原菌对消化道粘膜的侵害，维护消化道正常的生理功能。

48 粘膜保护机理 是由于亿霉脱主要成分之一是高络合酸洗 载铜蒙脱石（MMT-Cu），它能连续覆盖在肠 上皮细胞表面与糖蛋白结合，又由于它们表面 Zeta电位的不同，对病原菌具有较强的吸附作 用，可将病原菌固定在其表面，从而阻止细菌 进入到肠细胞内（ 因为不能再与肠上皮细胞上 的受体结合）。而且 MMT-Cu 中的 富集表面 的高浓度Cu2+可将病原菌杀死。

49 以上试验充分证明了亿霉脱具有吸 附、杀灭病原菌的作用，同时对肠上皮细 胞没有危害，因而可作为一种消化道粘膜 保护剂。
49

50 亿霉脱对六种细菌的最小抑菌（MIC)和杀菌浓度(MBC)
亿霉脱体外对四种病原菌及 两种肠道有益菌杀菌作用 亿霉脱对六种细菌的最小抑菌（MIC)和杀菌浓度(MBC) 大肠杆菌 沙门氏菌 产气荚膜梭菌 痢疾密螺旋体 枯草芽孢杆菌 嗜酸乳酸杆菌 MIC 75mg/L 100mg/L 200mg/L 1000mg/L MBC 150mg/L 400mg/L >1000mg/L

51 2倍MBC对六种微生物的影响

52 不杀灭有益菌群的机理 亿霉脱对大肠杆菌、沙门氏菌、C型产气荚膜梭 菌 、痢疾密螺旋体 (革兰氏阴性菌)的杀菌效果明显优 于嗜酸乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌(革兰氏阳性菌)。主 要是由于革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌的细胞壁结构 不同。 ■ 接触 在pH为6时革兰氏阴性菌的Zeta电位大于革兰氏 阴性菌，由于亿霉脱带有正电荷，因此，革兰氏阴性 菌比革兰氏阳性菌更易被吸附。

53 不杀灭有益菌群的机理 ■ 细胞壁结构 革兰氏阳性菌细胞壁所含的肽聚糖是革兰氏阴性菌 的3~20倍， 细胞壁厚度是阴性菌的4-8倍。
同时革兰氏阳性菌细胞壁表面还含有一层磷壁酸。 革兰氏阴性菌的细胞壁较革兰氏阳性菌的细胞壁薄, 对杀菌剂具有不同的敏感性。因此,革兰氏阳性菌比阴 性菌不容易被破坏杀灭。

54 亿霉脱强大的吸附能力 ■ 高效吸附： 高效络合铜蒙脱石强大的比表面积，巨大的吸 附能力。 ■ 不可逆吸附毒素：
亿霉脱化学稳定性强，与霉菌毒素结合后形成 聚合物后使之不易解吸，随肠道蠕动排出体外，不 会产生次级代谢产物；

55 亿霉脱强大的吸附能力 ■ 广谱吸附毒素能力：
络合铜蒙脱石能特异性地吸收黄曲霉毒素、赭 曲霉毒素等含有极性基团或共面苯环结构的霉菌毒 素，而埃洛石能够很好的吸附玉米赤霉烯酮等非极 性毒素。 ■ 选择性吸附： 亿霉脱有稳定的阳离子交换值，因而对饲料中 各种营养物质如矿物质、氨基酸、维生素（包括部 分B族维生素）、色素无破坏性吸附性。

56 亿霉脱生物解毒功能 ■ 生物类黄酮物质 可抑菌、消炎、解毒，尤其在毒素已被机体吸收 的状况下可入血解毒，提高机体免疫力，快速恢复 健康。
■ 酯化葡甘露聚糖 产品添加了酯化葡甘露聚糖，加强对镰刀霉菌毒 素的吸附，实现高效快速吸附。酯化处理后，葡聚 糖、甘露聚糖更稳定，吸附能力和效果大为增强。

57 亿霉脱的毒素降解功能 ■ 酶制剂分解 本品添加了多种酶制剂及生物活性成分，能够在 畜禽体内增加有益菌数，减少有害霉菌的生存空间， 同时酶制剂能有效打开双呋喃环，破坏黄曲霉素，从 而降解其毒性。

58 亿霉脱在饲料生产上的优势 耐高温、稳定性好
■ 亿霉脱在制粒、膨化具有较高的稳定性；在肠胃不同pH值环境中Cu2+具的解离率为5-10%左右。因此亿霉脱能与霉菌毒素高效结合通过肠道安全排出体外。

59 亿霉脱在生产性能上的优势 ■ 显著降低料肉比，提高动物生产性能 亿霉脱 项目 对照组 日采食量/g 562.67±2.08b
仔猪 日采食量/g 562.67±2.08b 596.93±23.18a 日增重/g 325.27±6.43 347.33±14.50 料重比 1.73±0.03 1.72±0.05 生长猪 ±54.45 ±35.92 665.23±37.32 672.43±24.11 2.72±0.07 2.70±0.09 育肥猪 ±270.78 ±141.86 823.92±232.49b 922.23±284.90a 3.74±0.06A 3.24±0.21B 全程 ±92.65 ±90.28 623.33±31.97 650.31±14.04 2.86±0.03a 2.67±0.14b 注：同一行肩标相同小写字母或不标者差异不显著（P＞0.05）；肩标不同 小写字母者差异显著（P＜0.05）；肩标不同大写字母差异极显著（P＜0.01）

60 正确的使用方法 ■ 根据目标原料、饲料的受污染程度和畜 禽出现的临床症状，合理确定添加比例： ■ 本产品具有良好的流畅性，采用一般预 混法
■ 预防用量：1～2公斤/吨，已污染的饲料 根据霉变程度轻重添加2～3公斤/吨。

61 网址：www.yirukeji.com 邮箱：yirukeji@accro.cn
外商投资批准号：商外资京字[2003]14006号 出口饲料企业检验检疫注册登记证号：1100FA014 ISO9001：2008国际质量管理体系认证：UQ131607R1 ISO14001：2004国际环境管理体系认证：04313E20709R1M ISO22000：2005HACCP国际食品安全管理体系认证：115FSMS 地址：北京市海淀区永泰园新地标 邮编：100192 电话： 传真： 网址：

62 工厂实景 ■ 亿如科技（北京）有限公司专注于饲用添加剂的研发、生产的高新企业。 工厂实景 工厂实景

63 车间设备 ■ 在产品研发中公司将动物营养，预防兽医，食品科学，生物发酵，精细化工，地质矿物学等多学科的最新研究成果，开发新产品及新工艺，应用到动物生产中。 喷雾干燥车间 精细合成车间

64 实验室 ■在产品研发中公司将动物营养，预防兽医，食品科学，生物发酵，精细化工，地质矿物学等多学科的最新研究成果，开发新产品及新工艺，应用到动物生产中。 研发中心实验室 高效液相色谱检测室

65 谢谢大家 亿如科技（北京）有限公司 地址：北京市海淀区永泰园新地标14-105 邮编：100192
ACCRO SCIENCE AND TECHNICAL（BEIJING）CO.,LTD. 地址：北京市海淀区永泰园新地标 邮编：100192 电话： 传真： 网址：