第十一章 抗生素类药物的分析.

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1 第十一章 抗生素类药物的分析

2 抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。
第一节 概述 抗生素是指在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称。 一、 抗生素药物的特点 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差

3 二、 抗生素药物的质量分析 （一）鉴别试验 官能团的显色反应 光谱法 色谱法 生物学法

4 （二）检查 影响产品稳定性的指标 结晶性 酸碱度 水分或干燥失重 控制有机和无机杂质的指标 溶液的澄清度与颜色、有关物质、残留溶剂、炽灼残渣
影响产品稳定性的指标 结晶性 酸碱度 水分或干燥失重 控制有机和无机杂质的指标 溶液的澄清度与颜色、有关物质、残留溶剂、炽灼残渣 与临床安全性密切相关的指标　　异常毒素、热源或细菌内毒素、降压物质、无菌 其他指标

5 （三）含量测定 1. 微生物检定法 在适宜条件下，根据量反应平行线原理，通过检测抗生素对微生物的抑制作用，计算抗生素活性的方法。 测定方法 浊度法 管碟法 2. 理化方法

6 3. 微生物学法与理化法的比较 微生物检定法 理化法 以抗生素对微生物的杀伤或抑制程 度为指标衡量抗生素的生物效价
根据抗生素结构特点，利用其 特有的理化性质测定其含量 已知或新发现的抗生素、精制品或 粗制品均能测定 测定化学结构已知、已提纯的 抗生素 灵敏度高、样品需用量小、反映抗 生素的医疗价值，但操作步骤多、 费时、误差大 迅速、准确、专属性高、样品 需用量小、操作简单、省时

7 4.抗生素的活性以效价单位来表示 每ml或每mg中含有某种抗生素的有效成分的多少，用单位（u）或µg 表示。 mg青霉素G钠盐定为1670单位 mg青霉素G钾盐的单位（u） =1670×356.4/372.5=1598u/mg

8 分类（按结构与性质）： β–内酰胺类、氨基糖苷类、 四环素类、大环内酯类、 氯霉素类、多肽类、苯烃胺类 林可霉素类、其他抗生素类

9 第二节 β–内酰胺类抗生素 青霉素类

10 头孢菌素类

11 青霉素 （青霉素G、苄青霉素）

12 氨苄西林 （氨苄青霉素）

13 阿莫西林 （羟氨苄青霉素）

14 普鲁卡因青霉素

15 头孢氨苄

16 头孢拉定

17 头孢羟氨苄

18 头孢噻吩钠

19 结构特点与性质 一、 酸性 ♕（一）羧基 与碱金属(Na+、K+)成盐 易溶于水 Na

20 与有机碱(普鲁卡因)成盐 难溶于水 普鲁卡因青霉素

21 旋光性 ♕（二）手性C 青霉素类 C C C6 头孢菌素类 C C7 ﹡ ﹡ ﹡ ﹡ ﹡

22 ❇（三）共轭体系 青霉素类 母核无明显UV 多数有苯环取代基 头孢菌素类 母核有共轭体系

23 青霉素钠UV7-20

24

25 ❇（四）β–内酰胺环 降解失效 青霉素类 四元环张力大 不稳定 性因素 酰胺键易水解 干燥纯净: 稳定 水溶液: 不稳定 某些氧化剂
酸、碱、青霉素酶 （某些金属离子） （温度）

26 青霉素的降解反应 例 青霉素 青霉噻唑酸 青霉酸 青霉烯酸 青霉胺 CO2 青霉醛 α–青霉噻唑酰基羟胺酸 H2O/OHˉ 青霉素酶
pH2 100℃ α–青霉噻唑酰基羟胺酸 NH2OH 青霉烯酸 pH4 青霉胺 CO2 青霉醛 HgCl2

27 (头孢噻吩钠水溶液25℃24h失活8%)

28 鉴别试验 ❇二、 色谱法 （一） 对照品对照法 1. TLC法 2. HPLC法

29 光谱法 （二） 1. UV法 样品、分解产物 头孢替唑钠 λmax = 272nm 头孢氨苄 λmax = 262nm

30 2. IR法 以阿莫西林为例 3180cm-1 N-H 1250cm-1 β–内酰胺 C-O C=O 1780cm-1
O-H 1690cm-1 仲酰胺C=O

31 （三）呈色反应 1. 羟肟酸铁反应 β-内酰胺类 NaOH • 2 HCl NOH H - b 内酰胺类 羟肟酸衍生物 Fe3+ H+ 呈色

32 H+ Fe3+/3 （红、棕、褐）

33 氨苄西林 紫红色 头孢氨苄 红褐至褐色 头孢噻吩钠 红褐色 头孢唑啉钠头孢哌酮 红棕色 普鲁卡因青霉素 紫红色

34 例：Ch.P.(2010)哌拉西林 [鉴别] 取本品10mg，加水2ml与盐 酸羟胺溶液[取34.8%盐酸羟胺溶
液1份，醋酸钠-氢氧化钠溶液1份， 乙醇4份]3ml，振摇溶解后，放置 5min，加酸性硫酸铁铵试液1ml， 摇匀，显红棕色。

35 2. 茚三酮反应 α-氨基 -氨基 茚三酮  蓝紫色

36 α-氨基、伯胺 某些羟基胺类 酮式 茚三酮 烯醇式 缩合 茚三酮 蓝紫色

37 3. 双缩脲反应 似肽键 （开环分解） - 内酰胺类 碱性酒石酸铜 紫

38 蓝紫色

39 4. 与变色酸-硫酸反应 青霉素 阿莫西林 氨苄西林 活泼“-CH2-” △（分解） 变色酸 显色

40 （缩合） 150℃

41 （缩合）

42 5. 与重氮苯磺酸反应 头孢哌酮 酚羟基 （偶合）

43 （偶合）

44

45 6. 与铜盐反应 专属反应 NaOH 橄榄绿色

46 （四）各种盐的反应 1. K+、Na+的火焰反应 焰色→鲜黄色 + 醋酸氧铀锌→↓黄 Na+ 焰色→紫色 + 0.1%四苯硼钠 + Ac→↓白 K+

47 2. 沉淀反应（青霉素盐） 遇酸→↓ 白 青霉素 青霉素钠　 青霉素钾　 + H 在过量HCl或 有机溶剂中溶解

48 3. 重氮化 - 偶合反应 芳伯氨基 重氮化-偶合反应 4. 与三硝基苯酚反应 二苄基乙二胺 △

49 三硝基苯酚 mp

50 三、特殊杂质检查 头孢哌酮钠 聚合物，有关物质 HPLC 头孢噻肟钠 聚合物 HPLC
头孢呋辛酯 有关物质和异构体 HPLC 头孢氨苄 有关物质 HPLC 青霉素钾（钠） 吸收度,聚合物 HPLC

51 （一）聚合物 二聚体的峰高 R= 单体与二聚体之间的谷高 分子排阻色谱法 凝胶色谱柱分子筛机制
色谱柱： 亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶（葡聚糖凝胶，聚丙烯酰胺凝胶） 流动相：水或缓冲溶液 流速：0.5~1.0ml/min 系统适用性试验 二聚体的峰高 R= 单体与二聚体之间的谷高

52 高分子杂质定量测定法 1.主成分自身对照法 高分子杂质含量较低的品种 2. 面积归一化法 3. 限量法 混合物中高分子物质的控制 4. 自身对照外标法 Sephadex G-10

53 （二）有关物质和异构体 色谱法 （三）吸光度 UV （四）有机溶剂 氨苄西林钠：二氯甲烷 GC （五）结晶性 偏光显微镜法 X射线粉末衍射法
（二）有关物质和异构体 色谱法 （三）吸光度 UV （四）有机溶剂 氨苄西林钠：二氯甲烷 GC 头孢哌酮钠：丙酮 GC 头孢硫脒：残留溶剂 GC 头孢他啶：吡啶 HPLC （五）结晶性 偏光显微镜法 X射线粉末衍射法

54 三、 含量测定 （一）高效液相色谱法 磺苄西林钠 微生物检定法 Ch.P HPLC （二）生物样品中β-内酰胺类抗生素的分析 HPLC

55 β-内酰胺类 （三）碘量法 1. 原理 定量过量 水解产物 （水解） 剩余

56 反应分两步进行： 1. 水解反应 (按化学计算量进行) 2. 氧化-还原反应 (无固定的量关系，受温度、PH值和时间等因素影响，应严格控制反应条件并采用标准品平行对照测定)

57 第一步 第二步

58 例 注射用普鲁卡因青霉素 含量测定 取装量差异项下的内容物，精密称 取约0.12g，置100ml量瓶中，加水使溶 解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml， 置碘瓶中，加1mol/L氢氧化钠溶液1ml 放置20分钟，再加1mol/L盐酸溶液1ml 与醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5)5ml，精密 加入碘滴定液(0.01mol/L)15ml，密塞， 摇匀，在20～25℃暗处放置20分钟，用 硫代硫酸钠滴定液（0.01mol/L）滴定，

59 至近终点时加淀粉指示液，继续滴定并 强力振摇，至蓝色消失；另精密量取供 试品溶液5ml，置碘瓶中，加醋酸-醋酸 钠缓冲液（pH4.5）5ml，精密加入碘滴 定液（0.01mol/L）15ml，密塞，摇匀， 在暗处放置20分钟，用硫代硫酸钠滴定 液（0.01mol/L）滴定，作为空白。同时 用青霉素钠对照品同法测定作对照，算 出供试品的含量。

60 空白试验 以未经水解的样品作空白测定 A. 消除样品已降解产物的干扰 B. 消除样品中其他消耗碘的杂 质的干扰 C. 消除碘挥发造成的误差

61 采用标准品平行对照测定 A. 可消除温度、pH、操作、环 境等条件的影响 B. 使本法测定结果与微生物检定 法一致

62 3. 条件 （1）弱酸性 pH4.5 碱↑ I2 → IO I- 酸↑ 普鲁卡因与碘在酸性条件 下会产生复盐沉淀 （2）温度 ～26℃ 温度＞38 ℃ 未水解的供试品亦消耗碘

63 （3）水解时间 以水解20分钟后的耗碘量最大 （4）反应时间 反应20分钟后，耗碘量随时间的 变化较小，可减小含量测定的误 差。

64 4. 特点 （1）灵敏度高 样品 : 碘 = 1 : 4 （2）反应条件、实验操作要求高 V对、V对空 V样、V样空 1份含量
4I2→8I- 样品 : 碘 = 1 : 4 （2）反应条件、实验操作要求高 V对、V对空 V样、V样空 1份含量 加试剂次序、反应时间、滴定速度相同

65 （四）汞量法 青霉素族 1. 原理 青霉素分子不与汞盐反应，而其碱性水解产物如青霉噻唑酸在一定条件下能与二价过渡金属离子如Cu2+、Hg2+ 形成稳定的配位化合物。采用两次滴定法，即水解后滴定与直接滴定，然后分别计算含量，两次测定所得含量差即为样品的含量。

66 2. 方法 醋酸盐缓冲液 pH4.6 滴定 水解 样 品 pH4.6 滴定 以未经水解的样品作空白测定

67 例 青霉素钠 含量测定 取本品约50mg，精密称定，加水 5ml溶解后，加1mol/L氢氧化钠溶液5ml ，摇匀，放置15分钟，加1mol/L硝酸溶 液5ml，醋酸盐缓冲液(pH4.6)20ml及水 20ml，摇匀，照电位滴定法(附录Ⅶ A), 用铂电极为指示电极，汞-硫酸亚汞电极 为参比电极，在35～40℃，用硝酸汞滴 定液(0.02mol/L)缓慢滴定，

68 （控制滴定过程约为15分钟），不计第 一个等当点，计算第二个等当点时消耗 滴定液的量。每1ml硝酸汞滴定液(0.02 mol/L)相当于7.128mg的总青霉素(按 C16H17N2NaO4S计算)。 另取本品约0.5g，精密称定，加水 与上述醋酸盐缓冲液各25ml，振摇使完 全溶解，在室温下，立即用硝酸汞滴定 液(0.02mol/L)滴定，终点判断方法同上.

69 每1ml硝酸汞滴定液（0.02mol/L）相当 于7.128mg的降解物（按C16H17N2NaO4S 计算）。 总青霉素的百分含量与降解物的百 分含量之差值即为青霉素的含量。

70 讨论 3. （1）以第二次滴定突跃为终点 电位法指示终点 （2）反应摩尔比 1 : 1 （3）空白试验 消除已降解产物干扰
（2）反应摩尔比 : 1 （3）空白试验 消除已降解产物干扰 （4）优点 不需标准品

71 （五）酸碱滴定法 β-内酰胺类 1. 原理 △ （钠盐）

72 △

73 中和 2. 方法 中和 △

74 苯唑西林钠 含量测定 例 取本品约0.5g，精密称定，加新沸 过的并用0.01mol/L氢氧化钠溶液中和至 酚酞指示液刚显红色的水20ml，使溶解, 再用0.01mol/L氢氧化钠溶液中和后，精 密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)25ml， 摇匀，置水浴中加热20分钟，注意避免 吸收空气中的二氧化碳，冷却后，加酚 酞指示液1～2滴，用盐酸滴定液

75 （0.1mol/L）滴定，并将滴定结果用空 白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液 (0.1mol/L)相当于40.14mgC19H19N3O5S。

76 讨论 3. （1）水解前先中和溶剂和样品 （2）加热时避免吸收CO2 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速
△ 不能使酚酞变红 （3）空白试验校正(消除Na2CO3干扰) （4）特点 简便快速 不适用于有残留酯的产品

77 （六）可见-紫外分光光度法 酸水解法（铜盐法）
1. 酸水解法（铜盐法） 青霉素族 JP （1）原理 （水解） 稳定剂

78 青霉烯酸

79 （2）方法 标准品对照法 △ （3）特点 实验条件随各药物稳定性不同而定

80 2. 硫醇汞盐法 青霉素族 （1）原理 （咪唑）

81 咪唑

82 （2）方法 对照品法 pH 9 计算

83 例 氨苄西林钠 含量测定 取本品约60mg 置100ml量瓶中，加 水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取 5ml，置另一100ml量瓶中，加水稀释至 刻度，摇匀，再精密量取5ml，置25ml 量瓶中，加硼酸缓冲液2.5ml与醋酐的乙 腈溶液（1→50）0.25ml，放置5min后， 加咪唑溶液至刻度，摇匀，置60℃水浴

84 中，加热30min，取出冷却，照分光光度法（附录Ⅳ A ），在325nm的波长处测定吸收度；另取氨苄西林三水合物标准品，按同法测定，计算，即得。

85 （3）讨论 a. 咪唑催化的水解产率高，硫 醇汞盐稳定（≥3h） b. 侧链有-NH2时，需加醋酐先 将其乙酰化后才能发生上述 反应

86 pH9

87 （4）特点 A. 简便快速 B. 用标准品对照，重现性良 好，RSD≤1%

88 3. 羟肟酸比色法 USP JP β-内酰胺类 NaOH Fe3+/3 H+ 红色

89 第三节 氨基糖苷类抗生素 链霉素 奈替米星 新霉素 卡那霉素 庆大霉素 巴龙霉素

90 链霉素 链霉胍 + 链霉糖 + N-甲基-L-葡萄糖胺 苷元 链霉双糖胺 糖

91 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺

92 链霉胍 链霉糖 N-甲基-L- 葡萄糖胺

93 庆大霉素 绛红糖胺 + 脱氧链霉胺 加洛糖胺 苷元 糖 糖

94 加洛糖胺 绛红糖胺 2-脱氧链霉胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺 紫素胺

95 绛红糖胺 紫素胺 2-脱氧链霉胺 加洛糖胺 N-甲基-3- 去氧-4-甲 基戊糖胺

96 庆大霉素C复合物 庆大霉素C R=H R1、R2=CH3 庆大霉素C R=R2=H R1=CH3 庆大霉素C1a R、R1、R2=H 庆大霉素C2a R=CH R1= R2=H 　庆大霉素C2b R=R1=H R2=CH3

97 巴龙霉素 D-葡萄糖胺+脱氧链霉胺+D-核糖+巴龙霉糖 巴龙胺 巴龙二糖胺 苷元 糖

98 脱氧链霉胺 D-葡萄糖胺 巴龙霉糖 D-核糖

99 一、 结构与性质 （一） 碱性 多与硫酸成盐 链霉素 个 庆大霉素 5个 碱性中心 水溶性 溶解性 （二）

100 UV （三） 稳定性 （四） 链霉素 pH5～7.5 庆大霉素 pH2～12 稳定 旋光性 （五）

101 二、 鉴别 茚三酮反应 （一） 羟基胺 α-氨基酸 △

102 Molisch 试验 （二） 糠醛 H+ 氨基糖苷类 羟甲基糠醛 -萘酚 蒽酮 紫色

103 红紫色

104 N-甲基葡萄糖胺反应 （三） （Elson-Morgan反应） 乙酰丙酮 OH- 吡咯衍生物 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色

105 (缩合)

106 对二甲氨基苯甲醛 H+ 红色

107 麦芽酚反应 （四） 链霉糖特有反应 H+ 分子重排

108 麦芽酚 紫红

109 坂口反应 （五） 链霉胍特有反应 （或α-萘酚） α -萘酚 8-羟基喹啉

110

111 （四） 反应 H+ UV法 （五） 庆大霉素无UV吸收 IR法 （六） 色谱法 （七） TCL HPLC

112 三、 检查 链霉素杂质 （一） 链霉素B（甘露糖链霉素） 1. 来源 反应中间体 方法 TLC中的对照品法 （BP）

113 ChP USP BP JP 庆大霉素C组分的测定 （二） 发酵菌种不同 工艺差别 C组分比例 不一致 对微生物的活性无明显差异 毒副作用和耐药性不同 规定控制各组分的相对百分含量

114 1. USP(29)衍生化原理 λmax = 330nm

115 1-烷基硫代-2-烷基 异吲哚衍生物

116 方法 RP－HPLC 计算 峰面积归一化法 规定 C ~50% C1a ~35% C2a +C ~55%

117

118 讨论 （1）柱效以C2峰计算，n不低于2000 （2）流动相极性 强 出峰快， C1含量偏高 弱 慢
弱 慢 C2峰保留时间控制在20~30分钟较适宜，检测器灵敏度应使标准品溶液中C1组分峰高为检测器满量程的75% （3）衍生化试剂 避光保存三天 （4） 离子对试剂浓度 C组分的容量因子k´值增加，但离子对衍生化试剂的保留值影响不大，当C1组分的k´值增加时，衍生化试剂和C1组分间的分离度增大，当离子对试剂浓度为零时，C组分吸附在色谱柱上。

119 2. Ch.P.(2010)测定庆大霉素C组分 色谱条件与系统适用性试验
填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶 流动相：0.2mol/L三氟醋酸-甲醇（98：2） 检测器：蒸发光散射检测器（漂移管温度110℃，载气流量为每分钟2.8L） 进样量：20μl，记录色谱图，C组分的出峰顺序从第二个主峰计，依次为庆大霉素C1a、C2、小诺霉素、C2a、C1，C2、小诺霉素和C2a峰之间的分离度应符合要求，连续进样的小诺霉素峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。 规定 C ~50% C1a ~40% C2a +C ~50%

120 3. BP(2005) 电化学检测器 规定 C1 20~40% C1a 10~30% C2a +C2 40~60%
填充剂：苯乙烯-二乙烯基苯共聚物 流动相：60g无水硫酸钠，1.75g辛烷磺酸钠，8mlTHF，50ml0.2mol/L的磷酸二氢钾 检测器：脉冲安培检测器 进样量：20μl，记录色谱图时间，庆大霉素C1 保留时间的1.2倍 系统适用性试验： 标准溶液峰-谷比最小2.0 规定 C ~40% C1a ~30% C2a +C ~60%

121 （三）硫酸奈替米星中有关物质的检查 西索米星
（三）硫酸奈替米星中有关物质的检查 西索米星 （四）硫酸盐测定 EDTA络合法

122 三、 含量测定 硫酸链霉素 硫酸庆大霉素 微生物检定法 本法系利用抗生素在琼脂培养 基内的扩散作用量反应平行线原理
的设计，比较标准品与供试品两者 对接种的试验菌产生抑菌圈的大小 ，以测定供试品效价的一种方法。

123 HPLC USP 离子交换电化学检测法 硫酸卡那霉素 硫酸阿米卡星 硫酸链霉素 离子对色谱法 奈替米星 BP 衍生化法 阿米卡星
离子对色谱法 奈替米星 BP 衍生化法 阿米卡星 脉冲安培检测法 妥布霉素 Ch.P 蒸发光散射法 硫酸卡那霉素 硫酸依替米星 阿米卡星

124 四、血清中庆大霉素的HPLC法 血浆样品的预处理 离子对色谱法的目的： 除去氨基酸、肽、胺的干扰 选用OPA为荧光衍生化试剂
采用柱后衍生化法

125 第四节 四环素类抗生素 C B A D

126 7 8 6 5 4 3 2 11 12 1 9 10

127 四环素（TC）tetracycline

128 金霉素 (CTC) chlortetracycline
氯四环素

129 土霉素 (OTC) oxytetracycline
氧四环素

130 多西环素 (DOTC) doxycycline
脱氧土霉素

131 美他环素（METC） metacycline

132

133 一、 结构与性质 两性 （一） 酚羟基、烯醇型羟基 弱酸性 二甲胺基 弱碱性 1. 与酸、碱均能成盐 2. 强酸或强碱中溶解度↑

134 引湿性 （二） 结晶性 旋光性 （三） UV和荧光 （四） 土霉素 酸性 绿色 碱性 绿色 加热 蓝色 金霉素 碱 蓝色 四环素 碱 黄色

135 与金属离子络合 （五） 与金属离子生成有色配位化合物 Ca2+ Mg2+ Fe3+ Al3+

136 不稳定性 （六） 1. 差向异构化 淡黄→黑 蓝色荧光

137 差向四环素

138 （土霉素、多西环素不易差向异构化）

139 2. 降解反应 （1）酸性下降解 λmax = 445nm λmax = 435nm 橙黄色

140 脱水四环素

141 ETC ～ TC ＜ ＜ ATC EATC ～

142 （2）碱性下降解 （荧光）

143 二、 鉴别试验 HPLC法 1. TLC法 2. 正相分配薄层 色谱 EDTA 克服痕量金属造成的 拖尾现象 IR法 3.

144 二、 鉴别试验 盐酸美他环素 UV法 4. 1mol/L盐酸-甲醇（1→100） 0.01mg/ml A ~0.33

145 二、 鉴别试验 H2SO4反应 5.

146 二、 鉴别试验 FeCl3反应 6.

147 二、 鉴别试验 荧光法 7. UV 加热后变为蓝色 绿色荧光 H+ UV

148 三、 检查 盐酸四环素 有关物质 （一） 标准品对照法 · 4-差向四环素（ETC） · 脱水四环素（ATC） · 差向脱水四环素（EATC） · 盐酸金霉素（CTC） TLC法（1995版） HPLC法（2010版）

149 吸收度 （二） 盐酸四环素 mg/ml 530nm A不得过0.12 残留有机溶剂 GC （三）

150 四、 含量测定 Ch.P.、USP HPLC法（外标法）

151 第五节 抗生素类药物中高分子 杂质的检查 一、抗生素类药物中高分子聚合物的定义、来源与分类 1.定义 分子量大于药物本身的杂质总称。

152 2. 来源与分类 蛋白、多肽、多糖或抗生素与蛋白、多肽、多糖的结合物。主要来自于发酵工艺，致敏，如青霉噻唑蛋白、青霉噻唑多肽。 药物的自身聚合物，来自于生产、贮存过程。可引发过敏。 外源性杂质 内源性杂质

153 二、高分子杂质的基本结构与特点 (一)杂质的基本结构 青霉素族
（1）青霉噻唑多肽 内酰胺环和多肽上的伯氨基缩合。 反应速度与样品含水量及贮存温度有关

154

155 二、高分子杂质的基本结构与特点 (一)杂质的基本结构 青霉素族 （2）青霉素聚合物 反应方式 母核参与反应
反应方式 母核参与反应 侧链参与反应 反应速度 固体 样品水分 溶液 酸碱度

156

157 二、高分子杂质的基本结构与特点 (一)杂质的基本结构 2. 头孢菌素族 反应类型 母核N型聚合反应 侧链L型聚合反应

158 二、高分子杂质的基本结构与特点 (二)高分子杂质的特点 生产工艺中产生杂质 降解作用 以异构体存在的样品，同聚和异聚反应同时发生
高分子杂质种类和数量与生产工艺密切相关

159

160 三.高分子杂质的控制方法 1. 凝胶色谱法测定高分子杂质原理
凝胶色谱的分子筛作用 Sephadex G 高分子杂质的控制方法---自身对照外标法 原理：测定在Kav=0处 药物缔合物的峰响应 指标 样品中高分子杂质的响应指标 按外标法计算，得样品中高分子杂质 相当于药物本身的相对含量。

161 三.高分子杂质的控制方法 缔合物形成条件 纯水环境下缔合
三.高分子杂质的控制方法 缔合物形成条件 纯水环境下缔合 表观分子量增大 色谱峰拖尾 葡萄糖溶液或甘氨酸溶液

162 3. 高分子杂质的分析方法 简单测定系统：葡聚糖凝胶G-10（40～ 120μm）柱. HPLC系统:葡聚糖凝胶G-10柱.
符合条件葡聚糖凝胶G-10 : 蓝色葡聚糖n〉2500，拖尾因子在0.75~1.5；RSD<5% 返 回

163 四、 高分子杂质控制中存在的问题和注意事项
从产品的制备工艺和分子结构特点分析可能产生的高分子杂质，影响因素，用以指导制备工艺、贮藏条件、质量控制 检查方法，重点考察系统适用性，并要进行方法验证 对照品的制备 返 回

164 第十一章 复习内容 1. 熟悉抗生素类药物分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物 的分析现状，熟悉生物学法与物理
第十一章 复习内容 1. 熟悉抗生素类药物分析的特点及其 常规检验项目。了解抗生素类药物 的分析现状，熟悉生物学法与物理 化学法测定效价的原理及优缺点。 2. 掌握β－内酰胺类抗生素的结构、 性质、鉴别及含量测定。

165 3. 掌握氨基糖苷类抗生素的结构、性 质及鉴别，了解其检查及含量测定
4. 掌握四环素类抗生素的结构及性质，了解其鉴别、检查及含量测定 5. 了解抗生素类药物的质量考察方法

166 下列哪个药物会发生羟肟酸铁反应 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 红霉素 D. 链霉素 E. 维生素C

167 中国药典(2010年版)测定头 孢菌素类药物的含量时，多数采用的方法是
A. 微生物法 B. 碘量法 C. 汞量法 D. 正相高效液相色谱法 E. 反相高效液相色谱法

168 属于-内酰胺类的抗生素药物有 A. 青霉素 B. 红霉素 C. 头孢菌素 D. 庆大霉素 E. 四环素

169 能和茚三酮发生呈色反应的物质有 A．链霉素 B．庆大霉素 C．土霉素 D．氨基酸 E．苯巴比妥

170 青霉素类药物可用下面哪些方法测定 A. 三氯化铁比色法 B. 汞量法 C. 碘量法 D. 硫醇汞盐法 E. 酸性染料比色法

171 能发生重氮化一偶合反应的抗生素类 药物是 A. 青霉素 B. 庆大霉素 C. 苄星青霉素 D. 盐酸四环素 E. 普鲁卡因青霉素

172 四环素在酸性条件下的降解产物是 A. 差向四环素 B. 脱水四环素 C. 异四环素 D. 去甲四环素 E. 去甲氧四环素

173 以下反应可适用的药物 A. 青霉素 B. 链霉素 C. 两者均能 D. 两者均不能 Kober反应 羟肟酸铁反应 坂口反应 N—甲基葡萄糖胺反应 在酸性溶液中水解 D A B B C

174 可以鉴别的药物是 A. 链霉素 B. 庆大霉素 C. 两者均可 D. 两者均不可 用Kober反应 用坂口反应 用麦芽酚反应 用三氯化铁反应 用茚三酮反应 D A A D C

175 [B型题] A. 茚三酮反应 B. 麦芽酚反应 C. 坂口反应 D. FeC13反应 E. 羟肟酸铁反应 头孢唑林钠 金霉素 链霉素
庆大霉素 青霉素 [B型题] E D ABC A E

176 A.焰色反应 B.硫色素反应 C.硝酸反应 D. 三氯化锑反应 E. 麦芽酚和坂口反应 1.青霉素钠 2. 硫酸链霉素 3. 维生素B1

177 [X型题] 1. 用汞量法测定的药物有 A. 青霉素钠 B. 青霉素V钾 C. 维生素C D. 青霉素V钾片 E. 维生素C注射液

178 2. 可用微生物法测定含量的药物有 A．硫酸链霉素 B. 硫酸庆大霉素 C. 罗红霉素 D. 青霉素钠 E. 青霉素V钾

179 （ ）青霉素分子能与碘定量反应，因此可以根据消耗的碘量计算青霉素的含量。
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