厦门为正生物科技有限公司 ------------钙卫蛋白检测及应用.

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1 厦门为正生物科技有限公司 钙卫蛋白检测及应用

2 钙卫蛋白的诊断价值 www.wizbiotech.com 肠道炎症的一种标志物；钙卫蛋白浓度的正常化是炎性肠病 完全痊愈的一项重要指标。
作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠病和癌症的患者的重 要指标； 评估和监测炎症性肠病的活动性，便钙卫蛋白对活动期CD敏 感,且与UC的内镜下诊断和组织学诊断吻合性较好； 便钙卫蛋白与溃疡性结肠炎(UC)内镜分级标准具有较好的相 关性,可客观反映UC的炎症活动情况,比血清学指标ESR和CRP 更敏感和特异；

3 钙卫蛋白的诊断价值 www.wizbiotech.com
作为标志物预测溃疡性结肠炎(UC)与克罗恩病(CD)次年复发 的敏感性分别为89%和87%;特异性分别为 82%和43%。 鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征(IBS)以及的一种敏感性 及特异性均较好的生物标志物； 作为一个非危险性和非侵害性的客观而敏感的肠炎诊断方法， 便钙卫蛋白在区别小儿功能性腹痛与炎性肠病（IBD）、鉴定 炎性活动性和在鉴定和评估小儿炎性肠病的治疗措施中尤其 突显了其临床应用价值。 方便无创的检查方法,可以弥补内镜检查痛苦大、价格高、不 宜反复检查的不足。

4 临床应用的确定 www.wizbiotech.com
2005年3月14-17日在伯明翰召开的英国肠胃病学学会（BSG） 年会，专题讨论了炎性肠病（IBD）-钙卫蛋白-肠激惹综合征 （IBS），将钙卫蛋白作为一个新的有用的诊断参考标志，用 于： 区别IBD和IBS 评估IBD炎性活动性 评估IBD黏膜治愈情况

5 粪钙卫蛋白作为儿童肠炎的一个标志物 粪钙卫蛋白正常化可作为一项病人炎性肠病黏膜治愈的预测 和标志指标 Test的临床应用

6 儿童肠炎的一个标志物 www.wizbiotech.com
Test在区别小儿功能性腹痛与IBD方面和鉴定小儿炎性肠病活 动性与评估小儿炎性肠病的治疗措施中很有意义，因为该实 验操作简单、无创伤，可以避免使用许多内窥镜。 尤其是对于儿童在使用内窥镜时一般都需要麻醉，这个实验 检测方法显得更具有特殊意义。 便钙卫蛋白对小儿炎性肠病的诊断结果与用于结肠和小肠炎 性疾病最好的侵入性诊断技术的结果高度相关。

7 炎性肠病黏膜治愈的预测和标志指标 www.wizbiotech.com
Roseth AG等人研究发现粪钙卫蛋白正常化可作为一项炎性肠 病病人黏膜治愈的预测指标。 Arnott IDR等综合近年来的研究认为：临床缓解不能作为克 罗恩氏病（Crohn‘s disease，节段性回肠炎）最佳的治疗 目标，因为现有的抗炎治疗常常留有低级的黏膜炎性，并有 复发的可能。 粪钙卫蛋白作为黏膜炎的指标，其浓度的正常化可作为炎性 肠病治愈和黏膜炎痊愈的更严格的鉴定指标。 Gaya DR et al等认为粪钙卫蛋白给评估克罗恩氏病活动性带 来了光明的前途。

8 Test的临床应用 www.wizbiotech.com
Fagerhol MK，Bjarnason I，Aadland E和TibbleJA等临床研 究证实便钙卫蛋白的水平反应IBD疾病的活动性， Test可以 用于鉴定IBD的治疗效应和检测复发，并证实该检测试剂盒可 用作目前临床肠疾病常用的红细胞沉降率(ESR)实验的筛选实 验，筛选出需进一步检查的病人，避免内窥镜等昂贵的并有 侵入性的检查措施。 Bjarnason I等临床研究证实该试剂盒可作为腹泻或腹部不适 的一项新的诊断工具，在区别克罗恩氏病和肠激惹综合征的 敏感性和特异性分别是100%和97%。 Aadland E等研究证实该试剂盒检测胃和结肠直肠癌的敏感性 分别是100%和90%，即比便潜血实验的敏感性高很多。 近年来，越来越多的临床医学家研究表明了便钙卫蛋白在炎 性肠病中的鉴别与诊断价值，很多文章也见诸相关国际期刊。

9 国外相关论述 www.wizbiotech.com
美国梅奥医院Pardi等的研究显示,便钙卫蛋白 (calprotectin)是鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征(IBS) 的一种敏感性及特异性均较好的生物标志物。(Gut 2005,54∶321) 多种实验室生物标志物被用于诊断IBD,并作为评价其活动度 和严重度的指标,亦可预测缓解期患者的复发危险。如果一个 标志物能可靠地把活动期IBD与其他炎症或非炎症引起的症状 区分开,或能把克罗恩病(CD)与溃疡性结肠炎(UC)区分开,那 么它就可以用于指导治疗。此外,简单、廉价、具有敏感性和 特异性好的标志物,可有助于在临床上和试验中监测灵敏度。

10 国外相关论述 www.wizbiotech.com
Costa及其同事研究了便钙卫蛋白作为标志物在预测UC和CD复 发中的作用。钙卫蛋白可代表50%~60%的嗜中性粒细胞溶质蛋 白,排出体外后可在粪便中保持稳定数天,且对其进行化验相 对简单。 Costa等对38例处于缓解期的CD患者和41例UC患者(缓解期平 均5个月)进行研究。结果显示,基线便钙卫蛋白水平高于150 μg/g,对预测次年UC和CD病情复发的敏感性分别为89%和87%; 特异性分别为82%和43%。

11 以往的研究已显示,便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内 镜下诊断和组织学诊断吻合性较好。 该研究结果也是对诊断IBD生物标志物的补充。
国外研究结果总结 以往的研究已显示,便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内 镜下诊断和组织学诊断吻合性较好。 该研究结果也是对诊断IBD生物标志物的补充。

12 国内研究进展 www.wizbiotech.com
北京大学第三医院消化科刘文斌，吕愈敏，杨雪玲等评估了粪便钙卫蛋白测定作 为一种非侵入性方法判断溃疡性结肠炎(UC)活动性的价值,并与目前临床最常用 的客观指标红细胞沉降率(ESR)和C-反应蛋白(CRP)进行比较，同时检查血红蛋白、 白蛋白、ESR和CRP,记录患者1周内的临床表现。疾病活动性根据内镜和组织学标 准判断。 取结肠镜正常的61例门诊患者粪便样本作为对照.结果活动期UC组粪便钙卫蛋白 水平(515μg/g)显著高于缓解期(7.5 μg/g,P＜0.01)和正常对照(5.7 μg/g,n=61,P＜0.01),后两者之间差异无统计学意义(P＞0.05);缓解期与活动期 各级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)差异有统计学意义(P＜0.01);粪便钙卫蛋白水平与活动期UC 内镜分级显著相关(r=0.876,P＜0.01),CRP和ESR与内镜分级的相关系数分别为 r=0.725(P＜0.01)和r=0.302(P＜0.01),低于粪便钙卫蛋白。 结论粪便钙卫蛋白与UC内镜分级标准具有较好的相关性,可客观反映UC的炎症活 动情况,比血清学指标ESR和CRP更敏感和特异;而且是一种方便无创的检查方法, 可以弥补内镜检查痛苦大价格高、不宜反复检查的不足.具有临床推广价值。

13 国际上应用现状 www.wizbiotech.com
便钙卫蛋白对炎性肠病的发展、治疗效应、痊愈的鉴定和诊 断价值已经越来越受到医学家们的关注。 目前，美国、英国、加拿大、法国、德国、瑞士等二十多个 国家已将便钙卫蛋白作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠 病和癌症的患者的重要指标、炎性肠病活动性、痊愈的重要 标志，广泛应用于临床。

14 钙卫蛋白快速检测卡 www.wizbiotech.com
钙卫蛋白快速检测卡是一种用于快速检测粪便中钙卫蛋白的 半定量免疫层析方法。检测粪便中的钙卫蛋白可区分不同的 肠内器官疾病 （如慢性炎症疾病、传染性疾病、息肉、结肠 癌）和肠内功能性疾病（如肠易激综合征）。 检测钙卫蛋白也是疾病活性监测（如M.Crohn或息肉切除术 后）、复发的早期检测和治疗疗效监测的理想标志物。 使用三种检测线能使内科医生区别钙卫蛋白阳性的不同程度。

15 检测技术背景 www.wizbiotech.com
钙卫蛋白(MRP 8/14) 是一个由两个钙结合蛋白组成的异聚体 (MRP8 and MRP 14)出现在嗜中性细胞的细胞质，并通过单 核细胞膜上表达。 它由在嗜中性粒细胞中近60%可溶胞质蛋白组成并且在嗜中性 粒细胞中扮演一个中心防卫的角色。 在嗜中性粒细胞激活或单核的内皮粘附之上，钙卫细胞被释 放并且能在血清、体液或粪便作为潜在有用的临床炎症的标 志物进行检测。 这个急性时相反应蛋白在粪便显示出很好的稳定期（室温下 稳定1个星期）并且已经确定为炎症性肠病的标志物(IBD)。 它能可靠分辨出肠内器宫疾病（如慢性炎症疾病、传染性疾 病、息肉、结肠癌）和肠内功能性疾病（如肠易激综合征）。

16 采用胶体金免疫层析法，通过包被3条不同浓度的抗体线，根 据样品与不同浓度的检测线结合，可实现半定量检测。
检测原理 采用胶体金免疫层析法，通过包被3条不同浓度的抗体线，根 据样品与不同浓度的检测线结合，可实现半定量检测。

17 检测性能 www.wizbiotech.com 钙卫蛋白是监测疾病活性监测（如M.Crohn或息肉切除术后） 和复发的早期检测的理想标志物。
它在检测结肠直肠癌(CC)和息肉显示出高的灵敏度(CRC大肠 癌：灵敏度100%，息肉：灵敏度88%)。 钙卫蛋白可进一步适用于鉴别器官的腹泻和功能性腹泻。

18 试剂盒的组成 试剂盒组成：由检测卡、样品稀释液 组成

19 储存条件和样本类型 试剂储存：2-30℃ 检测使用标本：粪便

20 挑取粪便标本 用缓冲液稀释标本并混匀 吸取稀释后样品滴加入检测窗 10分钟后观察结果
操作步骤 挑取粪便标本 用缓冲液稀释标本并混匀 吸取稀释后样品滴加入检测窗 10分钟后观察结果

21 结果观察 www.wizbiotech.com 阴性：只在对照质控区（R和C）位置出现两条红色条带。在 检测区（T）内无红色条带出现。
阴性结果表明：样本中的钙卫蛋白含量低于15μg/g，提示样 本中的钙卫蛋白处在正常水平。

22 结果观察 www.wizbiotech.com
阳性：对照质控区（R和C）和检测区（T）位置都出现红色条 带。其中质控区（C）条带比对照区（R）条带颜色深。 （1）当样本中钙卫蛋白浓度大于15μg/g，且小于60μg/g时 ，检测区（T）出现一条红色条带，且检测区（T）比对照区 （R）的显色强度弱；提示样本中的钙卫蛋白处在正常水平， 但存在肠易激综合症风险。 （2）当样本中钙卫蛋白浓度等于60μg/g时，检测区（T）与 对照区（R）的显色强度一致； （3）当样本中钙卫蛋白浓度大于60μg/g，检测区（T）的显 色强度比对照区（R）深；提示存在肠炎疾病风险。

23 结果观察 www.wizbiotech.com 无效：对照质控区（R和C）位置任何一条没有出现红色条带 。
无效结果表明：可能原因是不正确的操作过程或试剂已变质 损坏。对无效结果应重新试验，重新试验时应严格按照说明 书操作。如果问题仍然存在，应立即停止使用此批号产品， 并与当地供应商联系。

24 产品优势 www.wizbiotech.com 采用胶体金免疫层析法，操作简便、快速 有三条检测线，可实现半定量检测
使用粪便检测，标本无需特殊处理 作为溃疡性结肠炎UC的重要标志物，其稳定性优于其他粪便 标志物，检测更有意义 高灵敏度、高特异性

25 谢谢观看！ 欢迎您的加入