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流 感 病 毒 鸡 胚 培 养 法 福建省疾病预防控制中心 杨式芹.

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1 流 感 病 毒 鸡 胚 培 养 法 福建省疾病预防控制中心 杨式芹

2 一、概况 1911年Rous和Murphy首先应用鸡胚培养研究肉瘤病毒(Rous肉瘤)的繁殖。
1938年Goodpasture和Burnet等应用鸡胚繁殖病毒、Cox应用卵黄囊培养立克次氏体。

3 鸡胚培养法的优点: 1. 它的组织分化程度低,可选择适当途径接种,病毒易复制,感染病毒的膜和液体含大量病毒。
2. 是个整体,有神经血管的分布及脏器的构造。 3. 来源充足,操作简单,通常是无菌的,对接种的病毒不产生抗体。

4 鸡胚培养法的缺点: 1. 一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征。 2. 卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。
3. 某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传递到鸡胚。 4. 通常鸡胚常常含有白血病病毒。 5. 在鸡食物中加入抗菌素,母鸡吃后会传递给鸡胚,鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵抗。

5 二、鸡胚的结构与生理 鸡胚是由三个胚层发育起来的,即外胚层,中胚层和内胚层,它们构成胚胎的组织与器官。 (约10日龄鸡胚的结构见图)

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7 三、材料 (一)7~11日龄鸡胚 (二)孵卵箱 (三)检卵灯、开卵钻和卵盘 (四)其它

8 四、接种技术 (一)活胚检查 1.血管:活胚可见清晰的血管,有时可见血管搏动,死胚血管模糊成淤血带或淤血块。
2.胎动:活胚可见明显的自然运动,尤其在转动胚胎时,死胚见不到任何胎动,胚胎发红像出血样,有的呈现黑块。 3.血管网是否丰满:发育好的鸡胚可见密布丰满的血管网,也就是绒毛尿囊膜,死胚则见不到这一现象。

9 (二)接种途径 1.尿囊腔接种:该途径一般用于流感、新城鸡瘟病毒和腮腺炎的适应和传代。 2.羊膜腔接种:这途径主要用于临床材料(如患者的鼻洗液及咽漱液)分离病毒。 3.卵黄囊接种:该接种途径主要用于抗流感病毒药物实验。 4.绒毛尿囊膜—壳块培养法:该法可用于流感病毒滴定、中和试验和药物实验。

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11 五、注意事项 鸡胚为一活的有机体,因此要严格无菌操作,同时动作要仔细,以免造成物理死亡。接种后24小时内死亡应不计结果。

12 Thank you !


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