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Original Power Point Created by Zhong-liang Jiang
Animal Reproduction 主讲教师: 李青旺 江中良 田秀娥 吴继东 Original Power Point Created by Zhong-liang Jiang Animal Reproduction Group , College of Animal Science and Technology, Northwest A & F University February 2007 动物繁殖学 发情控制
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第十章 发情控制 发情是母畜繁殖过程中的一个重要环节,如果能够通过人为的方法改变母畜的发情活动,是提高繁殖率的一个理想途径。发情控制技术包括诱导发情、同期发情和超数排卵等。 动物繁殖学 发情控制
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第一节 诱导发情 利用外源激素如促性腺激素、溶解黄体类激素和某些生理活性物质(如初乳)以及环境条件的刺激,促使乏情母畜卵巢从相对静止状态转变为机能性活跃状态,以恢复母畜正常发情和排卵的技术称为诱导发情(induced estrus)。利用诱导发情技术可以控制母畜发情时间、缩短繁殖周期、增加胎次和产仔数,使其一生中繁殖较多后代,从而提高其繁殖力。 动物繁殖学 发情控制 第一节 诱导发情 利用外源激素如促性腺激素、溶解黄体类激素和某些生理活性物质(如初乳)以及环境条件的刺激,促使乏情母畜卵巢从相对静止状态转变为机能性活跃状态,以恢复母畜正常发情和排卵的技术称为诱导发情(inducedestrus)。利用诱导发情技术可以控制母畜发情时间、缩短繁殖周期、增加胎次和产仔数,使其一生中繁殖较多后代,从而提高其繁殖力。 一些母畜如马、羊因季节因素造成在一定季节内不出现发情,也有一些母畜如猪和黄牛、水牛则是由于哺乳的原因造成在一段时期内不出现发情,这些母畜的不发情均属于生理性乏情。在此期间,垂体的FSH和LH分泌量不足以维持卵巢上的卵泡发育和促使排卵,因而卵巢上既无卵泡发育,也无黄体存在。如果卵巢上的周期黄体长期不消退,则称为持久黄体,持久黄体的存在抑制了母畜的正常发情,这种情况则属于病理性乏情。生理性乏情和病理性乏情在内分泌机理上是不同的,我们可以根据母畜乏情的原因不同采取相应的诱导发情处理办法。
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对这种不发情,可使用前列腺素等药物溶解持久黄体,使孕激素的分泌停止,以促使卵泡发育。
一、季节性乏情 (一)生殖激素处理 (二)改变光照 (三)公畜刺激 二、哺乳性乏情 三、病理性乏情 (一)卵巢机能减退 (二)持久黄体 动物繁殖学 发情控制 一、季节性乏情 季节性乏情主要是因为日照等原因所造成,可通过以下几种途径诱导母畜发情。 (一)生殖激素处理 在非发情季节,对乏情期的绵羊和山羊用孕激素处理6~9d,在停药前48h按每千克体重注射PMSG15IU,母羊同期发情率可达95%以上,第一情期受胎率为70%左右。应用FSH和氯地酚也可促使母羊发情排卵。非发情季节诱导母羊发情,可以做到2年产3胎,使奶山羊全年均衡产奶。在非发情季节,给母马每日注射雌激素5~10mg,连续10~15d,总剂量为75~150mg,可以在一定程度上恢复发情周期。 (二)改变光照期 母羊是由长日照过渡到短日照后开始表现发情的,春、夏季是母羊的非发情季节,在此期间利用人工缩短光照时间,模拟秋季的光照期,每日光照8h,黑暗16h,一般在处理后7~10周开始发情。如果4月末开始发情,5月份进入发情旺季,其诱导发情率为80%左右。在非发情季节应用延长光照的办法可以使母马卵巢机能提早恢复,在马厩内离地面2.5m高处悬挂200~400瓦的灯泡,从日落开始延长5~6h的光照时间,母马的卵巢机能可以在翌年1月下旬到2月下旬提前恢复,表现出正常发情。每天用400瓦灯光对种公马作长光照处理,也可以得到和母马类似的效果,并且精液品质正常。 (三)公畜刺激 在与公畜隔离的母畜群里,于发情季节到来之前,将公畜放入母畜群里,则会较好地刺激母畜,使其提前发情,此即所谓的“公畜效应”。利用公畜效应可以诱导处于乏情期的母畜提早发情,缩短产仔周期,提高动物的繁殖率。 二、哺乳性乏情 大部分母畜在产后相当长的时期内,卵巢机能处于静止状态,不表现发情,因而产后出现第一次发情的时间很不一致,为了克服这种现象,可以通过人为措施,缩短母畜产后第一次发情的间隔时间,使其及早配种受胎。母牛可在产后2周开始,采用孕激素预处理10d左右,再注射PMSG1000IU进行诱导发情。或采用牛初乳20ml,同时注射新斯的明10mg,对发情母牛配种时再肌肉注射LRH100μg,可以诱发80%~90%的母牛发情并排卵受胎。母猪哺乳期间一般是不发情的,只是在仔猪断奶后才出现正常发情。因此,对哺乳母猪早期断奶诱发发情的方法已成为现代养猪业中提高母猪繁殖力的重要措施。哺乳母猪在产后1个月断奶,将仔猪进行人工哺乳,这样母猪在1周左右即可发情。若在断奶时注射PMSG,则可得到更好的发情效果。如果在哺乳期内实行部分断奶,即从哺乳21d开始,每天哺乳12h,3d后再注射PMSG,则可促使母猪在哺乳期内发情。对哺乳母猪施行早期断奶,可以使母猪从分娩到发情配种的间隔时间大为缩短,达到2年产5胎的目的。用人工合成的公猪外激素喷洒于乏情期的母猪鼻端,即可促使其在数日内发情。产后1个月以上的泌乳母山羊,在耳背皮下埋植60mg18-甲基炔诺酮药管,维持9d。在取除药管前48h,肌肉注射PMSG15IU/kg体重,与此同时,再以2mg溴隐停间隔12h作两次注射。当母羊发情时再以LRH10μg/只作静脉注射给予配种。可以使诱导发情率达到90%以上。 三、病理性乏情 (一)卵巢机能减退 由于母畜的卵巢机能减退,而处于暂时性的静止状态,不出现发情周期。如果卵巢机能长久衰退,则会引起卵巢组织的萎缩、硬化。此病多发于气候寒冷、营养状况不良、使役过度的母畜或高产奶牛。对这种不发情可以使用PMSG或FSH等促性腺激素诱导母畜发情。 (二)持久黄体 对这种不发情,可使用前列腺素等药物溶解持久黄体,使孕激素的分泌停止,以促使卵泡发育。
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第二节 同期发情 所谓同期发情(Synchronization of estrus),就是采用激素或类激素的药物处理,使母畜在特定时间内集中发情和排卵。自从60年代初期至今,以母牛进行同期发情的研究最多,主要应用孕激素及其类似物,用口服、皮下注射、埋植、阴道栓等方法,停药后2~6d药物抑制卵巢的作用消失,母畜便能同期发情。在停用孕激素后也可配合注射促性腺激素或雌激素,以促使被处理母畜发情表现明显,达到排卵的目的。 动物繁殖学 发情控制 第二节 同期发情 在自然情况下,雌性动物在繁殖季节里出现的发情是随机的、零散的。所谓同期发情(Synchronization of estrus),就是采用激素或类激素的药物处理,使母畜在特定时间内集中发情和排卵。自从60年代初期至今,以母牛进行同期发情的研究最多,主要应用孕激素及其类似物,用口服、皮下注射、埋植、阴道栓等方法,停药后2~6d药物抑制卵巢的作用消失,母畜便能同期发情。在停用孕激素后也可配合注射促性腺激素或雌激素,以促使被处理母畜发情表现明显,达到排卵的目的。一般采用孕激素处理16~18d,80年代初发现缩短处理时间(9~12d),可提高效果。应用氟孕酮20mg阴道栓法处理绵羊13d后,在48h和56h肌注苯甲酸雌二醇各15μg,可促使同期发情。猪的同期发情技术是集约化养猪的关键,用ICI33828(甲丙硫脲)处理母猪20d,在第21d注射PMSG1500IU,3d后的同期发情率达95%,但受胎率较低。在注射PMSG后80h再注射hCG,受胎率可提高到80.7%。但ICI33828的副作用大,对猪产生畸形胎儿多;用于马、牛的同期发情,可能出现昏睡,步履蹒跚等副作用。 我国在70年代末至80年代中期,利用国产孕激素制剂18-甲基炔诺酮,处理母牛约900多头,应用阴道栓或耳背皮下埋植,10~12d后取出,再注射孕马全血得到满意效果。应用18-甲基炔诺酮或氯地酚配合促性腺激素,在绵羊、山羊方面获得显著效果。近期有人利用氯前列烯醇处理奶牛、肉牛及杂交水牛,也获得了同期发情效果。但有的受胎率低于正常水平,尚须进一步试验提高。 总之,同期发情技术的研究和应用,对于家畜繁殖生理、繁殖技术和畜牧业生产等方面已显示出积极的作用。
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一、同期发情的意义 (一)促进冷冻精液更迅速更广泛的应用 (二)便于组织大规模畜牧业生产和科学饲养管理 (三)提高家畜繁殖率
(四)为胚胎移植创造条件 动物繁殖学 发情控制 一、同期发情在畜牧业生产中的意义 (一)促进冷冻精液更迅速更广泛的应用 采用同期发情技术,可以充分利用冷冻精液设备和技术力量,扩大冷冻精液的应用范围,改变当前各人工授精站需要长期保存冷冻精液,等待母畜发情配种的现状,使人工授精做到成批、集中、定时,不需要作发情鉴定及试情工作。因此,同期发情为冷冻精液的推广创造了条件。同期发情只有与冷冻精液相结合才有实践意义,这是因为成批集中发情的母畜只有应用冷冻精液才能保证及时授精。正是由于精液冷冻技术的迅猛发展,同期发情才得以推广而被重视,同时它的应用又有力地推动着冷冻精液的普及。 (二)便于合理地组织大规模畜牧业生产和科学饲养管理 同期发情的母畜可以做到集中配种,随后的一系列繁殖过程如妊娠、分娩期则相应一致,产下的后代年龄也整齐,仔畜培育、断奶等也相继可以作到同期化。因而节省人力、时间,降低管理费用。在乳牛、肉牛、猪可以根据生产计划来分批进行同期发情处理,以方便配种工作。 (三)提高家畜繁殖率 同期发情不仅用于发情周期正常的母畜,也可使不发情的母畜出现发情周期,如乏情期母畜卵巢处于静止状态,经过孕激素的处理,可使这些母畜表现发情。这不仅缩短了母畜的繁殖周期,同时提高了繁殖率。 (四)为胚胎移植创造条件 家畜胚胎移植成功的关键是要求供体和受体母畜达到同期发情,因为只有供、受体母畜的生殖器官处于相同的生理状态,移植的胚胎才能正常发育。通过人为地控制母畜同期发情,研究其繁殖生理,可以揭示发情母畜体内的生理调节机理。
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二、同期发情的原理 借助外源性激素直接或间接作用于卵巢,使母畜卵巢按照预定要求发生变化,促使群体母畜卵巢的生理机能处于相同阶段。
一般采用两种手段。一种是给一群母畜同时施用孕激素药物,抑制其卵巢上卵泡的生长发育及发情表现,经过一定时期后同时停药,卵巢同时出现卵泡发育,引起母畜发情。 另一种方法是利用性质完全不同的前列腺素,加速功能性黄体的消退,使卵巢提前摆脱体内高水平孕激素的控制,于是群体母畜卵巢上的卵泡同时开始发育,以达到同期发情。 动物繁殖学 发情控制 二、同期发情的原理 同期发情技术是借助外源性激素直接或间接作用于卵巢,使被处理的母畜卵巢按照预定的要求发生变化,促使群体母畜卵巢的生理机能处于相同阶段,为同期发情创造一个共同的基础。促使母畜同期发情技术一般采用两种手段。一种是给一群母畜同时施用孕激素药物,抑制其卵巢上卵泡的生长发育及发情表现,经过一定时期后同时停药,由于卵巢摆脱了外源性孕激素的控制,此时卵巢上的发情周期黄体已经退化,于是同时出现卵泡发育,引起母畜发情(图9-1)。采用孕激素抑制母畜发情,实际上是人为地延长其黄体期,起到了延长发情周期,推迟发情期的作用,为引起下一个发情周期创造一个共同的起点。另一种方法是利用性质完全不同的前列腺素,加速功能性黄体的消退,使卵巢提前摆脱体内高水平孕激素的控制,于是群体母畜卵巢上的卵泡同时开始发育,以达到同期发情(图9-2)。在这种情况下,实际上是缩短了母畜的发情周期,使母畜的发情期提早出现。 上述两种方法所用的激素性质和作用虽不同,但都是将母畜的黄体期延长或缩短,使母畜摆脱内、外孕激素对卵巢的控制,因而在同一时间内引起全部母畜的卵泡发育,达到同期发情的目的。
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三、同期发情的药物 (一)抑制卵泡发育的制剂
孕酮(P4)、甲孕酮(MAP)、氟孕酮(FGA)、氯地孕酮(AP)、甲地孕酮(MA)以及18甲基炔诺酮等。其用药方式有: 1.埋植法 阴道栓塞法 3.口服法 注射法 (二)溶解黄体的制剂 (三)配合强化制剂 动物繁殖学 发情控制 三、同期发情的药物 常用于同期发情的药物,根据其性质可分为三类:①抑制卵泡发育的制剂(孕激素);②溶解黄体的制剂(前列腺素);③促使卵泡发育成熟、排卵的制剂(促性腺激素)。前两类是同期发情的基础药物,第三类是配合前两类药物使用的,是为了促使母畜同期发情有较高的准确性和同期性。 (一)抑制卵泡发育的制剂 孕酮(P4)、甲孕酮(MAP)、氟孕酮(FGA)、氯地孕酮(AP)、甲地孕酮(MA)以及18甲基炔诺酮等均属此类药物。它们能够抑制垂体促卵泡素的分泌,延长黄体期,因而间接地抑制了卵巢上卵泡的发育和成熟,使母畜不出现发情。这类药物的用药期分为长期(14~21d)和短期(8~12d)两种,一般不超过一个正常发情周期的时间。其用药方式有: 1.埋植法 将成形的药剂或装有药物的带孔小管,埋植于动物皮下,经一定时间取出,处理过程中药物被缓慢吸收,可成群处理。 2.阴道栓塞法 人工制作阴道栓,如孕酮阴道栓(Progesterone releasing intravaginaldevice,PRID),或将泡沫塑料或棉团经灭菌后,浸吸一定量药液,塞于母畜阴道深部子宫颈附近,药液逐渐被阴道粘膜吸收,经过一定时间取出。一般适用于牛、羊的同期发情处理。 3.口服法 每日将一定量的药物均匀拌入少量精料中,单个饲喂,经一定时期后同时停药。这种方法可用于舍饲母畜,但较费时、费工,群体饲喂会造成个体摄入剂量不准确。 4.注射法 每日定量将药物注入皮下或肌肉,经一定时期停药,此法剂量准确,但操作繁琐。 (二)溶解黄体的制剂 由于前列腺素(如PGF2α、氯前列烯醇等)具有显著地溶解黄体的作用,因此用作同期发情处理只限于正处在黄体期的母畜。猪在发情周期10d前对前列腺素不敏感,牛、羊和马在新生黄体期对前列腺素不敏感,只有在发情周期的第4~5d以后的黄体才可被前列腺素迅速溶解,因此应掌握合适的用药时间。用药方式以采用子宫内灌注法的效果高于肌肉注射法。经前列腺素处理后的母畜,一般在2~4d后约有75%左右集中表现发情,因为在群体母畜中总有25%的母畜处于非黄体期。如果要获得全群母畜发情的效果,可在第一次用药后经10~12d左右再用前列腺素处理一次。 (三)配合强化制剂 促使母畜同期发情的药物,如果配合使用促性腺激素可以增强发情同期化和提高发情率,促进卵泡更好地成熟、排卵。这类药物有:PMSG、hCG、FSH、LH、LHRH。通常应用于同期发情的药物,都需要配合促性腺激素作为强化剂,以增强同期化和提高发情率,促性腺激素类制剂很少单独应用于同期发情处理。如在黄体期使用,因卵巢上有功能性黄体存在,母畜体内孕酮水平高,配种后精子和卵子的运行和受精过程会受到影响。在卵泡期使用只能使处于发情前期母畜的发情得到促进和加强,并不能达到同期化的目的。因此一般是在应用抑制卵泡或黄体生理机能正常发育两类药物的基础上,当群体母畜卵巢处于相同生理阶段时,再应用促性腺激素,以提高其发情同期化的效果。使用孕激素作同期发情处理的母畜,其第一情期的配种受胎率较低,但第二情期的受胎率达到正常水平,这是由于孕激素能影响精子在母畜生殖道内的运行并使其生活力受到影响。在停用孕激素后于下一个发情周期到来之前,配合应用PMSG,会促进受胎率的提高。
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四、同期发情的效果 对卵巢上有功能性黄体的母牛,采用国产的前列腺素类似物,剂量为1~2mg,分两次子宫内灌注,为促进卵泡发育和排卵,配合使用促性腺激素,效果较好,6d内排卵的母牛达90%以上。多集中在用药后3~5d内排卵。 对于卵巢机能既无卵泡发育、成熟,也无功能性黄体存在的长期乏情的母牛,只能使用刺激母牛卵巢机能促进卵泡发育的促性腺激素如PMSG或LHRH,或使用孕激素配合某种促性腺激素,方可促使发情。 对持久黄体存在而造成长期乏情的母牛,则使用前列腺素配合促性腺激素的同期发情效果良好。 动物繁殖学 发情控制 四、同期发情的效果 对卵巢上有功能性黄体存在的母牛,采用国产的前列腺素类似物,剂量为1~2mg,分两次子宫内灌注,为促进卵泡发育和排卵,配合使用促性腺激素,效果较好,6d内排卵的母牛达90%以上。并且大多集中在用药后3~5d内排卵。利用PGF2α进行同期发情处理,对有功能性黄体及因持久黄体而长期不发情的母牛都有效果。施用PGF2α后,母牛的黄体在1d内溶解消退,继而在3~4d后就会出现正常发情排卵。因此,应用PG是控制母牛发情非常有效的药物。应用孕激素药物进行母牛同期发情多采用18-甲基炔诺酮作皮下埋植,经10~12d后除去药管。为了提高效果,也可以配合应用促性腺激素。国外进行了孕酮和PGF2α处理相结合的试验,处理方法是:用孕激素阴道栓预处理7d,并于第6d结合使用PGF2α,第7d撤除孕激素阴道栓,结果可以使76%的处女荷兰牛24h内发情,100%的牛于37h内发情,妊娠率达79%,这一技术现已被我国畜牧工作者广泛用于牛、羊的同情发情处理。 对于卵巢机能处于静止状态,既无卵泡发育、成熟,也无功能性黄体存在的长期乏情的母牛,使用具有溶解黄体作用的前列腺素,不能达到同期发情的效果,只能使用刺激母牛卵巢机能促进卵泡发育的促性腺激素如PMSG或LHRH,或使用孕激素配合某种促性腺激素,方可促使发情。 对持久黄体存在而造成长期乏情的母牛,则使用前列腺素配合促性腺激素的同期发情效果良好。国内应用前列腺素或孕激素处理母牛进行同期发情,处理后2~3d内的同期发情率大多为70%~90%。但对营养不良、体质瘦弱、长期不发情或屡配不孕的长期空怀牛效果甚差;此外,药物质量及处理方法还需筛选、改进和提高。如果牛的同期发情率稳定在90%左右,情期受胎率达到50%~60%或相当于当地自然发情的受胎率,同期发情技术就可以广泛应用于生产中。同期发情的母畜除了抓好第一情期受胎率外,还要重视第二个情期的受胎率。 大量试验结果证明,同期发情技术在家畜繁殖中,特别是对普及冷冻精液及开展畜群品质改良方面,显示出很大的实用价值具有广阔的发展前景,结合定时授精将意味着对配种组织形式的改革产生深远的影响。在配种方面不仅在方法上,而且在时间上完全可以作到处于人为的控制之下。同期发情技术的应用,可使许多长期处于不发情的母牛迅速恢复繁殖力。
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同期发情中牛耳背埋植激素示意图 动物繁殖学 发情控制
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孕激素处理工具与方法 动物繁殖学 发情控制
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激素处理诱导母牛同期发情 孕激素处理诱导母牛同期发情 前列腺素诱导全群母牛同期发情 动物繁殖学 发情控制
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同期发情中两种方法的比较 动物繁殖学 发情控制
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第三节 超数排卵 用外源性促性腺激素诱发动物卵巢多个卵泡发育,并排出具有受精能力卵子的方法称为超数排卵(Super ovulation),简称“超排”。直至1951年在牛的胚胎移植中才获得成功。 由于大多数家畜均为单胎或双胎,单纯的胚胎移植技术对提高动物的繁殖率效果是有限的,因此超排是进行家畜胚胎移植的重要手段。 动物繁殖学 发情控制
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一、超数排卵的意义 为了提高动物的繁殖效率,人们应用超排技术可以使每次排卵数由1~3个增加至10~20个,或通过超排处理后人工回收卵母细胞经培养成熟,使之受精形成早期胚胎,对开发利用卵巢上的卵母细胞资源,提高优良母畜的繁殖能力,对充分挖掘它们的繁殖潜力,加速品种改良具有重要的意义。 动物繁殖学 发情控制 一、超数排卵的意义 哺乳动物的初生时卵巢上含有20~40万个卵母细胞,但在自然条件下,仅有数十个卵母细胞得以正常发育并排卵。为了提高动物的繁殖效率,人们应用超排技术可以使每次排卵数由1~3个增加至10~20个,或通过超排处理后人工由母畜卵巢回收卵母细胞经培养成熟,使之受精形成早期胚胎,将会开发利用卵巢上的卵母细胞资源,提高优良母畜的繁殖能力,对充分挖掘它们的繁殖潜力,加速品种改良具有重要的意义。 为了避免因配子老化而降低动物的繁殖能力,就要准确掌握其排卵时间。在自然发情期中动物的排卵时间是受着LH、FSH高峰值出现时间控制的,而LH、FSH的高峰出现时间又是由有腔卵泡所分泌的雌激素对垂体、丘脑下部发出的正反馈作用而诱发的。雌激素可促使动物表现发情,故当动物体内出现LH、FSH高峰时,往往表现出明显的发情行为。为了准确地把握排卵时间,可用LH或hCG控制调整动物的排卵过程。LH和hCG应在卵泡发育成熟时进行注射,否则会排出未成熟的卵母细胞,不表现发情而排卵或卵泡发生黄体化转变为闭锁卵泡。
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二、超数排卵的原理 在自然状态下,动物卵巢上约有99%的有腔卵泡发生闭锁而退化,只有1%的能发育成熟而排卵。在每次发情期之前优势卵泡加速生长,使其余小的有腔卵泡发生闭锁退化。LH可使卵母细胞恢复减数分裂,成熟卵泡分泌PGF2α,进而促进卵泡膜细胞释放胶原酶而溶解局部组织出现排卵过程。因此认为,超排的过程就是应用超过体内正常水平的外源性促卵泡激素,使将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟而排卵。 动物繁殖学 发情控制 二、超数排卵的原理 一般而言,只是有腔卵泡对外源性促性腺激素的刺激反应敏感并能发生排卵,而卵泡腔的形成及生长期卵泡的发育又完全受着FSH和LH的控制,FSH在起动卵泡腔的形成过程中起着重要作用,它能促进颗粒细胞加速有丝分裂并分泌卵泡液。在自然状态下,动物卵巢上约有99%的有腔卵泡发生闭锁而退化,只有1%的能发育成熟而排卵。在每次发情期之前优势卵泡加速生长,使其余小的有腔卵泡发生闭锁退化。在发情期LH排放频率加快,可使优势卵泡逐渐增加雌二醇的分泌,当优势卵泡成熟时,它所分泌的雌二醇产生正反馈作用导致垂体大量释放LH。LH可使卵母细胞恢复减数分裂,成熟卵泡分泌PGF2α,进而促进卵泡膜细胞释放胶原酶而溶解局部组织出现排卵过程。因此认为,超排的过程就是应用超过体内正常水平的外源性促卵泡激素,使将要转化为闭锁卵泡的有腔卵泡发育成熟而排卵。试验证明在家畜有腔卵泡闭锁之前,注射FSH或PMSG,能使大量卵泡不闭锁而正常发育成熟,在排卵之前注射LH或hCG补充内源性LH的不足,可以保证这些大量成熟卵泡都同时排卵,于是便形成了超数排卵。
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三、超数排卵处理方法 1.孕马血清促性腺激素 2.促卵泡素 3.前列腺素 4.促排卵类药物 5.孕激素 动物繁殖学 发情控制
(一)超数排卵使用的药物和剂量 1.孕马血清促性腺激素 超排处理时,随着PMSG的剂量增大,卵巢的反应亦会增强,发情时间提前,但用量是有限度的,必须掌握在一定范围内。一般对母牛使用剂量为2000~3000IU作肌肉注射,注射剂量如果超出3000IU,并不明显增加卵巢的排卵数。PMSG的剂量和排卵数的关系见表9-1。奶牛、奶山羊使用PMSG作超排处理有以下特点: (1)药物效果比较平缓,卵巢体积不会剧烈增大,处理后卵巢容易恢复正常。 (2)排卵率高,残留的成熟卵泡少。 (3)发育的卵泡数不过多,排卵比较整齐,一般一侧卵巢排出5~8个卵子。 (4)PMSG半衰期较长,超排后卵巢上未排卵的大卵泡数量增加。因此,为了克服这一缺点,在使用PMSG超排后适时给予抗PMSG血清,则可通过中和外周循环中的PMSG,抑制卵巢上第二次卵泡波的出现,提高超排效果。 2.促卵泡素 FSH在体内的半衰期较短,注射后短时间即失去活性,因此使用时需分次注射。如将FSH的总剂量24~50mg分为3~4d每天注射2~3次,卵巢上出现的黄体数和回收胚胎数要比1d注射一次或2d注射一次的效果好(表9-2)。有人将FSH和LH按5∶1的比例混合使用,也取得了良好的效果。 3.前列腺素 PG在超排处理中是用作配合药物,以达到同期发情的目的,PG的应用不仅能使黄体提早消退,并能提高超排效果。有人在母牛发情后第16d每头注射PMSG2000IU,34头供体平均排卵数为8个;而在黄体期注射等剂量的PMSG后48h配合注射PG,平均每头供体的排卵数可提高到13个。如果将PG和PMSG同时注射,则排卵数会显著下降。 4.促排卵类药物 超排处理的供体,卵巢发育的卵泡数比正常发情期的多十倍,因此在供体出现发情时,可用应用外源性促排卵类激素如GnRH、LH等,以增强排卵效果,减少卵巢上残留的卵泡数。 5.孕激素 对施行超排处理之前的母畜,如用孕激素作预先处理,可以提高母畜对促性腺激素的敏感性,改善超排效果。 (一)超数排卵的处理时期 图9-3牛发情周期末期超数排卵处理 超排的处理时期应安排在发情周期的后期即黄体消退时期,这时卵巢正处于黄体期向卵泡开始发育的过渡时期(图9-3)。但是自然发情周期的长短并非恒定不变,不但个体之间有差异,而且同一个体每次发情周期也有长短的变化。所以在发情周期的后期用药物作超排处理,不一定能和卵巢机能转变阶段相吻合。如果用药物处理的时间是在黄体尚未临近消退的阶段,或是在黄体已经消退,卵泡已明显发育开始发情时,由于注射促性腺激素作超排处理的时间与卵巢机能发育的步调不相一致,所以效果不好。为了获得良好的超排效果,必须在注射促性腺激素的同时,控制卵巢上的黄体在一定的时间退化。如果在发情周期的中期进行超排处理,需要在施用促性腺激素后48~72h配合注射PG,促使黄体消失(图9-4)。近年来在发情周期的中期配合应用PG进行超排的方法已被广泛采用。
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四、超数排卵的效果 (一)受胎率 (二)排卵数 (三)发情率 (四)发情出现时间和胚胎回收率 (五)发情周期 动物繁殖学 发情控制
四、超数排卵的效果 (一)受胎率 进行超数排卵处理的卵子受精率和母畜受胎率均低于自然发情的受胎率和受精率。这是因为经超排处理后,在高浓度雌激素的作用下,改变了卵子和胚胎在输卵管、子宫内的生存环境,影响胚胎的发育。回收胚胎的时间越晚,变性胚胎的比例就越大。但第3~4d回收的牛胚胎经移植的受胎率却低于第7~8d回收者,因此回收胚胎的时间应适宜。 (二)排卵数 供体一次超排卵的数目不宜过多,两侧卵巢一次排卵10~15枚较好,若排卵数过多时,则会有较多的未成熟卵子被排出,造成受精率下降,卵巢恢复的时期延长。 (三)发情率 应用促性腺激素和PGF2α进行超排处理,约有68%~80%的母畜有发情表现,而有的供体虽然不表现发情却正常排卵。 (四)发情出现时间和胚胎回收率 供体在超排处理注射PGF2α后的48h以内发情者胚胎的回收率最高,72h以后发情的胚胎回收率大为下降,甚至大多为未受精的卵子。超排卵子数过多时,胚胎回收率亦有下降趋势。 (五)发情周期 超排后的母畜,血液中含有高浓度的孕激素,因此发情周期延长。高浓度的孕激素主要是由超排后生成的黄体所分泌,少量来自黄体化的闭锁卵泡。
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五、影响超排处理效果的因素 (一)个体反应 (二)年龄和胎次 (三)超排时期 (四)品种 (五)季节 (六)泌乳 动物繁殖学
发情控制 五、影响超排处理效果的因素 在超排处理中,目前尚不能准确地控制供体母畜的排卵数,导致供体母畜个体之间的排卵数差异很大,造成这一结果的影响因素很多,可以概括为以下几个方面: (一)个体反应 在实践中发现,经超排处理的母畜群中约有1/3的供体效果理想,1/3的反应一般,1/3的效果甚差。就一头供体分析,每次超排后效果差异很大,时好时坏,因此给鲜胚移植带来的困难是不能适量的为其准备受体,以供移植使用。 (二)年龄和胎次 青年母牛经超排处理后,排卵数和胚胎回收率均高于经产母牛,这可能由于青年母畜对超排药物敏感性高之故。从开始进行超排处理到出现发情的间隔时间,主要是受排卵卵泡占全部卵泡比例的影响,排卵卵泡所占比例越大,间隔时间就越长。 (三)超排时期 在发情周期不同的时期进行超排处理,其效果不一样。一般以发情周期第10d以后作超排处理效果较好(表9-3)。分娩后不久的母畜,不宜作为供体进行超排处理,母牛一般需在45~60d以后处理效果较好。但是,产后空怀时间过长的母畜作超排处理的效果亦不高。 (四)品种 不同品种的母畜对同一种超排处理方法的效果不同。如应用2000IU的PMSG进行超排处理,黑白花奶牛平均排卵5.3枚,西门塔尔牛平均排卵12.2枚,利木赞牛平均排卵16.4枚。 (五)季节 母牛在27℃以上的温度下,对发情周期及胚胎的存活都会产生不良影响;日照的长短对供体牛的激素分泌和受胎效果也有较明显的影响。 (六)泌乳 对泌乳期母牛的超排处理要优于干奶期母牛,但是处于泌乳高峰期的母牛对PMSG不敏感。分娩后不宜过早地进行超排处理,一般需在45~60d以后超排效果较好。有人用3000IU的PMSG对62头泌乳高峰期奶牛进行处理,其中31头母牛处理3次以上亦不发生反应。
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牛发情周期中、末期超排处理 末期 中期 动物繁殖学 发情控制
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动物繁殖学 发情控制
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