1.1 DNA重组技术的基本工具.

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1 1.1 DNA重组技术的基本工具

2 资料分析 位于费城托马斯·杰斐逊大学的希拉里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体的DNA译码移入烟草作物中。 转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质，而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。

3 此转基因实验实现了哪种生物的哪个性状在另外哪种生物中表达？
性状的表达与我们以前学过的什么过程有关？ 要实现外源基因在烟草中的表达，要提前做哪些关键工作?

4 DNA重组技术的基本工具 基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：
　　基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具： 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体

5 思考 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？

6 思考 从哪里可以找到这种切割外来DNA而对自身DNA不切割的物质呢？ 科学家是怎样找到这些酶的？ 这些酶具有什么作用？
限制性核酸内切酶的作用： 能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列；2、使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。

7 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 思考：黏性末端、平末端是如何形成的？

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9 重播

10 　　DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制酶切断的几个DNA具有相同的黏性末端，能够通过互补进行配对。

11 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？

12 阅读思考 限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可以不加选择？

13 基因进入受体细胞的载体 　　 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达，首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去！能将外源基因送入细胞的工具就是载体。

14 基因进入受体细胞的载体 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？ 作为载体没有切割位点将怎样？ 目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？
如果载体对受体细胞有害将怎样？如果不能分离会怎样？

15 作为载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达； 有遗传标记基因
对受体细胞无害、容易分离 比较容易得到

16 3、基因的运输工具——运载体 有切割位点 有标记基因的存在，将来可用含青霉素的培养基鉴别。 能复制并带着插入的目的基因一起复制

17 练习 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶
基因工程常用的受体细胞有（ ） (1)大肠杆菌 （2）枯草杆菌 （3）支原体 （4）动植物细胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3）

18 练习 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D

19 练习 C 3) 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因
B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C

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