微生物实验F 外界因素对细菌的影响 常见病原性球菌检查程序.

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1 微生物实验F 外界因素对细菌的影响 常见病原性球菌检查程序

2 外界因素对细菌的影响 高压蒸汽灭菌法 紫外线的杀菌作用 化学、生物因素对细菌的影响

3 1.高压蒸汽灭菌法(介绍) 菌体蛋白遇热变性凝固 121℃ 20min 压力表 排气阀 安全阀 锅内温度变化曲线 排气管 金属容器
水、电阻丝 金属容器 排气管 排气阀 压力表 安全阀 锅内温度变化曲线

4 2.紫外线杀菌实验 (以小组为单位) 棉签涂菌方法 牛皮纸 皿盖 紫外线照射30min 盖盖，37℃培养过夜

5 3. 清毒剂杀菌/抑菌试验 (以小组为单位) 用圆纸片蘸2% 碘酒、75%酒精、1%新洁尔灭、2%汞溴红或甲紫贴于琼脂上，中央用生理盐水作对照 37℃培养过夜 棉签涂葡萄球菌 或大肠杆菌菌液 >

6 二、常见病原性球菌检查程序 葡萄球菌、链球菌、肠球菌、奈瑟球菌 葡萄球菌血浆凝固酶实验 胆汁溶菌实验 抗O实验

7 1. 观察病原性球菌培养物 b溶血（金葡菌） 金黄色菌落，完全透明溶血环 b溶血（A群链球菌）
灰白色菌落，表面光滑，边缘整齐，较宽的透明溶血环 a溶血（甲型溶血性链球菌）草绿色溶血环

8 血浆协同因子 纤维蛋白原 2.葡萄球菌血浆凝固酶实验 是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标
血浆协同因子 纤维蛋白原 游离凝固酶 凝血酶样物质 纤维蛋白 ， 引起血浆凝固 结合凝固酶：为菌体纤维蛋白原受体，与血浆中血浆纤维蛋白原交联使 细菌凝聚

9 实验方法(每人都作) 生理盐水3环 以接种环取菌少许 制成均匀细菌悬液 金黄色葡萄球菌 白色葡萄球菌
于每滴细菌悬液内加入兔血浆各50mL，混匀 5min内观察结果，若出现大片凝集块为阳性，无凝集为阴性 金黄色葡萄球菌 白色葡萄球菌

10 3.抗链球菌溶血素O(streptolysin O, SLO)抗体(ASO)测定
SLO是A族链球菌的代谢产物，对多种细胞有毒性，可致心跳停止，动物死亡。SLO抗原性强，链球菌感染后2-3周体内产生大量ASO。测定此抗体效价可作为风湿热、急性肾小球肾炎等与链球菌感染有关的疾病的辅助诊断。

11 RBC 人血清 乳胶颗粒 SLO SLO乳胶试剂 感染患者血清 (ASO)

12 实验方法(每人都作) 将1-4孔各滴一滴第二次课分离的血清 每个圈上再滴加ASO1滴，用搅拌棒充分搅拌，3-5min观察结果。
2 3 4 阳性对照 阴性对照 有清晰凝集者为阳性，即ASO滴度＞400U/ml； 不出现清晰凝集者为阴性。

13 4. 胆汁溶菌实验(以小组为单位) 胆汁或胆盐能活化肺炎链球菌自溶酶，加速肺炎链球菌裂解自溶，而甲型溶血性链球菌无自溶酶产生。在血清肉汤培养基中培养2种链球菌18h，按下图加液后摇匀各管，置37℃15min后观察结果。 4 3 2 1 0.8mL甲型溶血性链球菌菌液 0.8mL肺炎链球菌菌液 0.2mL生理盐水 0.2mL10%去氧胆酸钠