芳香胺类药物的分析 Analytical of Aromatic amines

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1 芳香胺类药物的分析 Analytical of Aromatic amines
药物分析 芳香胺类药物的分析 Analytical of Aromatic amines

2 对氨基苯甲酸酯类药物结构与化学性质 酰胺类药物基本结构与化学性质 鉴别试验 特殊杂质检查 含量测定

3 一、对氨基苯甲酸酯类药物基本结构与化学性质
基本结构(Structure) 苯佐卡因(benzocaine) 盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride) 盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).

4 化学性质(Feature) 重氮化－偶合反应 易氧化变色等 H2N 水解反应 受光线、热、碱的影响

5 盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride)
弱碱性:生物碱沉淀剂反应;非水溶剂滴定（含量测定） 溶解性:具有脂烃胺侧链游离碱，油状液体或低熔点固体, 水难溶，有机溶剂易溶； 盐酸盐白色结晶粉末，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。 盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).

6 bupivacaine hydrochloride
二 、酰苯胺类药物基本结构与化学性质 基本结构(Structure) 盐酸利多卡因 lidocaine hydrochloride 盐酸布比卡因 bupivacaine hydrochloride

7 侧链烃胺——具弱碱性，可与生物碱沉淀剂反应 与重金属离子反应，形成有色配位化合物
化学性质(Feature) 酰胺基——水解后芳伯氨基特性 侧链烃胺——具弱碱性，可与生物碱沉淀剂反应 与重金属离子反应，形成有色配位化合物

8 NaNO2/HCl 碱性β-萘酚 有色偶氮染料（橙黄到猩红色）
二、鉴别试验 (Identification) （一）重氮化－偶合反应 芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺 NaNO2/HCl 碱性β-萘酚 有色偶氮染料（橙黄到猩红色）

9 （一）重氮化－偶合反应 潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚 盐酸或硫酸加热水解 NaNO2/HCl 碱性β-萘酚 有色偶氮染料（红色）
区别盐酸丁卡因： （乳白色）

10 （二）与金属离子反应 与铜和钴离子反应 （具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因） 硫酸铜/碳酸钠试液→蓝紫色配合物→
氯化钴/酸性溶液→亮绿色细小钴盐沉淀↓ 显黄色（溶于氯仿） 2. 羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺） 浓过氧化氢/加热至沸 羟肟酸 三氯化铁 羟肟酸铁（紫红色） 3. 与汞离子反应 芳酰胺类，如盐酸利多卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸 对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因 硝酸汞/硝酸，煮沸 黄色 红色或橙黄色

11 2

12 + 3 + 3HCl 羟圬酸铁 紫红色→暗棕色至棕黑色。

13 （三）水解产物反应 具有酯键结构的药物易在碱性溶液中水解，可利用其水解产物进行鉴别。
1. 盐酸普鲁卡因＋10％氢氧化钠溶液→白色↓ →加热变为油状物→继续加热→蒸气（二乙氨基乙醇）↑（能使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色）→加热至油状物消失放冷、加盐酸→白色↓（能溶于过量的盐酸） 2. 苯佐卡因＋氢氧化钠试液→煮沸→乙醇→加入碘试液/加热→黄色↓（碘仿臭气）

14 盐酸普鲁卡因 白色 白色 沉淀溶解 二乙氨基乙醇 石蕊试纸 石蕊试纸

15 苯佐卡因 黄色

16 （五）制备衍生物测熔点 1.盐酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 盐酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因
1.盐酸利多卡因 三硝基苯酚 三硝基苯酚利多卡因 （mp. 228~232℃） 盐酸布比卡因 三硝基苯酚布比卡因 （mp. 194℃） 2.盐酸丁卡因 25％硫氰酸铵溶液/5％醋酸溶液 丁卡因硫氰酸盐（ mp. 131℃ ）

17 （六）紫外特征吸收光谱 药物 溶剂 浓度 (μg/mL) λmax (nm) 备注 对乙酰氨基酚 HCl(10.3g/L)-
甲醇(1:99) 0.4%NaOH 10 249 860～980 BP2005, 8 257 715 ChP2010用于含量测定 苯佐卡因 氯仿 278 USP与对照吸收相同，两者之差不超过3.0% 盐酸丁卡因 pH6磷酸盐缓冲液 310 同上，两者之差不超过2.0% 盐酸普鲁卡因胺 0.1mol/L NaOH 273 580～610 BP 水 5 280 ChP，片剂和注射剂鉴别 醋氨苯砜 无水乙醇 256，284 ChP

18 （七）红外吸收光谱 盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺 波数cm-1 波数cm-1 酯羰基υC=O 1692 －
盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡因胺 波数cm 波数cm-1 酯羰基υC=O － 酯基υC-O , 1170, － 二乙胺盐υN-H （略向高波数） － （ δN-H 酰胺Ⅱ带） － （ υN-H酰胺Ⅲ带 ）

19 三、特殊杂质检查（Detection of specific impurities）
（一）盐酸普鲁卡因原料药、注射液中对氨基苯甲酸的检查 黄色 限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过0.5%(原料药、粉针剂);1.2%（注射液）。 检查方法：HPLC法，对氨基苯甲酸对照品对照。

20 四、含量测定 (Assay) 容量分析方法 (volumetric analysis)
亚硝酸钠滴定法 sodium nitrite method 非水溶液滴定法 non-aqueous titrimetry 紫外分光光度法 ( spectrometry ) 色谱法 ( chrometography )

21 原理 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
芳伯氨基或水解后生成芳伯氨基的药物在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，生成重氮盐，用永停法指示反应终点。

22 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
测定主要条件 1、加入适量KBr——以加速反应 NaNO2 + HCl → HNO2 + NaCl HNO2 + HCl →NOCl + H2O Ar-NH2 + NOCl Ar-NH-NO Ar-N=N-OH Ar -N2Cl 慢 快 KBr + HCl → HBr +KCl HNO2 + HBr →NOBr + H2O （1） HNO2 + HCl →NOCl + H2O （2） 因（1）式平衡常数比（2）式约大300倍，生成的NOBr量多，使溶液中NO+浓度大大增加，从而加速反应进行。

23 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
测定主要条件 2、加过量盐酸 胺类药物在盐酸中溶解度大，反应速度也快，其实际用量较理论量多，一般胺：酸的比例以1：2.5～6为宜。 过量酸有利于： ①重氮化反应加快； ②重氮盐在酸中稳定； ③可防止生成偶氮氨基化合物。

24 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
测定主要条件 3、滴定温度 温高反应快，但重氮盐易分解； 温低反应慢，故室温10～30C为宜。 4、滴定方法与滴定速度 将滴定管尖端插入液面下，一次将大部分滴定液在搅拌下加入，然后将滴定管尖端提出液面，缓缓滴定至终点。

25 指示终点的方法 阳极 阴极 永停滴定法 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
电极：两个相同的铂电极（需活化，用加有1-2滴FeCl3试液的硝酸温热浸泡） 终点时： 阳极 阴极

26 外指示剂法——碘化钾-淀粉糊剂 原理： 影响因素： 内指示剂法 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
NaNO2 + KI + HCl →NO + I2 I2 + 淀粉→蓝色 影响因素： 溶液体积 多次外试，供试品的损失 指示剂需新配 内指示剂法 常用的有：中性红、橙黄IV –亚甲蓝

27 （一）亚硝酸钠滴定法sodium nitrite method
原理： 条件： 1、加入适量溴化钾加快反应 、加入过量盐酸1:2.5~6 3、室温10℃～ 30℃ 、滴定管尖端插入液面下滴定 终点指示方法： 永停法

28 （二）非水溶液滴定法 non-aqueous titrimetry
盐酸丁卡因 盐酸利多卡因 侧链烃胺的叔胺氮 侧链哌啶环的叔胺氮 弱碱性 指示剂：结晶紫 高氯酸非水滴定 盐酸布比卡因 例：盐酸布比卡因的非水滴定反应过程 取本品0.2g，精密称定，加冰醋酸20ml与醋酐20ml溶解后，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。

29 （三）分光光度法( spectrometry )
注射用盐酸丁卡因含量测定 （四）高效液相色谱法 ( HPLC ) 盐酸利多卡因注射液的含量测定

30 小结 本章要求重点掌握对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类药物的基本结构及性质； 掌握鉴别试验中的重氮化-偶合反应、水解反应；
掌握含量测定方法中的亚硝酸钠滴定法（包括测定的药物对象、测定原理、测定条件及终点指示方法）。

31 思考题 1、何种药物可采用亚硝酸钠滴定法测定含量？ 2、亚硝酸钠滴定法测定药物含量的实验条件是什么？
3、药典为何要采用永停滴定法指示亚硝酸钠滴定法的终点？