血清（浆）脂类及脂蛋白测定 ——董雷鸣.

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1 血清（浆）脂类及脂蛋白测定 ——董雷鸣

2 血脂的组成： 甘油三酯(少量甘油二酯和甘油一酯) 磷脂 胆固醇和胆固醇酯 非酯化脂肪酸（游离脂肪酸）等

3 血脂的运输形式—脂蛋白 1、定义： 指血浆脂质与载脂蛋白组成的可溶性的生物大分子。

4 2、结构： 磷脂 胆固醇 载脂蛋白 表面 脂蛋白微粒 甘油三酯 胆固醇酯 核心

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6 3、分类 (1)按密度不同 HDL LDL IDL VLDL CM

7 (2)按电泳时区带的泳动位置不同 α -LP 前β-LP β-LP CM ＋ CM β-LP 前β-LP α -LP CM HDL VLDL

8 临床血脂测定的常见项目：

9 磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）
实验51： 磷钨酸-镁沉淀法测定高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）

10 实验原理： 提取HDL 测定胆固醇

11 提取HDL的方法： 超速离心法 层析法 电泳法 ☆沉淀法

12 沉淀法原理： ApoB + 多阴离子化合物 沉淀↓

13 多阴离子（polyanion）化合物 硫酸葡聚糖--Mg2+ 肝素--Mn2+ 磷钨酸--Mg2+

14 胆固醇测定（酶法）： 过氧化物酶 胆固醇 + O 胆甾烯酮 + H2O2 H2O2 + 酚 + 4-氨基安替比林 亚胺醌 + H2O

15 试剂： 沉淀剂 酶试剂 参考血清（TC测定用的定值血清）

16 操作步骤： 1、提取HDL 取血清和沉淀剂各200μl，充分混匀，置室温放置10min后，2500r/min，15min，吸取上清液按表进行操作。

17 2、测定胆固醇 混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。 加入物(μl) 空白管 标准管 测定管 上清液
— 50 参考血清 蒸馏水 酶试剂 2000 混匀，37℃水浴15min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。

18 计算： 参考值： 定值血清胆固醇浓度 测定管吸光度 5.17 HDL-C (mmol/L) × = 标准管吸光度 2

19 注意事项： 1、血清标本要及时测定 ——（在室温条件下，各型脂蛋白之间会发生脂质交换）； ——（游离的胆固醇会不断酯化）。
2、离心过程中防止温度过高（室温15~25℃），离心后放置时间不能过长。 ——（温度过高使沉淀不完全）。

20 临床意义： 具有抗动脉粥样硬化作用，是冠心病的保护因素。

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22 实验49： 磷酸甘油氧化法测定血清甘油三酯（TG）

23 甘油三酯(TG)的结构：

24 甘油三酯测定的方法： 化学法 酶法

25 化学法 （KOH） （过碘酸） 抽提 甘油 甲醛 显色 皂化 氧化

26 甘油 甲醛 甘油三酯 紫红色 变色酸

27 ☆酶法（磷酸甘油氧化酶法） 亚胺醌 + H2O 甘油三酯 甘油 + 脂肪酸 + ATP 3-磷酸甘油 + ADP O2 、H2O +
LPL 甘油三酯 甘油 + 脂肪酸 GK + ATP 3-磷酸甘油 + ADP O2 、H2O + GPO 磷酸二羟丙酮 + H2O2 +酚、4-氨基安替比 POD 亚胺醌 + H2O

28 试剂： 酶试剂 2.26mmol/L的三油酸甘油酯标准液

29 操作： 37℃水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。 加入物(μl) 空白管 标准管(×2) 测定管(×2) 上清液
— 20 参考血清 酶试剂 2000 37℃水浴10min；空白管调零，0.5cm比色杯，500nm比色。

30 计算： 参考值： TG (mmol/L) 测定管吸光度 = × 标准液浓度 标准管吸光度 2.26mmol/L

31 临床意义： 增高: 与动脉粥样硬化关系密切、家族性的脂代谢紊乱、糖尿病等。 降低: 营养不良、消化吸收综合征、消耗性疾病等。

32 注意事项： 标本： 标本要求是餐后12-14h的空腹血液 ——（血清TG易受饮食影响）。 标本存放不宜超过3天
试剂： 酶试剂应4℃避光保存，出现红色不可再用 。

33 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B
实验53： 免疫透射比浊法测定血清载脂蛋白A1和载脂蛋白B

34 原理： ApoA1 ApoB ApoA1抗体 ApoB抗体 抗原 + 抗体 抗原抗体复合物 比色

35 临床意义： ApoA1 与高脂血症、冠心病呈负相关； ApoB 与高脂血症、冠心病呈正相关。