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第六章 培养基的灭菌及空气的净化 第一节 培养基灭菌的目的、要求和方法 二、培养基灭菌 一、定义 1,培养基灭菌的定义 2,灭菌与消毒的区别

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1 第六章 培养基的灭菌及空气的净化 第一节 培养基灭菌的目的、要求和方法 二、培养基灭菌 一、定义 1,培养基灭菌的定义 2,灭菌与消毒的区别
第六章 培养基的灭菌及空气的净化 第一节 培养基灭菌的目的、要求和方法 一、定义 1,培养基灭菌的定义 2,灭菌与消毒的区别 二、培养基灭菌 1,在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果 2,工业上具体措施 3,培养基灭菌的目的 4,培养基灭菌的要求

2 5,灭菌的方法 6,湿热灭菌的原理 7,湿热灭菌中的相关定义 8,湿热灭菌的优点 化学法 P261 物理法 P262 湿热灭菌、过滤除菌
致死温度 致死时间 微生物的热阻 相对热阻 8,湿热灭菌的优点

3 第二节 湿热灭菌的理论基础 一、 培养基湿热灭菌需解决的工程问题 灭菌温度和时间的确定取决于: 杂菌孢子的热灭死动力学
第二节 湿热灭菌的理论基础 一、 培养基湿热灭菌需解决的工程问题 灭菌温度和时间的确定取决于: 杂菌孢子的热灭死动力学 反应器的形式和操作方式 培养基中有效成分受热破坏的可接受范围

4 二、微生物的热死灭动力学方程 微生物营养细胞的均相热死灭动力学方程: (1) N:任一时刻的活菌浓度(个/L) t:时间(min)
K:比热死速率常数(min-1)

5 三、温度对K的影响 比热死灭速率常数K与灭菌温度T的关系可用阿累尼乌斯方程表征 (4) A:频率因子(min-1)
ΔE:活化能(J/mol) R:通用气体常数[J/(mol.k)]

6 第三节 培养基灭菌的工程设计 一、无菌的标准 二、分批灭菌 在工程设计中常取 N=10-3 1,分批灭菌的设计
第三节 培养基灭菌的工程设计 一、无菌的标准 在工程设计中常取 N=10-3 二、分批灭菌 1,分批灭菌的设计 在发酵罐中进行实罐灭菌,是典型的分批灭菌。全过程包括升温、保温、降温三个过程。

7 3,培养基分批灭菌过程中应注意的问题 2,保证间歇灭菌成功的要素 内部结构合理;压力稳定的蒸汽;合理的操作方法。
温度和压力的关系;泡沫问题;投料过程中,麸皮和豆饼粉等固形物在罐壁上残留的问题;灭菌结束后应立即引入无菌空气保压。

8 三、连续灭菌 1,连续灭菌的流程

9 2,连续灭菌设计及计算举例 3,连续灭菌设备的结构

10 四、连续灭菌与分批灭菌 五、影响灭菌的因素 六、发酵罐的灭菌 七、补料液的灭菌

11 第四节 空气中微生物的分布和 发酵工业对空气无菌程度的要求
第四节 空气中微生物的分布和 发酵工业对空气无菌程度的要求 一、无菌空气的概念 二、空气中微生物的分布 三、发酵对空气无菌程度的要求 四、空气含菌量的测定

12 第五节 空气除菌的方法 一、辐射灭菌 二、加热灭菌 三、静电除菌 四、介质过滤

13 一、辐射灭菌 1,原理 α射线、X射线、β射线、γ射线、紫外线、超声波等从理论上讲都能破坏蛋白质,破坏生物活性物质,从而起到杀菌作用。 2,应用范围 通常用于无菌室和医院手术室。 3,缺点 杀菌效率较低,杀菌时间较长。一般要结合甲醛蒸汽等来保证无菌室的无菌程度。

14 二、加热灭菌 利用压缩热进行空气灭菌的流程图 空气进口温度为21℃,出口温度为187~198℃,压力为0.7MPa。

15 三、静电除菌 1,原理 利用静电引力来吸附带电粒子而达到除尘、除菌的目的。 2,优点 阻力小,约1.01325×104Pa
染菌率低,平均低于10-15% 除水、除油的效果好 耗电少 3,缺点 设备庞大 、一次性投资较大 、捕集率尚嫌不够,需要采取其它措施。

16 第六节 介质过滤除菌的工艺设备及计算 第一部分 介质过滤除菌的机理 一、定义 二、空气过滤器的功能 三、过 滤 机 理
第六节 介质过滤除菌的工艺设备及计算 第一部分 介质过滤除菌的机理 一、定义 过滤除菌:利用有孔介质从气体中除去微生物。 二、空气过滤器的功能 三、过 滤 机 理 直接拦截 惯性撞击 扩散拦截

17 1,直接拦截 流体中的基本过滤机制 本质是一种筛分效应,机械拦截颗粒 例如:一种简单的筛网可以拦截尺寸 大于其孔径的颗粒

18 2,惯性撞击 尺寸小于滤材孔径的颗粒的辅助拦截方式 流体携带的颗粒由于质量和线速度而具有直线运动的惯性 颗粒离开流体主流而撞击到滤材上

19 3,扩散拦截 气体分子 (作随机运动) 碰撞小颗粒或雾滴;
布朗运动(Brownian motion)碰撞的结果,增加了颗粒碰撞过滤介质的机会; 仅在气体中有效。

20 4,小结 过滤介质的过滤 / 分离效率由于 直接拦截 惯性撞击 扩散拦截 的共同作用而增强

21 四、过滤介质的类型 表面过滤介质: 编织网粉末烧结 深度过滤介质: 纤维材料结构 棉花 活性炭或玻璃纤维 有机合成纤维 浇铸膜结构

22 第二部分 介质过滤除菌的工艺 一、对空气除菌流程的要求 二、空气过滤除菌流程的分析 1,两级冷却、分离、加热的空气过滤除菌流程
第二部分 介质过滤除菌的工艺 一、对空气除菌流程的要求 二、空气过滤除菌流程的分析 1,两级冷却、分离、加热的空气过滤除菌流程 特点是:两次冷却,两次分离, 适当加热。

23 2,冷热空气直接混合式空气过滤除菌流程 3,高效前置过滤除菌流程
可省第二冷却分离设备和空气再加热设备,流程比较简单,冷却水用量较少,利用压缩空气的热量来提高空气温度。 3,高效前置过滤除菌流程 特点:无菌程度高

24 第三部分 介质过滤除菌的设备及计算 一、深层过滤效率和过滤器的计算
第三部分 介质过滤除菌的设备及计算 一、深层过滤效率和过滤器的计算 过滤效率:就是滤层所滤去的微粒数与原来微粒数的比值,它是衡量过滤器过滤能力的指标。

25 2,介质层厚度的计算 由(2)或(3)得 (4) 或 (5)
或 (5) 式中的N1可根据进口空气的菌体浓度、空气流量及持续使用时间算出。在设计空气过滤器时,我们常把N2/N1 =1015作为设计指标。 K值(过滤常数)与纤维介质的性质、直径、填充率、气流速度以及菌体大小有关。 对数穿透定律的校正 及计算举例 参见《发酵工程与设备》

26 二、过滤器的结构 (2)预过滤器 (3)过滤系统 1,深层棉花、活性炭过滤器 2,滤纸过滤器 3,金属过滤器 (1)过滤器
过滤系统由 金属过滤器、预过滤器及蒸汽过滤器组成。

27 三、附属设备 1,粗过滤器 2,空气贮罐 3,气液分离器 4,空气冷却器

28 第六章 要 点 1,在发酵过程中污染杂菌会造成什么损失?可以采取什么措施减少杂菌的污染? 2,灭菌的方法有哪些?培养基灭菌主要用什么方法?
第六章 要 点 1,在发酵过程中污染杂菌会造成什么损失?可以采取什么措施减少杂菌的污染? 2,灭菌的方法有哪些?培养基灭菌主要用什么方法? 3,什么是培养基的分批灭菌?说明分批灭菌的过程和注意事项。 4,画图说明几种连续灭菌的流程。 5,在空气除菌过程中介质对空气中微粒的阻拦作用原理有哪些?


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