质控图的制作 陈杰 联系： 、 Emile:

质控血清 1 ．内部对照质控血清 2 ．外部对照质控血清 外部对照质控血清是各级实验室为了监控每次检测的重 复性和稳定性以及检验试剂盒批间差异而设置的一套阴性 和阳性对照血清。设立外部对照还可以提示标本处于临界 值状态时的检验操作情况。

（ 1) 外部对照质控血清的组成 理想的外部对照应该包括阳性对照、弱阳性对照、临 界值对照和阴性对照。 在每次实验时应设置一个单一浓度水平的质控品即 弱阳性对照。这个弱阳性对照的值以设定在该试剂盒 Cut-off 值的 2 － 3 倍为宜。

（ 2 ）外部对照质控血清的来源和选择 1 ）通过向有关机构购买获得 2 ）通过实验室制备获得 ( 比较经济的方法 ) ① 混合试剂盒内部对照血清，等量分装。 ② 混合 HIV 抗体阳性或阴性人血清， 3000 转 / 分钟离心 15 分钟，用 0.2  m 生物滤膜过滤除菌后再进行 56 ℃ 30 分钟加热灭活处理。弱阳性对照可 以通过使用 HIV 抗体阴性的正常人血清梯度稀释 HIV 抗体强阳性血清并 经标定后得到。弱阳性对照的 OD 值以 2 － 3 倍于 Cut-off 为宜 。

（ 3 ）外部对照质控血清的保存 1 ）外部对照血清或血浆的一次制备量应该足够本实验 室一年使用 2 ）外部对照血清应该均一、无菌 3 ）外部对照血清标定后应该等量分装，每个分装的量 应足够一周使用 4 ）外部对照应该分类作好标记，使用不同颜色的标签 5 ）外部对照血清应该存放在－ 70 ℃，如无条件则存放 在非自动除霜的－ 20 ℃冰箱 6 ）外部对照血清一旦融解以后应该存放在 2 － 8 ℃， 一周后必须弃去，不能重新冻存。

（ 4 ）外部对照质控血清的使用 原则上每一次实验必须使用外部对照质控血清，建 立质控图，以便监控实验操作的一致性和结果的准确 性。同时可以了解各批试剂盒之间的误差 ( 批间差异 ) 。

质控图 (1) X X+SX-S X-2S X+2S

建立质控图参数 对 HIV 抗体检测 (ELISA) 外部对照质控血清的评价采用多 次测定的 OD 值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对 照 OD 值的 95 ％可信限为 x  3s 。各个外部对照的标定即确 定外部对照的均值和可信限， 对 HIV 抗体检测 (ELISA) 外部对照质控血清的评价采用多 次测定的 OD 值的均值上下各两个标准差的范围，即外部对 照 OD 值的 95 ％可信限为 x  3s 。各个外部对照的标定即确 定外部对照的均值和可信限， 可用下列几个统计学参数来确定可信限 : 可用下列几个统计学参数来确定可信限 : ① 算术平均值 ( x ) 代表一组 OD 值数的平均值。 ② 标准差 (s) ③ 变异系数 (cv) ，

次数质控血清 OD Cut-off 值 OD S/CO 值 范例：参考郑怀竞主编《免疫学检验室间质评与室内质控》， 1997 年出版。 范例：参考郑怀竞主编《免疫学检验室间质评与室内质控》， 1997 年出版。

x 计算公式为： x 计算公式为： Σx Σx x = ── x = ── N s 计算公式为： ─────── s 计算公式为： ─────── ∑( x n - x ) 2 ∑( x n - x ) 2 s = ─────── s = ─────── N cv 计算公式为： cv 计算公式为： s cv = ── x 100 % cv = ── x 100 % x

通过上表，计算 S/CO 值的均值（ x ），标准差（ s ）和变异系数（ cv ） 通过上表，计算 S/CO 值的均值（ x ），标准差（ s ）和变异系数（ cv ） x =1.72 s =0.29 cv =16.9% x =1.72 s =0.29 cv =16.9% 根据以上数据绘制室内质控框架图, 开始质量控制 根据以上数据绘制室内质控框架图, 开始质量控制 次数日期质控血清 OD Cut-off 值 S/CO 值

质控图 (Levey-Jennings 控制图 )

质控图的判定和分析 如果检验进入质控状态时，质控对照值超出  3s ， 则本次实验结果不能被接受 ( 失控 ) 。 位移：如果几个连续质控对照值 (3-5 次 ) 都落 在均值 ( 中心线 ) 的一边则称之为位移，通常表示存 在大的变化 ( 失控 ) 。 引起位移的原因有使用新批号的试剂盒、使用新 试剂、实验员的更换、孵育温度的改变、仪器 ( 移 液器 ) 故障等 。

质控图的判定和分析 趋势：当几个连续质控对照值 (5-7 个 ) 几乎按 一个方向分布时称之为趋势 ( 失控 ) ，通常由参 数的缓慢改变引起，如试剂失效和移液器逐渐 不准确等。 发生漂移和趋势的最常见的原因是试剂 ( 如 酶标记物 ) 或对照的失效。

质量控制图建立和分析的注意要点 a ．可以先进行最佳条件下的变异测定，即在最佳条件下 ( 人、 仪器、试剂、实验室等因素 ) 对同一批质控血清连续进行测定 20 次以上，获得一组数据，求 x 和 s 值。然后求出常规条件下 的 x 和 s 。如果常规条件下的 x 和 s 值与最佳条件下的 x 和 s 值 比较接近，则可以接受。若不作最佳条件下的测定，可以用本 室以往处于控制状态下的数值替代。 b ．采用 S/CO 比值制图要比单用 OD 或 A 值制图的方法给出更为 精确的评估，因为它将每次 / 每天 OD 值的浮动考虑在内。从 S/CO 质控图中可以直观地发现外部对照值的漂移和趋势。

质量控制图建立和分析的注意要点 c ． 由专人负责建立质控图，每月 ( 月末 ) 定 期召开质量控制会，讨论本月检测的质量控 制情况。检验人员在每次检验之前，了解一 下质控图的结果，做到心中有数。 d ． 建议长期和稳定地使用一种质量好的试 剂盒。

质量控制图建立和分析的注意要点 e ．使用新批号或使用不同厂家的试剂盒都必须在质 控图上注明使用日期。原则上，如果改用新批号试剂 盒，应重新制作室内质控框架图，并建议对新旧两批 试剂盒进行平行性试验。 f ． 发现全部对照值剧烈位移，立即报告室主管，分 析原因，若是试剂盒质量问题，立刻通知厂家。

质量控制图建立和分析的注意要点 h ． 外部和内部阴性对照质控血清出现高值倾向，应 该注意试剂、技术或设备出现问题 ( 如洗板机等 ) 。 i ． 实验室配制新批次的外部对照质控血清或变动外部 对照质控血清的值时，必须重新计算均值和标准差， 建立新的质控图。 j ． 操作者在测定质控血清时，发现质控血清数据违 背了控制规则，应填写失控报告单，上交室负责人， 由室负责人决定是否要发出检验报告。