实验室生物安全 和职业防护 上海市临床检验中心

涉及病原微生物实验室生物安全法 律法规与监督管理 中华人民共和国传染病防治法 法律 : 中华人民共和国传染病防治法 病原微生物实验室生物安全管理条例、医疗废物管 理条例 法规 : 病原微生物实验室生物安全管理条例、医疗废物管 理条例 传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动 物模型的暂行管理办法、传染性非典型肺炎病毒研究 实验室暂行管理办法、人间传染的病原微生物名录 规章 : 传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动 物模型的暂行管理办法、传染性非典型肺炎病毒研究 实验室暂行管理办法、人间传染的病原微生物名录 《实验室生物安全通用要求》（ GB19489 － 2004 ）、 《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（ WS 233 － 2002 ）、《生物安全实验室建设技术规范》 标准 : 《实验室生物安全通用要求》（ GB19489 － 2004 ）、 《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》（ WS 233 － 2002 ）、《生物安全实验室建设技术规范》 上海市病原微生物实验室生物安全管理实施细则、 上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范 规范 : 上海市病原微生物实验室生物安全管理实施细则、 上海市一、二级病原微生物实验室生物安全管理规范

实验室生物安全 操作者 操作对象 环境

 重硬件，轻软件  把生物安全当做科学实验之外的 “ 行政 ” 任务  谁来强制执行？ 目前存在的普遍问题

经血或体液传播的职业暴露  经皮肤或粘膜暴露  HIV 、 HBV 、 HCV 感染为主  传播方式：针刺或其他锐器损害  病毒入皮肤抓伤、皮损、擦伤、烧伤  病毒因意外溅入眼、鼻、口  三种病毒不会经空气传播

HBV 、 HCV 和 HIV 职业感染 的相对危险性 病毒HBVHCVHIV 健康工作者的血 清阳转率（ % ） 3 － 35 1 － － 0.4 每 ml 血中病 毒颗粒数 10 2 － － － 10 3 针头刺伤的 传播概率 6 － － 10 0 － 3 美国 CDC

全球卫生保健人员被针刺伤 病种 传染力 流行率 ( 中国 ) ( 中国 ) HBV 30% 14% HCV 6% 4.1% HCV 6% 4.1% HIV 0.3% <0.1% HIV 0.3% <0.1%

健康工作者 HIV 感染的职业危险 暴露类型经皮损粘膜经皮损和粘膜未知皮肤 报告数量 截 至 99 年 6 月 单次 HIV 暴露的 危险性（％） <0.03

HIV 职业暴露平均感染率  皮肤破损 0.33% （ % ）  粘膜接触 0.09% （ % ）

增加 HIV 感染的危险因素  接触血液量大，接触时间又长  受损伤口深  造成伤口的器械上有明显的血迹  器械曾插入静脉或动脉内（采血的针头）  接触的患者在事故后 60 天内死于 AIDS  HIV 培养物  病人处于急性感染与发病期  CD4 低， VL 高

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要求做的几个要素  组成生物安全组织体系  生物安全危害评估，明确危害防护 等级  建立实验室生物安全防护设施设备  建立实验室生物安全手册，包含安 全行为规范、安全操作规程、培训、 健康监护、应急处置预案

上海市临床检验实验室生物安全实施方法  实验室生物安全自我评估, 明确防护等级  向当地卫生监督部门上报备案  人员培训，合格颁上岗证  当地卫生监督部门现场检查  当地卫生监督部门批准

实验室感染取决于  病原微生物自身性质：毒力、感染量、侵 入途径  感染对象状况：免疫状况（性别、种族、 年龄、怀孕、免疫耐受、免疫抑制、疾病 等）  实验室安全防护措施力度（生物安全）： 安全操作技术、安全设备、实验室设施的 安全构造

不同病原微生物的感染剂量

实验室主要生物危害途径

实验室感染传播链及其控制手段 容器中的病原体 泄漏 预防接种 感染途径 / 感染剂量 传播 个人防护装备 易感宿主 规程 / 设备 潜伏期 传染病监测

危害评估的原则  病原微生物危害程度  不同的实验活动

病原微生物危害程度分类主要依据  微生物的致病性。致病性越强，导致的疾病越严重，其等 级越高  微生物的传播方式和宿主范围。它们可能会受到当地人群 已有的免疫水平、宿主群体的密度和流动、适宜媒介的存在 以及环境卫生水平等因素的影响  当地所具备的有效预防措施。包括：通过接种疫苗或给予 抗血清的预防（被动免疫）；卫生措施，例如食品和饮水的 卫生；动物宿主或节肢动物媒介的控制  当地所具备的有效治疗措施。包括：被动免疫、暴露后接 种疫苗以及使用抗生素、抗病毒药物和化学治疗药物，还应 考虑出现耐药菌株的可能性

《病原微生物实验室生物安全管理条例》 第一类 是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微 生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物 第二类 是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容 易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间 传播的微生物 第三类 是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况 下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有 限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效 治疗和预防措施的微生物 第四类 是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病 的微生物

不同的实验活动的危害  对于同一病原微生物而言，从事不同的实 验活动，操作者接触微生物的数量、浓度、 可能的感染途径是不同的，一旦暴露，其后 果也是不同的  对于不同的实验活动均应进行危害评估， 以指导操作者采取合适的生物安全防护

根据以上实际情况，临床微生物实验室 及免疫学病原体筛检的防护标准应该是 病原体危害程度分类 实验活动 BSL 级别 各类肠道致病菌 3 类（ VC 2 类） BSL-2 各类呼吸道致病菌 3 类（ TB 2 类） BSL-2 各类条件致病菌 3类3类3类3类BSL-2 乙型肝炎病毒 3类3类3类3类BSL-2 丙型肝炎病毒 3类3类3类3类BSL-2 爱滋病病毒 2类2类2类2类BSL-2 梅毒螺旋体 3类3类3类3类BSL-2

实验室生物安全组织体系 法人 责任部门 实验室负责人 实验室生物安全 管理员 人物

BSL-1

BSL-2  必须强调对污染的针头或利器的使用要 非常谨慎。  对易于通过气溶胶途径传播的微生物、 具有增加工作人员暴露气溶胶或高度飞 溅物的程序  二级生物安全防护水平微生物操作必需 在一级生物安全防护水平的基础之上， 增加生物安全柜、高压灭菌器、安全离 心机罩帽、防溅罩或面罩等。

BSL-2 标准的 BSL-2 实验室除了满足 BSL-1 的要求以外，在门上增 加了生物危险标志、 II 级生物安全柜。按国标（ GB ）, 还要配备高压蒸汽灭菌器、洗眼器

良好的实验室操作 技术（ SOP ）

实验室操作与技术  工作时进出受约束或受限制  禁止吃、喝、吸烟  禁止用口移液  将溅洒和气溶胶减到最少  每天对工作面消毒  将废物消毒  保持对昆虫和啮齿类动物的控制

实验室操作与技术：采用机械 式移液装置

实验室操作与技术：洗手

实验室操作与技术：微生物实验 室的准入

安全设备（初级屏障）  防护服  实验室工作 外套  手套

安全设备（初级屏障）  人员防护设备  面部保护  眼部保护

安全设备（初级屏障） 高压灭菌锅 洗眼水站

II 级生物安全柜的气流方向

II 级生物安全柜的操作

针与锋利器具的防范

特殊措施  进入的原则和手续  生物危害警告标志  针对实验室的生物 安全手册  每年更新资料培训

特殊措施  使用防水的运输容器

病毒分離時液体落下 消毒用 70 ％酒精 擦拭

双重锁定转头盖

生物安全转头 样品瓶外套是转头的一部分  样品瓶可于安全柜内打开  保证漏出的样品保留在瓶内

仪器相关危险 干燥器爆裂、瓶子碎片和感染性物质飞出 培养物搅拌器，混合器，搅拌 器 产生气溶胶、喷溅和溢出 皮下注射针头意外接种 产生气溶胶或感染性物质溢出 离心机产生气溶胶、溅出和管子破裂 超速离心机管子破裂 高速搅拌器，组织匀浆器飞沫、渗漏和容器破裂 超声波破碎机、超声波清洁器产生气溶胶、听力受损、皮炎 冻干机（冷冻干燥机）产生气溶胶、直接接触污染 水浴和沃伯格浴微生物生长，叠氮化钠和一些金属 形成爆炸复合物

Aerosol generating

操作一次可产生各种严重程度 微生物气溶胶的活动

健康和医疗监测  确保实验室人员的健康状况得到足够监测。 这样做的目的是监控因职业而导致的疾病 可通过以下工作达到上述目的：  根据需要，提供主动或被动免疫  为实验室获得性感染的早期检测提供便利  杜绝高度易感人群（如孕妇）从事高危险 性的实验室工作  提供有效的个体防护设施及规程

健康和医疗监测 医疗监测须知 姓名： 致员工： 请妥善保管此卡。当有不明原因发热时，请将此卡交 给你的医生，并通知如下人员之一。 姓名： 工作单位： 家庭住址： 家庭住址： 持卡人 照 片 医疗联系卡的推荐格式（正面）

健康和医疗监测 致医生： 持卡人工作单位是： 地 址： 电 话电 话：电 话电 话： 实验室名称： 在这里，有致病性的病毒、立克次氏体、细菌、原虫或寄生虫。 如遇到持卡人不明原因发热时，请给他的老板打电话，以了解该 患者曾暴露于何种病原体。 医疗联系卡的推荐格式（背面）

培训  必需有培训证书或通过实验室安全考试  告知实验人员要认识和控制实验室的危险因素 是预防实验室获得性感染的关键，也是预防和 控制实验室事故和意外的关键  因此，在安全措施方面的继续教育是必须的  一个有效的安全规划起始于实验室领导者，他 应确保安全的实验室操作及规程已被融合到对 员工的基本培训中  安全措施的培训应该成为实验室新员工所不可 缺少的部分