试管婴儿与生殖工程 上海医学院 细胞与遗传医学系 左 伋

INFERTILITY  Infertility is defined as no ongoing pregnancy after 9-12 months of sexual activity without contraception. There is no distinction between not using contraception and "trying" to conceive.

STATISTICS  In 1995, 15% of women of childbearing age had ever sought infertility advice, that includes medical advice, tests, drugs surgery or assisted reproductive technologies (ART).

Infertility among Married Women, by Education Level  8.5% of women without high school or equivalent  8.1% of women with just high school or the equivalent  6.6% of those who have some college, but no bachelor's  5.6% of women with bachelor's or higher

Infertile Couples  7.1% or about 2.1 million of married couples were infertile in  2.3 million were infertile in 1988, and 2.4 in 1982.

 6.1 million or 10% of married couples in 1995 had impaired fecundity (either infertile or had problems conceiving or carrying a child to term.)

Infertility by Race  7% of Hispanic women are infertile  6.4% of white women are infertile  10.5% of black women are infertile  13.6% of other groups are infertile

The causes of infertility  Male Factor: Sperm production and sperm quality.  Ovulation: Egg production, egg quality and preparation of the uterine lining for implantation.  Passage: The joining of sperm and egg in the Fallopian tubes and transport of the fertilized egg into the uterus.

 Factors causing infertility Tubal factor: 31% Endometriosis: 14% Uterine Factor: 1% Male Factor: 18% Other factors: 18% Unexplained: 15%

The National Institutes of Health found that from 1938 to 1996, sperm counts in the United States have fallen annually about 1.5%. European countries have fallen at twice that rate.

Female Age and Fertility The loss of female fertility is due to the loss of high quality eggs. The receptiveness of the uterus is not decreased. This loss of fertility magnifies the impact of any other fertility factors present.

 In 1995, there were 59,142 cycles of ART. 11,315 women had a live birth delivery through ART.

Type of ART procedures  90% in vitro fertilization (IVF)  8% gamete intrafallopian transfer (GIFT)  2% zygote intrafallopian transfer (ZIFT)  11% of ART procedures involved intracytoplasmic sperm injection to fertilize eggs (ICSI).

 One cycle of IVF costs an average of $7,800. (Includes everything from consultation to transfer)

1995 ART Success Rates CYCLES using fresh embryos from non-donor eggs: Live births per stimulation: 19.6% Live births per retrieval: 22.8% Live births per transfer: 25.1% Multiple births per transfer: 9.1% CYCLES using frozen embryos from nondonor eggs: Live births per transfer: 15.1% CYCLES using donor eggs: Live births per transfer: 5.5%

Singletons vs. Multiple Births in ART  49.8% singletons  23.8% twins  4.5% triplets or higher

辅助生殖技术  超排卵治疗的内分泌监测  体外受精和胚胎培养基  人类移植胚胎的评估和选择  人类胚胎辅助孵化技术  人类胚胎和卵子的冷冻保存  人类胚胎活检和着床前遗传学诊断  卵子胞浆内精子注射

一、人类体外受精和胚胎培养基 培养基的主要类型 简单盐溶液＋能量 复合性组织培养基（ Hams’F-10 ） 培养基的基本成分和作用 水、无机离子、气体 能量物质 （早期丙酮酸、乳酸，后期葡萄糖） 氨基酸、维生素、核酸前体、蛋白质、 激素、生长因子、缓冲系统

二、人类胚胎共培养系统  早期胚胎在体内和体外的发育 50 ％以上胚胎发育至 4~8 细胞期 （体外培养第 3 天）发生阻断现象

二、人类胚胎共培养系统  共培养系统对胚胎发育的影响 被动条件：降低 O 2 代谢水平 减少次黄嘌呤含量 控制代谢物的变化（葡萄糖￬、乳酸￪） 稳定 pH 和 O 2 ， O 2 /C O 2 主动条件：分泌抗氧化剂牛磺酸 释放低分子量组份 分泌多种生长因子 各种糖蛋白

二、人类胚胎共培养系统  共培养系统辅助细胞的建立 异体细胞：人输卵管上皮细胞 牛输卵管上皮细胞 人子宫内膜细胞 胎牛子宫细胞 自体细胞：人颗粒细胞 人卵丘细胞 人子宫内膜细胞

二、人类胚胎共培养系统  共培养系统在 IVF 中的应用 增加受精率和提高胚胎质量 胚胎活力改善 增加冷冻保存胚胎的存活率 卵细胞体外成熟和受精的改善 有助于胚胎显微操作后的修复

三、人类移植胚胎的评估和选择 胚胎活性的评估方法 胚胎的形态特征 卵子质量对胚胎的影响 精子质量对胚胎的影响 综合因素对胚胎质量的影响

三、人类移植胚胎的评估和选择  胚胎活性的评估方法 胚胎活性的直接评估（ FDA ） 胚胎活性的间接评估

三、人类移植胚胎的评估和选择  胚胎的形态特征 2~8 细胞的六级分级： 1 级最佳； 6 级 最次

三、人类移植胚胎的评估和选择  卵子质量对胚胎的影响  精子质量对胚胎的影响  综合因素对胚胎质量的影响

四、人类胚胎辅助孵化技术  透明带对于胚胎的保护作用  囊胚的扩张和自然孵化  辅助孵化的基本技术  辅助孵化的技术在 IVF 中的应用

四、人类胚胎辅助孵化技术 辅助孵化技术 侵入性辅助孵化：机械方法 化学方法 激光方法 非侵入性辅助孵化：机械方法 化学方法

五、人类胚胎和卵子的冷冻保存  胚胎和卵子的冷冻保存的原理  冷冻保护剂的作用机制  胚胎和卵子冷冻保存方法  胚胎和卵子冷冻保存的临床应用

六、人类胚胎和卵子捐献  受卵者的指征  受卵者的准备  受卵者的激素替代疗法  供卵者的来源  供卵者的基本要求  卵子捐献的临床应用  胚胎捐献的临床应用

六、人类胚胎和卵子捐献  受卵者的指征 没有自然月经周期：卵巢功能早衰 性腺发育不良 医源性卵巢衰竭 手术切除卵巢 具有自然月经周期： IVF 失败 遗传缺陷

六、人类胚胎和卵子捐献  供卵者的基本要求 年龄 经产 生理特征 血型 遗传病 传染病

七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断  适合活检的不同发育时期  胚胎活检的基本方法  着床前胚胎遗传学诊断方法

七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断  适合活检的不同发育时期 第一极体的活检 卵裂细胞的活检 滋养外胚层细胞的活检

七、人类胚胎活检和着床前遗传学诊断  胚胎活检的基本方法 吸出法 挤压法 机械分离法 疝形成法

八、胚胎增殖和克隆的方法  卵裂球分离技术和胚胎增殖  供者透明带和人工透明带  卵裂球分离技术潜在应用价值  囊胚分割技术和胚胎增殖  细胞核移植技术和胚胎增殖

九、超排卵治疗的内分泌监测  自然周期和治疗周期激素分泌的特征  诱发排卵周期卵泡发育与内分泌监测  黄体生成激素预测排卵时间

十、卵子胞浆内精子注射  辅助受精技术 PZD 、 SUZI 、 ICSI 应用概况  ICSI 适应症和精子来源  ICSI 主要步骤和技术