牛人工授精技术 延边大学农学院动物科学系 方南洙教授

培训主题 一、人工授精概念及意义 二、母牛生殖器官简介 三、母牛发情特点与发情鉴定技术 四、液氮罐保管使用常识 五、牛人工授精技术

人工授精概念 人工授精就是用器械采取公畜的精液，经过检查和处理，再用器械把精液注入到发情母畜生殖道内，以代替公母畜自然交配的一种配种方法。

什么叫黄牛冷配 就是把冷冻精液解冻后，经过检查和处理，再用器械把精液注入到发情母畜生殖道内，以代替公母畜自然交配的一种配种方法。

人工授精的优点 ①提高优良公畜的利用率。扩大受配数量，加快品种改良速度。 ②提高母畜受胎率。人工授精所用精液经过品质检查，适时掌握配种时间，增加母畜受孕机会。 ③预防疾病的传播。采用人工授精，公母畜的生殖器官不接触，防止了某些因交配而感染的疾病传播，如布氏杆菌病、颗粒性阴道炎、子宫炎、滴虫病等。 ④克服公母畜因体格大小悬殊导致交配困难。 ⑤减少种公畜的饲养头数。降低生产成本，提高经济效益。 ⑥配种不受地域限制。有效解决公畜不足地区的母畜配种问题。

母畜的生殖器官 母畜的生殖器官包括三部分 性腺：卵巢 生殖道：输卵管、子宫、阴道 外生殖器：尿生殖道前庭、阴唇、阴蒂

母牛生殖器官

母牛生殖器官

母畜的子宫颈

母牛的发情特点 初情期：母牛第一次出现发情表现并排卵的时期。 性成熟：母牛在初情期后，经一段时间，生殖器官发育成熟，发情和排卵正常，并具有正常的生殖能力的时期。 适配年龄：指适宜配种的年龄。 母牛的初情期为6—12月龄；母牛的性成熟为8—14月龄 ；母牛的初配适龄应根据其具体生长发育情况而定，一般比性成熟晚一些，体重应为其成年体重的70%左右。牛的初配适龄一般为18—24月龄；母牛一般到15—22岁 ，繁殖机能逐渐衰退，继而停止发情。

母牛发情特点 什么叫发情： 雌性哺乳动物在垂体促性腺激素的作用下，卵巢上的卵泡发育并分泌雌激素，雌激素作用于生殖道使之产生一系列变化，雌激素作用于大脑皮质，使雌性动物出现食欲不振，兴奋不安，产生性欲，主动接近雄性动物以致允许雄性爬跨、交配等外部行为的变化，这种生理状态称为发情。

发情症状 行为变化：母牛精神状态及性欲变化 生殖道变化：生殖器官变化及粘液排出 卵巢的变化：卵巢上有卵泡发育及排卵 正常的发情有以下三个主要症状： 行为变化：母牛精神状态及性欲变化 生殖道变化：生殖器官变化及粘液排出 卵巢的变化：卵巢上有卵泡发育及排卵 行为表现为兴奋不安、食欲减退、鸣叫、喜接近公牛、举腰弓背、频繁排尿，或到处走动，愿意接受公牛交配，甚至其他母牛或被爬跨。 生殖道变化：主要表现在血管系统、粘膜以及粘液的性状等方面。排卵时引起充血的血管发生破裂，使血液从生殖道排出体外。初产牛占80-90%，经产牛占45-65%。 在发情周期中，受激素的影响，生殖道粘膜上皮细胞发生一系列变化。粘液的分泌量和性质也发生变化，量由少变多，初稀薄，至排卵前粘液逐渐变稠，排卵后由 于孕激素的作用，粘液量分泌减少而变干涩。 卵巢的变化：发情开始之前，卵巢卵泡已开始生长，至发情前2-3天卵泡迅速发育，卵泡内膜增生，到发情时卵泡已发育成熟，卵泡液分泌不断增多，使卵泡容积更加增大，卵泡 壁变薄并突出于卵巢表面，在激素作用下促使卵泡壁破裂，致使卵子被挤压而排出。

母牛发情特点 --持续时间短：持续时间24-48小时，平均36小时。 --排卵在性欲结束以后：在性欲结束后10-12小时排卵。 --发情后的出血现象：有的母牛在发情结束后2-3天有出血现象，青年母牛多见，成年母牛较少。 --母牛发情行为表现比较明显：母牛发情时表现明显的“同性恋”行为，爬跨其它母牛或接受其它母牛爬跨。

发情鉴定 什么叫发情鉴定 适时配种（输精），是提高家畜受胎率的一项关键技术，因此，对母畜发情与否，输精是否适时，都要做出正确判定。这套技术称为发情鉴定。

发情鉴定的目的 1、判断母牛发情是否正常，以便发现问题，及时解决； 2、判断母牛的发情阶段，以便适时配种，提高受胎率

外部观察法--根据母牛的外部和精神状态来判断发情的状况。 发情鉴定的方法 外部观察法--根据母牛的外部和精神状态来判断发情的状况。 阴道检查法--用阴道开张器观察阴道的黏膜、分泌物和子宫颈口的变化来判断母牛的发情状况。 试情法—根据母畜在性欲上对公畜的反应来判断其发情程度。 直肠检查法--主要是检查卵巢的卵泡发育情况。 1.外部观察法:主要是根据母牛的外部和精神状态来判断发情的状况。母牛发情时，表现兴奋不安、鸣叫、游走、啃草减少，尾根举起，频频排尿，追逐和爬跨其他母牛并接受其他母牛爬跨，在栏内常站在一角，注意外界动静，放牧时常抬头张望，不太爱吃草。检查发情母牛的外阴部，可见外阴唇水肿，柔软而松驰，原有细小皱纹消失，黏膜红润，阴门口多开，并出现阴道腔，在尾上端阴门附近可看到黏液的分泌物的结块，或有透明黏液自阴门流出。 　　2.阴道检查法:用阴道开张器观察阴道的黏膜、分泌物和子宫颈口的变化来判断母牛的发情状况。不发情的母牛阴道黏膜苍白、干燥、子宫颈外口关闭干燥、紧缩成菊花。若母牛的阴道内有黏液，阴道黏膜光亮、充血、红润、子宫颈外口出现凸、开、红、湿润便是发情。 　　发情开始时，阴唇、阴道及子宫颈外口等部位充血肿胀度轻微，黏膜颜色较淡，以后随着发情的进展和性欲旺盛，充血肿胀度更甚，颜色渐深，发情末尾时，充血肿胀度又随之减退，最后完全消失，恢复正常状态。子宫颈外口的开张度，也随着发情的进展，由微开到开张，最后又逐渐缩小乃至关闭。发情开始时，黏液量少，呈透明如水样，稀薄无牵缕性，黏性不强，至发情旺盛期，黏液量增多，颜色为透明或半透明时，牵缕性很强，呈玻璃棒状较稠，转入发情末期，黏液量又减少，颜色半透明，混浊或乳白色，黏性差成糊状。 　　3.直肠检查法：主要是检查卵巢的卵泡发育情况。卵泡的发育随着母牛的发情变化分四个时期，即：弹泡期→软泡期(卵泡成熟、泡壁很薄、柔软、波动明显呈圆形或卵圆型)→软皮期。

母牛发情初期（跑栏期）发情表现 发情母牛精神敏感，耳朵竖立，眼光发贼，举动不安；单独游走，有时呆立，有时哞叫，尾高举，摆尾，不爱采食，反刍不充分，产奶量下降。主动接近公牛和逗引其它母牛，嗅其阴门，尾随或爬跨它牛，爬跨其它牛时，常有滴尿，并发出低而短的呻吟声，但不接受紧跟着它的牛爬跨，阴门开始肿胀，阴唇粘膜充血，潮红有光泽。从阴门流出少量稀薄的蛋清样或水样清亮的粘液，粘液流出时不成线，牵缕性弱，此期持续6—12小时。

母牛发情盛期（稳栏期）发情表现 发情母牛精神紧张，表现惊恐，极度兴奋，性欲旺盛，时常哞叫，举尾拱腰，频频排尿，食欲废绝，停止反刍，紧跟它牛亲密不离，嗅其阴户，互相爬跨，当爬跨它牛时，显得十分冲动，使劲作公牛交配状，并摆尾巴。被它牛爬跨时，站立不动，有的母牛常回头观望，后肢叉开和举尾。阴唇肿胀明显，皱褶展开，阴门湿润。从阴门流出大量的乳白色蛋清样透明粘液，粘稠度较大，下流时呈玻璃棒状，后呈玻璃丝状，牵缕性强。此期持续15—18小时。

母牛发情末期（过劲期）发情表现 发情母牛逐渐恢复常态，哞叫、举尾、拱腰、尿频等表现消失，恢复反刍，正常采食，已不嗅它牛的阴户，不理睬它牛。拒绝它牛爬跨，但它牛仍尾随着发情母牛，直到休情时为止。阴唇开始消肿，从阴门流出的粘液量少而呈米黄色，混浊，粘稠度大，落地成摊，如脓块状，以后逐渐由浅黄色变成灰白色，呈糊状或颗粒状。此期平均持续6—10小时。

母牛发情鉴定

如何确定母牛最佳配种时机(外部观察) 最佳时机就是母牛休情后的6—8小时内。青年母牛和营养好的壮龄母牛可早些时候输精，老龄母牛和营养较差的母牛可晚些时候输精。输精时阴道粘液由米黄色变成灰白色，呈小粒状或鳞状附着在输精器上。子宫颈口已闭锁，输精枪尖端前进到内口时有涩感，有阻力。 母牛的发情行为已消失，公牛不尾随，再过6—8小时是输精最佳时机。 具体做法即上午休情，傍晚输精，晚上休情，第二天早晨输精，如果输精后感到偏早，可再隔6—10小时补输一次。

如何确定最佳输精时机(直肠检查法) 触摸卵巢掌握卵泡发育程度，是把握输精时机的的最好方法，受胎率高。具体做法即当卵泡液充满卵泡，卵泡壁变薄，波动明显，如熟透了的葡萄，有一触即破之感，此时为最佳配种时机。输精后8—10小时再检查一次，如卵泡仍未破裂，可再补输一次。

母牛常见的几个异常发情 安静发情 断续发情 孕后发情 短促发情 发情不排卵

液氮罐保管使用常识 运输液氮罐时应注意什么 ? 液氮罐的存放有什么要求 ? 如何检查液氮罐内液氮容量？ 何时需要补充液氮？

取冻精 Removing Semen

运输液氮罐时应注意什么 运输液氮罐前，要注意封好液氮罐颈塞外面的保护盖，以防运输途中颈塞被风吹走，车内垫上防震材料，以免损坏液氮罐或影响精液质量，为了防止翻倒，须用绳子或皮带固定。搬运液氮罐要轻拿轻放，切勿横放或倒置。

液氮罐的存放有什么要求 存放液氮罐的房间应加强室内通风换气，保持空气新鲜。 液氮罐要放在干燥、通风良好的室内，下面垫上木板，离地面20—30厘米，不要放在工作室内和寝室内。

如何检查液氮罐内液氮容量 用实心塑料小棒或实心小木棒插入罐底，过5—10秒后取出，结霜的长度即是液面的高度。千万不能用空心棒、塑料管、输精器，以防液氮从管内喷出伤人。 称重：1立升液氮等于0.808千克液氮。

何时需要补充液氮 要经常称量液氮罐的重量，及时掌握液氮量的多少，当液氮量减少到总容量的1/3时，即行补充液氮。

取放冻精时应注意什么 1、取放冻精时，只能将装冻精的纱布袋或提桶提至容器的颈基部10厘米以下，不得提到容器外。如经10秒尚未取放完毕时，应将纱布袋或提桶放回液氮内浸泡一下再继续提取。 2、贮存的冻精需向另一容器转移时，装冻精的纱布袋或提桶在容器外停留时间不得超过5秒钟，如需时间过长，应直接在盛装液氮的容器中浸泡状态下处理。

输精技术 ---输精前的准备 ---直肠把握子宫颈输精法

输精前的准备 输精前要做好以下四项工作 1、母牛的准备 2、器械的准备 3、人员的准备 4、精液的准备

输精前如何做好母牛的准备 母牛输精最好在输精架内进行，把母牛保定好，尾巴拉向一侧。阴门先用温肥皂水充分洗涤，除去污垢并进行消毒，然后用温开水冲洗，用消毒抹布或消毒纸巾擦干。

输精前如何做好器械的准备 所用输精器具，必须严格消毒。输精外套应“一牛一次一套”。

输精前人员如何准备 输精员的指甲须剪短磨光，徒手操作时，手臂要充分洗涤消毒。最好戴长臂塑料手套操作。

输精前精液如何准备 冷冻精液解冻后，细管剪口要水平，不得剪斜茬，以防精液逆流，装入输精枪内套上外套备用。镜检活率不低于0.3。

什么叫直肠把握子宫颈输精法 是将一只手伸入直肠内（徒手或戴长臂手套，涂以润滑剂），寻找并握住子宫颈。另一只手持输精枪，借助进入直肠内的一只手的固定和协同动作，将输精枪插入子宫颈内，将精液输入子宫颈深处或子宫体内。

直肠把握子宫颈输精法优、缺点 优点： 1、精液可注入子宫颈深部，受胎率高。 2、母牛无痛感刺激，处女牛也可以用。 3、可防止误给孕牛输精而引起流产。 4、用具简单，操作安全方便。 缺点： 操作时由于肉眼看不见，全靠手摸，要操作熟练，初学者不易掌握。 母牛发情持续时间：一般是1~1.5天，排卵一般发生在发情结束后约10~12小时左右，在排卵前6~24小输精受胎率最高。

输精方法 首先将阴门冲洗、消毒、擦干。把细管精液从液氮罐中快速取出放入38-40℃温水中解冻，剪开装入输精枪内。用右手持输精枪，左手（戴手套）或畜主将阴门分开，左手伸入直肠内找到子宫颈，并将输精枪插入子宫颈内口1厘米时就可输精。

输精枪以向上45度的角度插入

将输精枪头放入子宫颈孔内

影响黄牛冷配受胎率的因素 精液品质的影响 母牛发情排卵机能的影响 人工授精技术水平的影响 输精时间的影响 精液品质的影响：精液的生产、运输、保管及活率、密度的检查。 --母牛发情排卵机能的影响：母牛的发情排卵机能正常与否影响着卵子的发生、排出、配子的运行、受精及胚胎发育进行。正常的生理机能有赖于合理的饲养管理、维持母牛适当的膘情，改善生活环境，适当的运动等。 人工授精技术不当，是造成黄牛冷配受胎率低的重要原因之一，清洗、消毒、精液处理、输精等各个环节紧密相连，一环扣一环，任何一个环节掌握不好，都可能造成不良后果。 输精时间的早、晚是直接关系到母牛受孕的重要一环。

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