实验诊断 laboratory diagnosis

绪 论 一、实验诊断学的基本概念 二、标本的采集和处理 三、临床应用和评价

一、基本概念 运用物理、化学和生物学等实验技术和方法进行检验（病人的血液、体液、分泌液、排泄物以及组织细胞等标本） 了解机体的功能状态，获得病因或病理变化的客观资料，为临床诊断提供科学依据 对疾病的防治、疗效观察和判断预后等方面起着重要作用。

（一）重要地位 实验诊断在临床诊治疾病的过程中发挥越来越重要的作用，成为诊断学中不可分隔的组成部分 科学技术的飞速发展、科技成果应用到实验诊断领域，给实验诊断带来日新月异的变化，检验项目不断增加，灵敏度明显提高，达到了ng甚至pg水平，许多原来无法测定的微量物质现在都可准确地测定出来，人类的疾病基因序列也被破译

（二）主要内容 临床血液学检查 临床生物化学检查 临床免疫学检查 临床病原体检查 排泄物、分泌物及体液的检查

（三）学习方法与要求 （1） 当实验室检查结果与临床不符时，必须结合病史和体格检查作系统全面的分析，必要时作动态化验检查 实验诊断虽然具有重要地位，但由于标本的采集、保存、运输的问题，试剂和仪器的稳定性问题，技术人员操作的水平问题，以及机体的个体差异等问题，往往会使检验结果出现差异。

（三）学习方法与要求（2） 了解检验方法的原理，掌握各个检验项目的适应证，重点掌握其正常参考值和临床意义，并能运用这些检验结果结合临床资料进行分析和诊断。

二、标本的采集和处理 血液标本的采集和处理 尿液标本的采集和处理 特殊项目的采集和处理

血液标本采集前病人的准备（1） 大部分的试验要求在采血前禁食12小时 避免进食后消化吸收的营养物质对化验结果的影响。但禁食时间太长，在饥饿状态下采血可使部分测定值降低。测定血肌酐，特别是测定内生肌酐清除率前必须禁肉食3天，且不能饮咖啡和茶等

血液标本采集前病人准备（2） 测定尿17-羟皮质类固醇、17-酮类固醇等需停服有色药物及激素类药物3天；测定尿儿茶酚胺、香草扁桃酸除停服上述药物外，还需停食香蕉、咖啡、巧克力等3天 病人应在安静状态下采血，避免剧烈运动，过度劳累和情绪激动等

采血的时间 为了减少由于采血时间而造成的检验结果波动，每次采血最好固定在同一时间进行 血液内的许多成分在1天之内会出现周期性的变化，皮质醇早上高、晚上低，生长激素入睡后增高，血浆蛋白夜间降低，白细胞上午比下午低。血钙中午最低。女性激素与月经的关系。

采血的体位 从卧位到直立位，所采血液标本的测定值有升高的趋势（红细胞、白细胞、血红蛋白、总蛋白、白蛋白、免疫球蛋白、胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白、甲状腺素、醛固酮、肾上腺素、肾素、总钙、碱性磷酸酶、天门冬氨酸氨基转移酶等） 直立位时静脉渗透压增加，部分水分转移到间质，血浆总量较卧位少12%左右，使血液浓缩。

采血部位 常用的采血部位是前臂肘窝的头静脉、正中静脉处 此处穿刺比较方便，疼痛也少。对正在进行静脉输液的病人应在另一侧手臂采血。若双臂都在输液，则不能在静脉输液装置的近端采血，否则所测结果易受输液成分的影响。

止血带的使用 采血时尽可能缩短止血带压迫上臂静脉的时间 系止血带3分钟后，白蛋白、钙、碱性磷酸酶、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、胆固醇、血钾、铁等浓度都可升高5%～10%，特别是AST最明显

抗凝剂的正确使用 常用的抗凝剂 肝素 是一种较常用的抗凝剂，常用于血气分析和部分生化项目测定 1g/L的肝素溶液0.5ml可使5ml血液不会发生凝固。

抗凝剂的正确使用 Na2或EDTA·K2 用于血液细胞分析和血细胞比容测定 1.5～2.2mg EDTA可阻止1ml血液凝固

抗凝剂的正确使用 草酸钾-氟化钠 主要用于测定血糖时使用 因氟化钠可抑制红细胞无氧酵解，使血标本中萄葡糖水平在2～3天内保持不变

抗凝剂的正确使用 枸橼酸钠 枸椽酸钠溶液常用于凝血因子（PT，APTT）检查 抗凝剂与血液比为1:9。用于血沉试验为0.4ml枸橼酸钠溶液加1.6ml血液

血液标本的保存和运输 血液标本采集后应尽快地送到实验室，及时分离出血清或血浆进行测定，耽误时间越少，检验结果越可靠 因为血清中K+、Cl-含量随放置时间延长而增高，但酶活性则相反。若条件限制不可能及时测定，则要注意标本的运输和保存

血液标本的保存和运输 ①防止蒸发和外溅，血样应贮存在密闭的试管中 ②避免光线照射，因有些成分如胆红素在光线照射下会分解

血液标本的保存和运输 ③不能当天测定的标本最好将标本离心，取血清或血浆置4℃冰箱低温保存（淀粉酶测定除外） 某些特殊项目如促肾上腺皮质激素（ACTH），浆胰高糖素（PG）等在室温下运输和保血存不稳定，应置冰浴中送检，然后低温离心，分离血浆冰冻保存待测

尿液标本的采集和保存 尿液标本的正确采集 留取新鲜尿液及时检查 女性留尿时应避开月经期 尿作细菌培养时应作外阴消毒，用无菌试管留取中段尿送检 否则尿液中的化学成分会变性，有形成分如管型、红细胞、白细胞易破坏，造成假阴性结果 女性留尿时应避开月经期 尿作细菌培养时应作外阴消毒，用无菌试管留取中段尿送检

尿液标本的保存和防腐剂的正确使用 留取24小时尿液或12小时尿液进行某些化验项目检查时，为防止尿液变质应加适量化学防腐剂。

常用防腐剂 甲苯 用量0.5～1.0ml/100ml尿液，适用于尿肌酐、尿糖、蛋白质、丙酮等测定。 浓盐酸 用量0.5～1.0ml/100ml尿液，适用于尿儿茶酚胺、香草扁桃酸(VMA)，17-羟和17-酮类固醇等24小时定量测定。 甲苯 用量0.5～1.0ml/100ml尿液，适用于尿肌酐、尿糖、蛋白质、丙酮等测定。

常用防腐剂 冰醋酸 用量5～10ml/24小时尿液，适用于24小时尿醛固酮测定。 甲醛 用量0.2～0.5ml/100ml尿液，具有防腐和固定尿中有形成分的作用，用于尿液中细胞与管型的保存。常用于12小时尿沉渣计数（Addis计数）测定

特殊顶目标本的采集和处理 (一）脑脊液 脑脊液标本由腰椎穿刺后取得。穿刺后应先作脑脊液压力测定，然后将脑脊液分别收集于3个无菌试管中，第一管作细菌学检查，第二管作化学或免疫学检查，第三管作细胞学检查（每管收集1～2ml，标本采集后应立即送检）

（二）胸、腹水 胸水或腹水由胸穿或腹穿后用注射器吸取。采集量一般10～20ml （分两管，一管用109mmol/L的枸椽酸钠溶液抗凝，进行生化、免疫、细胞学检查（查找胸水瘤细胞至少应送检100ml），抗凝剂的量占标本量的1/10。另一管不加抗凝剂，观察有无凝集现象发生。）

（三）骨髓细胞学检查 骨髓细胞学检查的骨髓标本由骨髓穿刺后用注射器吸取。骨髓穿刺的常用部位是髂前上棘和髂后上棘，必要时也可从胸骨穿刺获取

取材时注意（1） 抽吸骨髓时勿用力过猛，以避免骨髓标本被血液稀释 吸取骨髓的量一般以0.2～0.3ml为宜

取材时注意（2） 抽取的骨髓液立即滴于玻片上迅速推片3～5张，及时送检作骨髓细胞形态学和细胞化学染色检查。 送检同时要附上外周血的血涂片以作对照分析。

（四）血气分析 动脉血的采集和注意事项（1） 动脉血采集的部位是易于摸到的表浅动脉，常取股动脉、桡动脉和肱动脉。 取2ml的消毒注射器，抽取1g/L的肝素0.2ml，来回抽动注射器使针管内全部湿润，排出多余肝素和全部空气。

动脉血的采集和注意事项（2） 针头刺入动脉后尽量让血液自动流入，不宜用力抽吸而产生气泡 拨针后立即用小橡皮封针头用双手搓动注射器，使血液和肝素充分混匀，避免血液凝固

动脉血的采集和注意事项（3） 立即送检及时测定，否则应放冰水中保存和运送，以减少细胞的新陈代谢，影响检验结果。

三、临床应用和评价 影响检验结果的生物学因素 （一）生理因素 年龄 （一）生理因素 年龄 从胎儿出生到儿童、成年和老年的各个时期检验的正常参考值都不完全相同，不能用同一个标准来衡量。 新生儿出生的头几天红细胞计数和血红蛋白含量比成人高。 儿童血液中碱性磷酸酶含量较成人高。 老年人胆固醇含量较高所以易患动脉粥样硬化症。

性别 许多检验结果男女有较大的差别 男性肌肉比较发达，所以血液中肌酐，肌酸激酶含量较女性高。其他男性较女性高的指标有甘油三酯，γ-谷胺酰转移酶，胆红素，转氨酶，尿素，红细胞，血红蛋白等。女性比男性高的指标有高密度脂蛋白胆固醇，载脂蛋白AI，女性激素和网织红细胞等

妊娠 随着孕期的延长，孕妇各系统将发生一系列的生理性变化，如甲状腺素分泌增加，总蛋白，白蛋白含量减少，肾小球滤过率增加，尿量增多，红细胞沉降率加快，凝血因子活性增强，纤维蛋原增多，甲胎蛋白升高等

（二）生活习惯 饮 食 饮食对血液生化检验指标的影响取决于饮食的成分和进食时间。 饮 食 饮食对血液生化检验指标的影响取决于饮食的成分和进食时间。 餐后抽血检查对血脂、血糖、转氨酶、胆红素、无机磷、尿酸、尿素、总蛋白、钾、钠、钙等都有较大的影响，因此在测定这些指标时应禁食12小时。饮酒可使糖异生受到抑制，从而导致血糖降低，血乳酸，尿酸升高。长期酗酒可引起肝脏损害，γ-谷氨酰转移酶升高。

运动 由于呼吸加快，出汗较多，体液分布发生改变导致血液生化指标的明显变化。如马拉松运动员跑完全程后45分钟抽血检查与赛前相比，钾、钠、钙、碱性磷酸酶、白蛋白、血糖、无机磷、转氨酶、尿素、尿酸、胆红素等将升高1倍以上。因此采集标本前应注意休息，避免剧烈运动。

药物和毒品 药物和毒品对生化检验可带来复杂的影响，它们不仅可改变某些物质在体内的代谢过程，同时也可干扰实验过程中的化学反应，如维生素C，它是一种还原剂，可干扰萄葡糖氧化酶法测定血糖，使之降低而误认为低血糖。长期口服避孕药和雌激素类药物可使转铁蛋白、甘油三酯升高，因此在采血前应停用这药物。

药物和毒品 吗啡可使血淀粉酶、脂肪酶、转氨酶、碱性磷酸酶、胆红素等升高；使胰岛素、去甲肾上腺素等降低。大麻可使血钾、钠、氯、尿素和胰岛素等升高而使肌肝、尿酸、血糖降低。因此在评价检验结果时要了解病人是否有服药和吸毒的历史

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