第三章 中药制剂的检查

【目的要求】 掌握重金属、砷盐的检查原理和方法 熟悉《中国药典》现行版制剂通则的检查项目及特殊杂质的检查原理 了解农药残留量的检查原理和方法 了解黄曲霉毒素的检查方法 药物分析学科

中药制剂的检查项目： 制剂通则检查 一般杂质检查 特殊杂质检查 微生物限度检查 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 一、中药制剂的杂质 指能危害人体健康或影响药物质量的物质。 （一）杂质的分类 一般杂质（如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐） 特殊杂质：根据其来源、生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。 （二）杂质来源 中药材原料中带入 生产制备过程中引入 贮存过程中引起的中药制剂自身理化性质的改变 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 二、杂质的限量检查 1、杂质限量：药物中所含杂质的最大允许量，通常用%或ppm表示。 2、杂质限量检查及计算方法 1）限量检查：规定一定限度，要求所检测的样品中某组分的含量不超过此限度。 2）检查方法 对照品比较法：取一定量与被测杂质相同的纯物质或其它对照品 配制成标准溶液，与一定量供试药物的溶液，在相同处理条件下， 比较反应结果，从而确定杂质限量是否超过规定。 灵敏度法：在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，观察 有无正反应出现。 补计算公式 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 3）计算方法 补计算公式 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 例1：注射用双黄连（冻干）中砷盐限量检查 取本品0.4g，加2%硝酸镁乙醇溶液3ml，点燃，燃尽后，先用 小火炽灼使炭化，再在500～600℃炽灼使完全灰化，放冷，加 盐酸5ml与水21ml使溶解，依法检查（中国药典2000版附录Ⅸ F） 如果标准砷溶液（1µgAs/ml）取用量为2ml，计算杂质限量。 补计算公式 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 例2. 葡萄糖中重金属的检查 方法： 规定：含重金属≯百万分之五(5ppm) 例2. 葡萄糖中重金属的检查 方法： 规定：含重金属≯百万分之五(5ppm) 计算：应取标准铅溶液(10gPb/ml)多少ml？ 补计算公式 药物分析学科

§1 中药制剂杂质检查 S = = x106 =0.5g C.V L 2.0X1/106 4 例3. 溴化钠中砷盐检查 方法：中国药典规定，取标准砷溶液2.0mL(每1mL相当于1µg砷) 制备砷斑 规定：含砷量不得超过4 ppm 计算：应取供试品量(g)？ S = = x106 =0.5g C.V L 2.0X1/106 4 补计算公式 例4. 肉桂油中重金属检查 取肉桂油10ml，加水10ml与盐酸1滴，振摇后，通硫化氢气使 饱和，水层与油层均不得变色。 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 1、重金属的概念 重金属是指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用 呈色的金属. 如：Ag、Pb、Hg、Cu、Cd、Bi、Sb、Sn、 As、Ni、Co、Zn等. 重金属存在影响药物的稳定性及安全性. 铅易在体内积蓄中毒,以Pb为代表. 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （一）第一法：硫代乙酰胺法 1、原理： 2、适用范围：适用于供试品不经有机破坏，在酸性溶液中显色的重金属限量检查。 药物分析学科

§2 一般杂质检查 2 操作方法 样品管 对照管 结果观察 样品 对照 药物分析学科

§2 一般杂质检查 3．讨论 ① 标准铅溶液浓度：27ml溶液中Pb2+标准溶液10g/ml 1~2ml ②  硫代乙酰胺试液： 95版药典改用硫代乙酰胺为显色剂 ③  溶液的pH： pH在3.0~3.5时, 呈色较完全. ④  供试品溶液有颜色时的处理 a.外消色法：Ⅰ. 稀焦糖溶液调节， Ⅱ. 指示剂调节 b.内消色 药物分析学科

§2 一般杂质检查 3．讨论 药物分析学科 ⑤ 干扰物的排除方法 a.供试品中微量高价Fe3+存在 ⑤  干扰物的排除方法 a.供试品中微量高价Fe3+存在 干扰：弱酸性溶液中Fe3+氧化H2S析出S,产生混浊影响检查. 排除：加入抗坏血酸或盐酸羟胺使Fe3+还原为Fe2+. 如：葡萄糖酸亚铁中重金属的检查. b.供试品为铁盐（大量的Fe3+） Fe3+在HCl溶液中能形成配位化合物用乙醚提取 Fe3++HCl →[HFeCl6]2-（黄色） 或水层加氨试液调至碱性,残存的Fe3+可用KCN掩蔽, 按第三法检查. 如：枸橼酸铁铵的重金属检查 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （二）第二法：灼烧后检查 1、原理： 供试品先炽灼破坏后,使有机结合的重金属游离, 再按第一法 检查. 适用于绝大多数的中药 2、适用范围： 适用于供试品需灼烧破坏，取炽灼残渣项下遗留的残渣，经处理后在酸性溶液中显色的重金属限量检查 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （二）第二法：灼烧后检查 3、操作： 供试品 炭化 加热 HNO3 500-600℃ 缓缓炽灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml 供试品 炭化 加热 HNO3 500-600℃ H2SO4 除尽 放冷 完全灰化 蒸干 HCl 2ml 水15ml 中性 按第一法检查 蒸干 氨试液 注意：做空白试验 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （二）第二法：灼烧后检查 4、讨论： a. HNO3处理后,必须蒸干除尽NO. b. 炽灼温度严格控制：500-600℃ c. 含钠盐或氟的有机药物在炽灼时改用铂坩埚或硬质玻璃 (玛瑙) 蒸发皿. 如：盐酸氟奋乃静中重金属检查 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （三）第三法：硫化钠法 1、原理 在碱性介质中,以Na2S为显色剂, 使Pb2+与S2-作用生成PbS 的混悬液, 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较, 不得更深. 2、适用范围 适用于难溶于稀酸（或在稀酸中即生成沉淀）但能溶解于碱性溶液的药物中重金属的检查. 3、方法 取供试品适量,加NaOH试液5ml和水 20ml使溶解后,置纳氏比色管中,加Na2S试液5滴, 摇匀, 与一定量标准铅溶液经同法处理所呈颜色比较. 药物分析学科

§2 一般杂质检查 一、重金属检查法 （四）第四法：微孔滤膜法 1、原理 同第一法 1、原理 同第一法 2、适用范围 当重金属含量低(2-5g) 时, 在比色管中难于目视观察,采用本法. 3、方法 使重金属生 成的硫化物富集于微 孔滤膜上(铅斑)提高 检查的灵敏度. 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （一）古蔡氏法Gutzeit（法定方法） 1、原理： 初生态的氢 ① AsO33-+3Zn+9H+→AsH3↑+3Zn2++3H2O 砷化氢与溴化汞试纸作用： ② AsH3+2HgBr2→2HBr+AsH(HgBr)2 (黄色) AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3 (棕色) As5+反应速度慢，需将As5+转化为As3+ 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （一）古蔡氏法Gutzeit 1、原理： 故加入碘化钾、酸性氯化亚锡还原剂，将5价砷还原为3价砷 AsO43-+2I-+2H+ → AsO33-+I2+H2O AsO43-+Sn2++2H+→ AsO33-+ Sn4++H2O I2+Sn2+→ 2I-+Sn4+ 4I-+Zn2+→ [ZnI4]2- Sn2++Zn→ Sn+Zn2+ 促进反应向右进行 形成锌锡齐，有利于反应平稳的进行 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （一）古蔡氏法Gutzeit 2、装置： 3、操作： 药物分析学科 HgBr2试纸 ① A瓶：标准砷溶液(1µg/ml )2ml +盐酸5ml+水21ml+KI试液 5ml+酸性SnCl2试液5滴， 室温放置10min ② A瓶＋锌粒2g，接导气管C ③ 25℃ -40℃水浴45min 取出，比较砷斑颜色深浅 HgBr2试纸 醋酸铅棉60mg (装管高度6-8cm) 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （一）古蔡氏法Gutzeit 4、讨论 1） Zn粒 2）溴化汞试纸的选择 3）适宜的PH值及反应温度和时间 4） 干扰物的排除 a、供试品是硫化物,亚硫酸盐,硫代硫酸盐 干扰： 排除方法：加入浓硝酸处理 b、 供试品是铁盐(Fe3+) 干扰：Fe3+能消耗还原剂(KI、SnCl2), 并能氧化砷化氢. 排除方法：先加酸性SnCl2试液使 Fe3+ → Fe2+ 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 + 3 （二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDC法）（法定） 第一步：同古蔡氏法生成砷化氢 目视比色法 仪器分析 510nm，可定量 A s H 3 C 2 5 N S g + 6 S H A g 6 3 + s C 2 5 N 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （三）白田道夫法（灵敏度低） 1、原理：SnCl2在HCl中能将砷盐还原为棕褐色的胶态砷, 与 一定量的标准砷溶液按同法处理后进行比较, 判断供试品中砷 盐的限量. 2As 3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As + 3SnCl4 + 6H+ 棕褐色 2、对含锑药物中砷盐的检查不能用古蔡氏法,需用白田道夫法. 药物分析学科

§2 一般杂质检查 二、砷盐检查法 （四）奇列氏法（次磷酸法） 1、原理： 在盐酸酸性溶液中, 次磷酸还原砷盐为棕色的游离砷,与标 准砷溶液同法处理后比较颜色. NaH2PO2+HCl→H3PO2+NaCl 3H3PO2+H3AsO3→3H3PO3+2AS↓ 2. 特点 不受S2-,SO32-,Sb干扰 灵敏度较古蔡氏法低 药物分析学科

§2 一般杂质检查 三、铁盐检查法 第一法 硫氰酸盐法 1. 原理 铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶 1. 原理 铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶 性硫氰酸铁配离子,与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈 的颜色进行比较. 影响药物稳定性 2. 操作 4ml 25ml d.HCl 30%硫氰酸铵 过硫酸铵50mg H2O 50ml 样品 标准溶液 药物分析学科

§2 一般杂质检查 四、硫酸盐检查 1、原 理 硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液, 指示性杂质 1、原 理 硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性溶液中生成硫酸钡的白色浑浊液, 与一定量标准硫酸钾溶液与氯化钡在相同条件下生成的浑浊 比较. 2. 操作法 2ml 40ml d.HCl 25%BaCl2 5ml H2O 50ml 样品 标准溶液 浓度范围：0.1mg~0.5mgSO42-/50ml 药物分析学科

§2 一般杂质检查 五、氯化物检查 1. 原理 利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应, 生成氯化银白 指示性杂质 1. 原理 利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银反应, 生成氯化银白 色浑浊液, 与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下产生的氯 化银浑浊程度比较, 浊度不得更大. Cl- + Ag+ AgCl↓ H+ 5ml HNO3/50ml，30-40℃，置暗处反应) ※ 适宜的浓度范围：50-80 µg Cl- /50ml 药物分析学科

§2 一般杂质检查 六、干燥失重 药品在规定的条件下，经干燥后所减失的重量，包括水分 及其他挥发性成分。 检查方法 常压恒温干燥（烘干法）----受热较稳定的中药制剂 恒重：连续2次干燥后的重量差异不超过0.3mg 干燥剂干燥 ----受热易分解或挥发的供试品 硅胶，五氧化二磷，硫酸等干燥剂 减压干燥—熔点低、受热不稳定及较难赶除水分的供试品 药物分析学科

§2 一般杂质检查 七、水分测定法 检查方法 烘干法----不含或含少量挥发性成分的供试 甲苯法----含挥发性成分的供试品 减压干燥----含挥发性成分的贵重药品 气相色谱法----散剂、颗粒剂、丸剂、片剂等 各类型中药制剂中微量水分的测定 费休法 药物分析学科

§2 一般杂质检查 八、炽灼残渣 1、定义：有机物经高温炽灼后残留的非挥发性物及杂质，多为金属的氧化物或无机盐类。 2、操作：供试品1.0～2.0g →置已恒重的坩埚中 →精密称定 →炽灼至炭化→放冷 →硫酸0.5～1ml使湿润 →低温除尽硫酸蒸气→700～800℃至灰化 →精密称定 →恒重 3、注意：如需将残渣留作重金属检查，则炽灼温度必须控制 在500～600℃。 药物分析学科

§2 一般杂质检查 九、灰分测定 1、总灰分：中药经粉碎后加热，高温炽灼至灰化，则其细胞组织及其内含物成为灰烬而残留，由此所得灰分为“生理灰分”，即总灰分 2．酸不溶性灰分 中药经高温炽灼得到的总灰分加盐酸处理，得到不溶于盐酸的灰分，成为酸不溶性灰分。 注意：当灰分本身差异较大时，增加酸不溶性灰分的测定 药物分析学科

§2 一般杂质检查 十、有害元素的测定 05版药典增加“铅、镉、砷、汞、铜”的限量测定 测定方法：原子吸收分光光度法 电感耦合等离子体质谱法 测定药材：甘草、黄芪、西洋参、丹参、白芍、金银花 限 量：铅≤5ppm，镉≤0.3ppm，砷≤2ppm， 汞≤0.2ppm，铜≤20ppm 药物分析学科

§3 特殊杂质检查 特殊杂质：指在该药品的生产和贮存过程中，根据其来源、 生产工艺及药品的性质有可能引入的杂质。 西洋参中人参的检查 大黄中土大黄苷的检查 阿胶中碱性挥发性物质的检查 乌头酯型生物碱的检查 药物分析学科

§4 农药残留量的检查 常见农药的种类 （1）有机氯类：DDT、六六六等 （2）有机磷类：敌敌畏、乐果等 （3）植物性农药：烟叶、尼古丁，除虫菊酯等 （4）无机农药：磷化铝、砷酸钙等 （5）苯氧羧酸类除草剂：2，4-D；2，4，5-T等 分析方法：GC（法定方法） ，TLC 药物分析学科

§5 黄曲霉毒素的检查（食标） 黄曲霉毒素（aflatoxin） 测定方法 药物分析学科 极强的毒性和致癌性 在紫外线照射下，能发出荧光 耐热，在280℃时发生裂解 低浓度时易受紫外线破坏，被氧化或遇碱被破坏 在水中溶解度低，易溶于油及氯仿、丙酮、甲醇等有机溶剂 测定方法 总成分：微柱色谱法、 单体成分：薄层色谱法、高效液相色谱法、荧光分析法、 免疫化学分析法等 药物分析学科

§6 二氧化硫残留量测定法 蒸馏滴定法（CHP） 四氯汞钠-副玫瑰苯胺比色法 离子色谱法 示波极谱法 其他方法 药物分析学科

习 题 简述中药制剂检查包括的主要内容。 中药制剂杂质来源的主要途径是什么？ 简述砷盐检查法（古蔡法）的原理操作及注意事项。 习 题 简述中药制剂检查包括的主要内容。 中药制剂杂质来源的主要途径是什么？ 简述砷盐检查法（古蔡法）的原理操作及注意事项。 药典中收载重金属检查共有几种方法，简述每种方法的应用特点及范围。 干燥失重测定和水分测定有何区别？常用水分测定方法有哪些 ？ 药物分析学科