肿瘤学 300-500例/10万

肿瘤起源、演进、 分化及异质性 胡新荣

第一节 肿瘤的起源 一、肿瘤的组织(细胞）起源 第一节 肿瘤的起源 一、肿瘤的组织(细胞）起源 1、 已分化的组织细胞失分化而成的幼 稚细胞转变为肿瘤 2、未分化的组织内干细胞转变为肿瘤

肿瘤的组织起源举例 胃癌：胃型 肠型 混合型 脂肪肉瘤：深处，原始间叶细胞 脂肪瘤：浅处 癌肉瘤：失分化，干细胞 见于肺、乳腺、子宫、 食管、膀胱

二、肿瘤细胞如何形成 1、基因突变学说： ph’染色体t（9；22） （q34；q11），p53突变，pRB突变 体细胞突变 受精细胞突变 体细胞突变 受精细胞突变 多击多步，二次突变 2、基因表达失控学说：基因完整，仅表 达失常， 如： 蛙腺癌细胞移至受精卵发育成正常蛙 某些恶性肿瘤自发消退 恶黑 神母

三、肿瘤组织起源常用研究方法和 意义 1、方法：光、电镜，组织化学，免疫组化 2、意义：确定组织、器官来源，癌/肉瘤， 原发瘤/转移瘤 如： 鳞癌：抗角质蛋白抗体 肉瘤：抗Vimentin抗体 恶黑：黑色素染色 大肠癌、胃癌：癌胚抗原（CEA） 肝癌：甲胎蛋白（AFP）

第二节 肿瘤的发生学 一、单克隆起源学说：肿瘤组织源于一个肿瘤干细胞 第二节 肿瘤的发生学 一、单克隆起源学说：肿瘤组织源于一个肿瘤干细胞 1、多灶性细支气管肺泡癌：主体，卫星灶， 喉转移灶， 同样ras基因突变、 p53丢失 2、 表浅平坦型胃癌：X-染色体linked HAR多态性， 不同区域有相同的等位基因失活 3、大肠腺瘤、腺癌，两侧口腔癌

二、多克隆起源学说：肿瘤组织起源多个肿瘤干细胞 1、多发性大肠腺瘤：多克隆 2、部份宫颈癌：多克隆 区域性癌变学说：外界致癌因素 多个细胞同时癌变 各有独立基因改变，如： 化学诱导鼠皮肤乳头状瘤，HPV致宫颈癌，咽喉多发肿瘤（各处p53突变不同）

三、单克隆和多克隆学说的可能联系 1、发癌早期多克隆，后期生长优势克隆形成，变为单克隆 2、不同病因有不同起源方式

区域起源 单中心发源：单发灶，指向单克隆 起源 多中心发源：孤立多发灶，区域性， 成对器官、同一系统 多发肿瘤 指向单或多克隆起源

四、肿瘤克隆起源研究原则 1、克隆标记：稳定，中性 四、肿瘤克隆起源研究原则 1、克隆标记：稳定，中性 1）、X-ch. Linked AR 基因灭活 2）、PGK、G6PD、HPRT 基因的 RFLP 3）、Microsatellite polymorphysm of AR 4）、基因丢失、染色体移位、点突变 5）、Immunoglobulin Assay：B cells 6）、T Cell Receptor Gene assay： T cells

2、取材：大于一个patch，无正常细 胞污染 B C A

五、肿瘤克隆起源研究意义 诊断 ：单克隆，恶性；多克隆，良性 病因： 单克隆，示体细胞突变/基因表 达失控 多克隆，示外界病因或受精细 预防、治疗、预后：因不同病因而异

第三节 肿瘤的演进 概念：肿瘤的各种恶性性状在肿瘤 发展过程中变得越来越严重 机制：肿瘤异质性的形成 + 体内外 环境选择

一、瘤细胞增殖越来越快 G0 M D1 G2 D1/cdk4/6 G1 P15/p16 S

二、瘤细胞凋亡越来越慢 促凋基因：bcl-2 抑凋基因：P53 促、凋基因：c-myc

三、瘤细胞侵袭、转移越来越强 1、肿瘤细胞间粘附减弱 三、瘤细胞侵袭、转移越来越强 1、肿瘤细胞间粘附减弱 侵袭、转移的第一步 E-cadherin （ECD） CD44 KAI1 DCC（deleted in colorectal carcinoma）

2、肿瘤基质酶解加强 基质金属蛋白酶（MMPS）：胶原酶、明胶酶 丝氨酸蛋白酶：尿激酶 半光酸蛋白酶：组织蛋白酶B、H、L 天冬氨酸蛋白酶：组织蛋白酶D TIMP-1/-2：金属蛋白酶抑制剂

3、肿瘤细胞移动性增强 阿米巴样运动向ECM降解通道前进 nm23基因 Mts-1S Tiam-1 S-100A4

四、肿瘤细胞逃避宿主的免疫监视 机制： ①MHC分子不表达/低表达，不能有效激活T细胞 ②肿瘤细胞逃避：免疫封闭因子 ③抗原调变，如WDNM1、WDNM2丢失

五、瘤细胞DNA错配修复系统改变 hMLH1、hMLH2、hPMS1、hPMS2 突变、缺失、表达失常，造成DNA错配识别、切除、修复障碍

六、瘤细胞染色体改变 非整倍体、多倍体、丢失、转位致基因扩增、丢失、激活

七、瘤细胞生存越来越顽固 生长接触抑制丧失、生长接触依赖丧失、低血清耐受、低氧耐受、药物耐受、放射耐受

第四节 细胞分化与肿瘤 细胞分化的概念：幼稚（胚胎）细胞进行形态、结构、功能、代谢方面的成熟和特化 第四节 细胞分化与肿瘤 细胞分化的概念：幼稚（胚胎）细胞进行形态、结构、功能、代谢方面的成熟和特化 细胞分化与细胞增殖是组织、器官、个体发育的基础，两个不同但有协调的特性 肿瘤分化的概念：肿瘤干细胞进行不完全特化

一、细胞分化的基本特点 (1) 普遍性：贯通生命全程 (2) 稳定性：分化定型 (1) 普遍性：贯通生命全程 (2) 稳定性：分化定型 (3) 一定条件下可逆转：有增殖能力组织；分化逆转环境；一定的遗传改变 (4) 时空性：同源细胞在不同部位有不同的分化壮态 (5) 限制性、定向性 (6) 阶段性：纤维母细胞 生肌细胞 肌细胞

二、干细胞 概念：组织中存在的一部分未分化细胞，椐需要可增殖、分化为成熟细胞 特性： （1）不成熟性和可塑性 （2）自我更新（延续） （3）增殖和分化潜能

1、干细胞种类 胚胎干细胞 成体干细胞 全能干细胞： 胚胎干细胞 多能干细胞： 造血干细胞 单能干细胞：基底干细胞

2、研究干细胞的意义 ⑴ 研究胚胎发育和细胞分化 ⑵ 组织、器官工程和移植 ⑶ 细胞再生和组织修复 横向分化

三、细胞分化的调控机制 细胞分化是由细胞内、外环境因子通过细胞信号转导在时空上开启遗传信息（相关基因）而产生特化的过程。包括：转录、转录后、翻译、翻译后水平的多步骤调控

四、瘤细胞的分化和诱导分化治疗 瘤细胞的分化特征：分化低、形态幼稚、程度不等、具有进一步分化潜能，种类：分化缺失、分化阻断、分化异常和反（去）分化

1、肿瘤诱导分化 概念 ： 应用某些化学物质使不成熟的肿瘤细胞的恶性性状逆转，向正常细胞性状转化 基本特点：不杀伤肿瘤细胞，而是诱导肿瘤细胞分化为正常或近似正常细胞

2、肿瘤诱导分化机制 ⑴使瘤细胞分化基因重新启动而表达，恶性基因受抑制或失活 ⑵通过影响肿瘤细胞膜使肿瘤细胞恶性表型逆转 ⑶启动细胞分化基因同时启动了细胞凋亡基因，使无法逆转瘤细胞死亡

3、常见的诱导分化剂 维甲酸类：指维生素A（甲）及其天然或合成的衍生物如维甲酸（RA） 极性化合: DMSO、HMBA、DMF cAMP 环腺苷酸 干扰素（INFs）： 抗瘤酮：

第五节 肿瘤异质性 概念：一个肿瘤组织内产生不同亚克隆，各亚克隆群体的瘤细胞在生长速度、侵袭/转移能力、凋亡、分化潜能、对激素的反应、对外界压力和抗癌剂的敏感性等多方面的差异

1、肿瘤异质性的机制 遗传不稳定性: DNA物质扩增、丢失，有关基因表达异常，功能失调

2、肿瘤异质性的意义 肿瘤的特性随临床分期不同而不同 一般来说肿瘤的恶性是不断演进 转移瘤、复发瘤和原发瘤各种特性各有差异 转移瘤、复发瘤和原发瘤细胞对放疗、化疗敏感性不一 对肿瘤治疗策略的制定要考虑肿瘤 异质性

参考文献 陈意生、史景泉 主编. 肿瘤分子细胞生物学.人民军医出版社.北京.2002年,第一版. Tannock IF.,Hill RP..The Basic Science of Oncology. McGraw-Hill Companies, 1998, Third Edition.

Xinrong Hu, Tianyun Pang, Anna Asplund, Jan Pontén, and Monica Nistér Clonality Analysis of Synchronous Lesions of Cervical Carcinoma Based on X- Chromosome Inactivation Polymorphism, Human Papillomavirus Type 16 Genome Mutations, and Loss of Heterozygosity Xinrong Hu, Tianyun Pang, Anna Asplund, Jan Pontén, and Monica Nistér J. Exp. Med. 2002; 195 (7):845–854

Research Purpose To elucidate what status of clonality of cervical cancer

Cervical Carcinoma， HE Staining

Microdissections

Topography of Microdissections

Clone Markers ▲ X- Chromosome Inactivation Polymorphism ▲ Human Papillomavirus Type 16 GenomeMutations ▲ Loss of Heterozygosity

X-chromosome inactivation paterns

HPV genome mutations

LOH paterns

Clonality status of Microdissected samples

Chart of clonality status

Topography of different clones

Conclusions Cervical cancer can be polyclonal

Significances HPV is the cause of cervical carcinoma