第七章 动物细胞培养 试管婴儿及其培育 试管婴儿： 采用人工方法让卵子和精子在体外完成受精，再将受精卵继续培养发育成早期胚胎，最后植入母体发育并分娩产下的婴儿。 早期的体外受精和胚胎发育在试管内进行，所以称为“试管婴儿”。 其本质是体外受精技术和胚胎移植技术的结合（IVF-ET）。
试管婴儿 体外受精技术：（in vitro fertilization，IVF）： 是指把成熟卵母细胞或未成熟卵母细胞经体外成熟培养后，与体内或体外获能的精子在体外条件下完成受精的过程。 体外受精技术是胚胎工程的核心技术。 通过体外受精和胚胎移植获得的动物即是“试管动物”。 据世界卫生组织统计，不孕症占育龄人的10-15%。而试管婴儿越来越得到广泛的应用，据统计，目前每年全球大概有400万试管婴儿出生。但是其成功率不高，平均30-40%。其费用平均为2-3万元。
试管婴儿 试管婴儿发展史： 早在1878年，申克进行家兔和豚鼠的体外受精试验。 1944年，Rock和Menkin从133个卵子的体外受精获得4个受精卵，但只发育2-3细胞的卵裂球。 1955年，Shettles获得体外受精卵并发育到桑椹胚时期。——初步成功。 1959年，美籍华人张民觉通过体外受精获得试管家兔。——试管动物之父。
试管婴儿 1978年7月25日深夜时分，英国曼彻斯特郊外的奥德姆总医院里，一个女婴的啼哭声划破夜空，震撼了世界……她就是世界上第一例试管婴儿——路易斯.布朗。 罗伯特.爱德华兹因此获得2010年诺贝尔生理医学家。 1980年，澳大利亚；1981年，美国；1983年，日本；1985年，中国台湾；1986年，中国香港；1988年，中国大陆…… 1992年，比利时，第二代试管婴儿。 1988年3月10日，北京医科大学第三附属医院，创始人为张丽珠教授。
路 易 斯 和 爱 德 华 兹
试管婴儿 试管动物培育的基本程序： 精子的采集与体外获能处理 卵子的回收与成熟培养 卵子与精子的体外受精 受精卵的体外发育 胚 胎 移 植 哺乳动物的精子必须在子宫或输卵管内存留一段时间，并经发生一定的生理变化，才能获得受精能力，将此现象称为精子获能。精子获能是成功地进行体外受精的前提和保证。 卵母细胞的成熟培养，不论采用什么方法收集的卵母细胞都是未成熟的，在直接用于受精前应该进行体外成熟培养。 受精卵的体外发育 胚 胎 移 植
试管婴儿 体外受精的操作技术： 常规体外受精： 将获取的成熟卵母细胞和人工处理后获能的精子在合适的培养基中共培养并完成受精。 第一代试管婴儿。
试管婴儿 显微受精： 借助显微操作仪将精子注入到成熟卵母细胞实现受精的过程。 第二代试管婴儿。
试管婴儿 显微受精： 1.透明带下注射法：用微注射器将1个或多个精子直接注射人透明带下的卵间隙完成受精。 2.卵细胞质内注射法：用微注射器将单个精子直接注入到卵细胞质内使卵子受精。 透明带下注射法。这种方法的优点是对卵细胞的损伤很小，但存在多精子受精的问题。 卵浆内精子注射法可以避免多精子受精的问题。
透明带下注射 卵胞质内注射