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厦门为正生物科技有限公司 ------------钙卫蛋白检测及应用

钙卫蛋白的诊断价值 www.wizbiotech.com 肠道炎症的一种标志物;钙卫蛋白浓度的正常化是炎性肠病 完全痊愈的一项重要指标。 作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠病和癌症的患者的重 要指标; 评估和监测炎症性肠病的活动性,便钙卫蛋白对活动期CD敏 感,且与UC的内镜下诊断和组织学诊断吻合性较好; 便钙卫蛋白与溃疡性结肠炎(UC)内镜分级标准具有较好的相 关性,可客观反映UC的炎症活动情况,比血清学指标ESR和CRP 更敏感和特异; www.wizbiotech.com

钙卫蛋白的诊断价值 www.wizbiotech.com 作为标志物预测溃疡性结肠炎(UC)与克罗恩病(CD)次年复发 的敏感性分别为89%和87%;特异性分别为 82%和43%。 鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征(IBS)以及的一种敏感性 及特异性均较好的生物标志物; 作为一个非危险性和非侵害性的客观而敏感的肠炎诊断方法, 便钙卫蛋白在区别小儿功能性腹痛与炎性肠病(IBD)、鉴定 炎性活动性和在鉴定和评估小儿炎性肠病的治疗措施中尤其 突显了其临床应用价值。 方便无创的检查方法,可以弥补内镜检查痛苦大、价格高、不 宜反复检查的不足。 www.wizbiotech.com

临床应用的确定 www.wizbiotech.com 2005年3月14-17日在伯明翰召开的英国肠胃病学学会(BSG) 年会,专题讨论了炎性肠病(IBD)-钙卫蛋白-肠激惹综合征 (IBS),将钙卫蛋白作为一个新的有用的诊断参考标志,用 于: 区别IBD和IBS 评估IBD炎性活动性 评估IBD黏膜治愈情况 www.wizbiotech.com

粪钙卫蛋白作为儿童肠炎的一个标志物 粪钙卫蛋白正常化可作为一项病人炎性肠病黏膜治愈的预测 和标志指标 Test的临床应用 www.wizbiotech.com

儿童肠炎的一个标志物 www.wizbiotech.com Test在区别小儿功能性腹痛与IBD方面和鉴定小儿炎性肠病活 动性与评估小儿炎性肠病的治疗措施中很有意义,因为该实 验操作简单、无创伤,可以避免使用许多内窥镜。 尤其是对于儿童在使用内窥镜时一般都需要麻醉,这个实验 检测方法显得更具有特殊意义。 便钙卫蛋白对小儿炎性肠病的诊断结果与用于结肠和小肠炎 性疾病最好的侵入性诊断技术的结果高度相关。 www.wizbiotech.com

炎性肠病黏膜治愈的预测和标志指标 www.wizbiotech.com Roseth AG等人研究发现粪钙卫蛋白正常化可作为一项炎性肠 病病人黏膜治愈的预测指标。 Arnott IDR等综合近年来的研究认为:临床缓解不能作为克 罗恩氏病(Crohn‘s disease,节段性回肠炎)最佳的治疗 目标,因为现有的抗炎治疗常常留有低级的黏膜炎性,并有 复发的可能。 粪钙卫蛋白作为黏膜炎的指标,其浓度的正常化可作为炎性 肠病治愈和黏膜炎痊愈的更严格的鉴定指标。 Gaya DR et al等认为粪钙卫蛋白给评估克罗恩氏病活动性带 来了光明的前途。 www.wizbiotech.com

Test的临床应用 www.wizbiotech.com Fagerhol MK,Bjarnason I,Aadland E和TibbleJA等临床研 究证实便钙卫蛋白的水平反应IBD疾病的活动性, Test可以 用于鉴定IBD的治疗效应和检测复发,并证实该检测试剂盒可 用作目前临床肠疾病常用的红细胞沉降率(ESR)实验的筛选实 验,筛选出需进一步检查的病人,避免内窥镜等昂贵的并有 侵入性的检查措施。 Bjarnason I等临床研究证实该试剂盒可作为腹泻或腹部不适 的一项新的诊断工具,在区别克罗恩氏病和肠激惹综合征的 敏感性和特异性分别是100%和97%。 Aadland E等研究证实该试剂盒检测胃和结肠直肠癌的敏感性 分别是100%和90%,即比便潜血实验的敏感性高很多。 近年来,越来越多的临床医学家研究表明了便钙卫蛋白在炎 性肠病中的鉴别与诊断价值,很多文章也见诸相关国际期刊。 www.wizbiotech.com

国外相关论述 www.wizbiotech.com 美国梅奥医院Pardi等的研究显示,便钙卫蛋白 (calprotectin)是鉴别炎性肠病(IBD)与肠易激综合征(IBS) 的一种敏感性及特异性均较好的生物标志物。(Gut 2005,54∶321) 多种实验室生物标志物被用于诊断IBD,并作为评价其活动度 和严重度的指标,亦可预测缓解期患者的复发危险。如果一个 标志物能可靠地把活动期IBD与其他炎症或非炎症引起的症状 区分开,或能把克罗恩病(CD)与溃疡性结肠炎(UC)区分开,那 么它就可以用于指导治疗。此外,简单、廉价、具有敏感性和 特异性好的标志物,可有助于在临床上和试验中监测灵敏度。 www.wizbiotech.com

国外相关论述 www.wizbiotech.com Costa及其同事研究了便钙卫蛋白作为标志物在预测UC和CD复 发中的作用。钙卫蛋白可代表50%~60%的嗜中性粒细胞溶质蛋 白,排出体外后可在粪便中保持稳定数天,且对其进行化验相 对简单。 Costa等对38例处于缓解期的CD患者和41例UC患者(缓解期平 均5个月)进行研究。结果显示,基线便钙卫蛋白水平高于150 μg/g,对预测次年UC和CD病情复发的敏感性分别为89%和87%; 特异性分别为82%和43%。 www.wizbiotech.com

以往的研究已显示,便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内 镜下诊断和组织学诊断吻合性较好。 该研究结果也是对诊断IBD生物标志物的补充。 国外研究结果总结 以往的研究已显示,便钙卫蛋白对活动期CD敏感,且与UC的内 镜下诊断和组织学诊断吻合性较好。 该研究结果也是对诊断IBD生物标志物的补充。 www.wizbiotech.com

国内研究进展 www.wizbiotech.com 北京大学第三医院消化科刘文斌,吕愈敏,杨雪玲等评估了粪便钙卫蛋白测定作 为一种非侵入性方法判断溃疡性结肠炎(UC)活动性的价值,并与目前临床最常用 的客观指标红细胞沉降率(ESR)和C-反应蛋白(CRP)进行比较,同时检查血红蛋白、 白蛋白、ESR和CRP,记录患者1周内的临床表现。疾病活动性根据内镜和组织学标 准判断。 取结肠镜正常的61例门诊患者粪便样本作为对照.结果活动期UC组粪便钙卫蛋白 水平(515μg/g)显著高于缓解期(7.5 μg/g,P<0.01)和正常对照(5.7 μg/g,n=61,P<0.01),后两者之间差异无统计学意义(P>0.05);缓解期与活动期 各级(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期)差异有统计学意义(P<0.01);粪便钙卫蛋白水平与活动期UC 内镜分级显著相关(r=0.876,P<0.01),CRP和ESR与内镜分级的相关系数分别为 r=0.725(P<0.01)和r=0.302(P<0.01),低于粪便钙卫蛋白。 结论粪便钙卫蛋白与UC内镜分级标准具有较好的相关性,可客观反映UC的炎症活 动情况,比血清学指标ESR和CRP更敏感和特异;而且是一种方便无创的检查方法, 可以弥补内镜检查痛苦大价格高、不宜反复检查的不足.具有临床推广价值。 www.wizbiotech.com

国际上应用现状 www.wizbiotech.com 便钙卫蛋白对炎性肠病的发展、治疗效应、痊愈的鉴定和诊 断价值已经越来越受到医学家们的关注。 目前,美国、英国、加拿大、法国、德国、瑞士等二十多个 国家已将便钙卫蛋白作为总胃肠道疾病人群中筛查炎症性肠 病和癌症的患者的重要指标、炎性肠病活动性、痊愈的重要 标志,广泛应用于临床。 www.wizbiotech.com

钙卫蛋白快速检测卡 www.wizbiotech.com 钙卫蛋白快速检测卡是一种用于快速检测粪便中钙卫蛋白的 半定量免疫层析方法。检测粪便中的钙卫蛋白可区分不同的 肠内器官疾病 (如慢性炎症疾病、传染性疾病、息肉、结肠 癌)和肠内功能性疾病(如肠易激综合征)。 检测钙卫蛋白也是疾病活性监测(如M.Crohn或息肉切除术 后)、复发的早期检测和治疗疗效监测的理想标志物。 使用三种检测线能使内科医生区别钙卫蛋白阳性的不同程度。 www.wizbiotech.com

检测技术背景 www.wizbiotech.com 钙卫蛋白(MRP 8/14) 是一个由两个钙结合蛋白组成的异聚体 (MRP8 and MRP 14)出现在嗜中性细胞的细胞质,并通过单 核细胞膜上表达。 它由在嗜中性粒细胞中近60%可溶胞质蛋白组成并且在嗜中性 粒细胞中扮演一个中心防卫的角色。 在嗜中性粒细胞激活或单核的内皮粘附之上,钙卫细胞被释 放并且能在血清、体液或粪便作为潜在有用的临床炎症的标 志物进行检测。 这个急性时相反应蛋白在粪便显示出很好的稳定期(室温下 稳定1个星期)并且已经确定为炎症性肠病的标志物(IBD)。 它能可靠分辨出肠内器宫疾病(如慢性炎症疾病、传染性疾 病、息肉、结肠癌)和肠内功能性疾病(如肠易激综合征)。 www.wizbiotech.com

采用胶体金免疫层析法,通过包被3条不同浓度的抗体线,根 据样品与不同浓度的检测线结合,可实现半定量检测。 检测原理 采用胶体金免疫层析法,通过包被3条不同浓度的抗体线,根 据样品与不同浓度的检测线结合,可实现半定量检测。 www.wizbiotech.com

检测性能 www.wizbiotech.com 钙卫蛋白是监测疾病活性监测(如M.Crohn或息肉切除术后) 和复发的早期检测的理想标志物。 它在检测结肠直肠癌(CC)和息肉显示出高的灵敏度(CRC大肠 癌:灵敏度100%,息肉:灵敏度88%)。 钙卫蛋白可进一步适用于鉴别器官的腹泻和功能性腹泻。 www.wizbiotech.com

试剂盒的组成 试剂盒组成:由检测卡、样品稀释液 组成 www.wizbiotech.com

储存条件和样本类型 试剂储存:2-30℃ 检测使用标本:粪便 www.wizbiotech.com

挑取粪便标本 用缓冲液稀释标本并混匀 吸取稀释后样品滴加入检测窗 10分钟后观察结果 操作步骤 挑取粪便标本 用缓冲液稀释标本并混匀 吸取稀释后样品滴加入检测窗 10分钟后观察结果 www.wizbiotech.com

结果观察 www.wizbiotech.com 阴性:只在对照质控区(R和C)位置出现两条红色条带。在 检测区(T)内无红色条带出现。 阴性结果表明:样本中的钙卫蛋白含量低于15μg/g,提示样 本中的钙卫蛋白处在正常水平。 www.wizbiotech.com

结果观察 www.wizbiotech.com 阳性:对照质控区(R和C)和检测区(T)位置都出现红色条 带。其中质控区(C)条带比对照区(R)条带颜色深。 (1)当样本中钙卫蛋白浓度大于15μg/g,且小于60μg/g时 ,检测区(T)出现一条红色条带,且检测区(T)比对照区 (R)的显色强度弱;提示样本中的钙卫蛋白处在正常水平, 但存在肠易激综合症风险。 (2)当样本中钙卫蛋白浓度等于60μg/g时,检测区(T)与 对照区(R)的显色强度一致; (3)当样本中钙卫蛋白浓度大于60μg/g,检测区(T)的显 色强度比对照区(R)深;提示存在肠炎疾病风险。 www.wizbiotech.com

结果观察 www.wizbiotech.com 无效:对照质控区(R和C)位置任何一条没有出现红色条带 。 无效结果表明:可能原因是不正确的操作过程或试剂已变质 损坏。对无效结果应重新试验,重新试验时应严格按照说明 书操作。如果问题仍然存在,应立即停止使用此批号产品, 并与当地供应商联系。 www.wizbiotech.com

产品优势 www.wizbiotech.com 采用胶体金免疫层析法,操作简便、快速 有三条检测线,可实现半定量检测 使用粪便检测,标本无需特殊处理 作为溃疡性结肠炎UC的重要标志物,其稳定性优于其他粪便 标志物,检测更有意义 高灵敏度、高特异性 www.wizbiotech.com

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