CH5-2 固定化酶的性质 1. 固定化处理对酶性质的影响

Slides:



Advertisements
Similar presentations
胎儿窘迫 重点内容 ①定义; ②病因; ③病理生理; ④诊断依据; ⑤处理原则。. 一、定义:胎儿在宫内缺氧危及胎儿健康和生命者称胎儿窘迫, 多发在临产后,也可见于妊娠晚期。 二、病因:母体血氧含量不足。 1) 导致胎儿缺氧的母体因素有 ①微小动脉供血不足:如妊高征等 ②红细胞携氧量不足:如重度贫血、一氧化碳中毒等;
Advertisements

一、 一阶线性微分方程及其解法 二、 一阶线性微分方程的简单应用 三、 小结及作业 §6.2 一阶线性微分方程.
第五节 函数的微分 一、微分的定义 二、微分的几何意义 三、基本初等函数的微分公式与微分运算 法则 四、微分形式不变性 五、微分在近似计算中的应用 六、小结.
2.8 函数的微分 1 微分的定义 2 微分的几何意义 3 微分公式与微分运算法则 4 微分在近似计算中的应用.
第八章 第四节 机动 目录 上页 下页 返回 结束 一个方程所确定的隐函数 及其导数 隐函数的微分法.
肝脏谷丙转氨酶活力测定. 一、实验目的 掌握谷丙转氨酶的测定方法。 二、实验原理 谷丙转氨酶作用于丙氨酸及 α- 酮戊二酸,生成谷氨酸与丙 酮酸。丙酮酸与 2.4- 二硝基苯肼作用,生成二硝基苯腙,此 物在碱性溶液呈红棕色,与经同样处理的标准丙酮酸比色, 求得丙酮酸的生成量以表示酶的活性。
植物生理 植物细胞生理基础 同工酶. 学习目标 Click to add title in here Click to add title n here  掌握同工酶的概念。  了解同工酶的意义。
第九章 酶促反应动力学 一、化学动力学基础 二、底物浓度对酶反应速率的影响 三、酶的抑制作用 四、温度对酶反应速度的影响
分子生物学部分开发实验 植物遗传亲缘关系研究.
影响药物吸收的生理因素.
碰撞 两物体互相接触时间极短而互作用力较大
第七章 酶催化反应.
第五章 固定化酶和固定化细胞.
第三章 酶催化反应动力学(2学时) 主要内容: 酶催化反应速率与酶活的测定 底物浓度对酶促反应速度的影响
3.5.2 过氧化物交联 缩合交联的优点: 缩合交联的缺点: 如何来制备高强度的硅橡胶? 如:管材,垫圈。 基胶流动性好;易于封装,密封。
2. 酶的本质: (1) 巴斯德以前:  发酵是纯化学反应,与生命活动无关。. 2. 酶的本质: (1) 巴斯德以前:  发酵是纯化学反应,与生命活动无关。
第七章 酶 enzyme.
第6章 酶 Enzyme.
第三章 酶 Enzyme.
第3章 酶 Enzyme.
酶的概述 生物化学.
实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
第 三 章 酶 Enzyme Enzyme.
膜蒸馏技术 报 告 人: 申 龙 导 师: 高 瑞 昶.
课程安排-2015年秋学期 周数 日期 授课内容 授课形式 作业 1 绪论 讲解+视频 2 第1章 讲解+课堂讨论 3 国庆节放假 4 5
§5 微分及其应用 一、微分的概念 实例:正方形金属薄片受热后面积的改变量..
2-7、函数的微分 教学要求 教学要点.
§5 微分及其应用 一、微分的概念 实例:正方形金属薄片受热后面积的改变量..
第三章 酶 Enzyme.
                                                                                                                                                                
Presenter: 宫曦雯 Partner: 彭佳君 Instructor:姚老师
第四节 酶促反应动力学(一) 一、底物浓度对酶反应速度的影响 二、米氏公式的导出 三、米氏方程的讨论 四、米氏常数的求法
§3.7 热力学基本方程及麦克斯韦关系式 热力学状态函数 H, A, G 组合辅助函数 U, H → 能量计算
ACD/ChemSketch软件在有机化学教学中的简单应用
第 三 章 酶 Enzyme 临床生化教研室 周 琳.
酶工程原理及应用.
固定床反应器内的流体流动 催化剂的物理性状 比表面积 指每克催化剂的表面积,记为,单位为m2/g。
第四章 酶(Enzyme) 【目的与要求】 了解并掌握酶的化学本质及催化特点。 了解酶的分类、组成及命名原则。
第六章 酶工程制药.
第8章 静电场 图为1930年E.O.劳伦斯制成的世界上第一台回旋加速器.
酶与辅酶.
第 三 章 酶 Enzyme.
第3章 酶 Enzyme 主讲教师:尹燕华.
3.8.1 代数法计算终点误差 终点误差公式和终点误差图及其应用 3.8 酸碱滴定的终点误差
Three stability circuits analysis with TINA-TI
药物的跨膜转运.
WPT MRC. WPT MRC 由题目引出的几个问题 1.做MRC-WPT的多了,与其他文章的区别是什么? 2.Charging Control的手段是什么? 3.Power Reigon是什么东西?
超越自然还是带来毁灭 “人造生命”令全世界不安
第十一章 配合物结构 §11.1 配合物的空间构型 §11.2 配合物的化学键理论.
§6.7 子空间的直和 一、直和的定义 二、直和的判定 三、多个子空间的直和.
有关“ATP结构” 的会考复习.
陕西省陕建二中 单 糖 授课人:庄 懿.
第五节 缓冲溶液pH值的计算 两种物质的性质 浓度 pH值 共轭酸碱对间的质子传递平衡 可用通式表示如下: HB+H2O ⇌ H3O++B-
一 测定气体分子速率分布的实验 实验装置 金属蒸汽 显示屏 狭缝 接抽气泵.
第18 讲 配合物:晶体场理论.
海报题目 简介: 介绍此项仿真工作的目标和需要解决的问题。 可以添加合适的图片。
利用DSC进行比热容的测定 比 热 容 测 量 案 例 2010.02 TA No.036 热分析・粘弹性测量定 ・何为比热容
酶工程 Enzyme Engineering.
第二节 函数的极限 一、函数极限的定义 二、函数极限的性质 三、小结 思考题.
酶工程(二) 2019/5/16.
温州中学选修课程《有机化学知识拓展》 酯化反应 温州中学 曾小巍.
过氧化氢含量的测定.
FH实验中电子能量分布的测定 乐永康,陈亮 2008年10月7日.
本底对汞原子第一激发能测量的影响 钱振宇
第三节 数量积 向量积 混合积 一、向量的数量积 二、向量的向量积 三、向量的混合积 四、小结 思考题.
第 三 章 酶 Enzyme.
第十七讲 密码执行(1).
一元一次方程的解法(-).
Sssss.
海报题目 简介: 介绍此项仿真工作的目标和需要解决的问题。 可以添加合适的图片。
Presentation transcript:

CH5-2 固定化酶的性质 1. 固定化处理对酶性质的影响 ⑴ 构象改变、立体屏蔽 酶在固定化过程中,由于酶和载体之间相互作用,引起酶分子构象发生某种扭曲,从而导致酶与底物的结合能力或催化底物转化能力发生改变,在大多数情况下,固定化致使酶活性不同程度下降。而立体屏蔽是指固定化后,由于载体孔隙太小,或固定化的结合方式不对(如图所示)使酶活性中心或调节部位造成某种空间障碍,使效应物或底物与酶的邻近或接触受到限制。 图 固定化酶的立体屏障效应 活性中心向里 活性中心向外 从溶液酶的游离状态,到固定化酶的“局限”状态,是一个很大的转变。不仅酶分子本身,而且酶反应的环境也有所不同。因而,固定化酶的性质与溶液酶大相径庭 固定化酶的制备方法很多,酶在固定化过程中,对酶反应系统产生的影响各不相同。我们假定酶固定化之后,在载体表面或多孔介质内的分布完全均匀,我们不考虑固定化处理过程中,技术操作的问题,我们可以将固定化带来影响概括为如下三个方面: ⑶ 微扰 由于载体的亲水、疏水作用和介质的介电常数等性质,直接影响酶的催化能力或酶对效应物作出反应的能力,这种效应称为微扰。目前还不能作定量描述。实际上构象改变,立体屏蔽效应,也还不能作定量描述。近年来,关于蛋白质“可及表面”计算方法的进展,似为这几种效应的定量讨论,展示了一种前景。以上效应将具体表现在酶的动力学性质、酶的稳定性、酶促反应影响因素、乃至酶的底物专一性等方面。 ⑵ 分配效应和扩散限制 这两种效应都和微环境密切相关。所谓微环境是指紧邻固定化酶的环境区域,主要是载体的疏水亲水及电荷性质带来的影响。 分配效应 是由于载体性质造成的酶的底物或其他效应物在微观环境和宏观体系之间的不等性分配,从而影响酶促反应速度的一种效应。 扩散限制效应 是指底物、产物和其它效应物在环境中的迁移运转速度受到的限制作用。有外扩散限制和内扩散限制两种类型。前者是指物质从宏观体系穿过包围在固定化酶颗粒周围近乎停滞的液膜层(又称Nernsl层)达到颗粒表面时所受到的限制。内扩散限制是指上述物质进一步向颗粒内部酶所在点扩散所受到的限制。

CH5-2 固定化酶的性质 2. 固定化的酶性质 ⑴ 分配效应对Km的影响 这种影响通常用分配系数(ρ)来描述: ρ=[Si]/[S] (1) 式中[Si]和[S]分别表示底物或其它效应物在微环境中的局部浓度和宏观体系中的总体(或平均)浓度。 ③ 上述效应,通过提高反应系统的离子强度,可以减弱或消除。当离子强度等于载体电荷基团浓度一半时,K’m=Km/2,当离子强度远大于载体电荷基团浓度时,K’m=Km。 ④ 采用疏水性载体时,如底物为极性物质或电荷性物质,则[Si]小,K’m>Km;如底物为疏水性物 这表明分配系数的影响,是改变了Km。K’m是分配效应影响下的表观米氏常数。由式(1)和(5),可以看出[Si]<[S],则ρ<1, K’m>Km,表明固定化作用降低酶对底物的亲和力。 通过载体和底物电荷性质、离子强度和pH值对分配效应的影响讨论,可以得出一般性规律如下: ① 载体与底物带相同电荷时,相斥,[Si]<[S],K’m>Km。 对最简单的固定化酶系统而言,其动力学性态,一般仍服从米氏方程。当反应系统进行充分搅拌,消除外扩散限制影响时,只考虑分配效应的影响,则反应速度可表示如下:   Vmax[Si] v= (2) Km+[Si] Vmax[S] ρ = (3) Km+[S] ρ Vmax[S] Vmax[S] = = (4) Km/ρ+[S] K’m+[S] [K’m= Km/ρ] (5) ② 当载体带正电荷时,局部H+ 浓度低于总体浓度,[Si]变大,K’变小,即酶活力一pH曲线向酸性方向偏移,亦即最适pH向酸性方向偏移;反之,离子载体将向碱性方向偏移,如图所示。 1. 载体带正电荷, 最适pH向偏酸性偏移; 2. 游离酶的最适pH 3.载体带负电荷, 最适pH向偏碱方向偏移; V

CH5-2 固定化酶的性质 2. 固定化的酶性质 ⑵ 扩散限制效应 酶固定化之后,由于扩散限制,使得酶往往不能得到宏观体系相同水平的底物,因而观测到的实效反应速度,常低于理论预测的水平。对于这种影响,通常引用实效系数ηO进行定量讨论。 v=ηOvp ηO = v /vp (1)   式中v为实效反应速度,vp为理论预期反应速度,即由溶液酶的米—孟氏方程确定的速度。 Vmax[S] Vmax[S] 由 v= =ηO (2) Km+[S] Km+[S] 如前所述,扩散包括外扩散和内扩散两方面。 外扩散实际上包括分子扩散和对流扩散两部分。在固定化酶反应操作中,可以通过搅拌混和而消除或削弱其限制作用。动力学分析指出,外扩散限制效应影响下,酶反应实效速度一般低于酶促转化动力学规定的速度。因此,这种扩散限制可以看作是一种抑制效应,可称为扩散抑制。 内扩散限制对酶反应动力学的影响,在某种程度上比外扩散限制更突出,更重要。动力学理论分析所得出的一些主要结论有以下三点,可以用定性的语言来描述。 ① 底物和其它效应物分子量对扩散速率的影响分析表明,一般情况下,固定化酶作用于高分子量底物比低分子量底物的实效反应速度下降程度比溶液酶更大。许多实验结果与此理论分析是一致的。 ② 载体结构的影响分析表明,内扩散限制取决于载体的孔隙率、孔隙半径、孔隙曲折程度。即:底物的内扩散系数与载体孔隙率成正比,与底物在宏观体系中固有的扩散系数成正比,与载体孔隙的曲折系数成反比,与载体膜厚度或载体颗粒半径的平方成反比。实验支持了这一理论分析。 ③ 内扩散限制与酶反应固有速度有关。即是说固有反应速度vp 大,酶反应的底物转移系数也大,当[S]小于0.1 Km时,ηO大,则固定化酶反应速度也相对大。

CH5-2 固定化酶的性质 3. 固定化的酶催化条件 ⑶ 反应的最适pH值变化 许多实验证明,酶固定化后的反应最适pH值会发生不同程度的变化。例如,天冬氨酸酶固定于疏水载体N—烷基琼脂糖珠之后,酶的最适反应pH与液酶相比,向碱性区移动了0.4个pH单位,(为pH8.9马林等,1991)。 胰蛋白酶用戊二醛固定于脱乙酰壳聚糖载体后,最适pH范围加宽,由液相酶的pH8.0变为pH7.0—9.0(隋德新等,1991)。另外也有实验证明固定化酶最适pH移向酸侧的。 ⑷ 反应最适温度的变化 固定化酶的最适反应温度,在很多情况下是高于游离酶的。同上实验的固定化天冬氨酸酶最适反应温度提高了5℃,为50℃;胰蛋白酶也提高了5℃,为60℃,而且即使在70℃仍有较高的活性。用CM—纤维素叠氮衍生物固定化的胰蛋白酶和糜蛋白酶的最适温度则比游离酶高5~15℃。也有固定化酶的最适温度不变的,例如壳聚糖固定化胃蛋白酶。 ⑴ 酶活力回收率 游离酶经过固定化以后,酶活力往往下降。固定化酶所保留下来的酶活力与游离酶在固定化之前的酶活力之比,称为该酶活力回收率,也叫固定化效率、残存活力等。在不考虑扩散限制影响的情况下,固定化酶的酶活力回收率可以通过实验测得 由下式求得:   V’m .Bim Fim % = × 100% Vm .B 式中Fim为活力回收率(%),B为固定化前所用的游离酶溶液体积;Bim为制得的固定化酶湿体积;Vm 为固定化前的酶的最大反应速度;V’m 固定化酶测得的表观最大反应速度。 ⑵ 底物专一性变化 对于作用于大分子底物的酶,当其固定于水不溶性载体之后,往往由于空间障碍,而使酶对分子量大的底物的催化活性大大下降。例如,糖化酶用CM一纤维素经化学法共价固定化后,对分子量为8000的直链淀粉的催化活性下降23%,而对分子量为500000的直链淀粉的催化活性下降85%一87%。 关于固定化酶收率问题,有不同得报道,上述方法考虑了在固定化处理过程中,有未被固定化的酶蛋白、在固定化过程中失活的酶蛋白以及在固定化后Kcat的变化(降低或升高); 而另一种方法是:   V’m .Bim Fim % = × 100% Vm .(B-B’) 式中符号与上式相同,B’为固定化处理后,回收的未固定的酶蛋白的量。实际上这种方法,只考虑了在固定化处理过程中,固定化方法对酶蛋白构型、活性中心等的影响,把未被固定化的酶蛋白作为回收考虑。 固定化酶的话力回收率因所采用的固定化方法而异。一般来说,Fim 值按下列固定化方法顺序递减: 吸附法>凝胶包埋法>微型胶囊包埋法>交联法 例如,李增吉等(1993年)报道,用DEAE—纤维素直接吸附天冬氨酸酶,酶活力回收达90%;以聚乙烯基吡啶与聚甲基丙烯酸复合物包埋同一酶,当加酶量为每1克复合物8.40mg和16.8mg时,酶活力回收分别可达87%和94%。姜涌明等(1993年)用壳聚糖作载体,戊二醛作交联剂,分别对木瓜蛋白酶、AS1.398中性蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶进行固定化,在最佳条件下,固定化酶的活力回收率分别为47%、74%、50%和55%。

CH5-2 固定化酶的性质 3. 固定化的酶催化条件 ⑸ 米氏常数变化 酶被固定化后,米氏常数的变化前已推导,下表所列固定化酶的K’m值与游离酶的Km值之比值: 酶 载 体 固定化方法 底 物 K’m/ Km 无花果酶 肌酸激酶 天冬酰胺酶 木瓜蛋白酶 CM-纤维素 尼龙 火棉胶 肽键结合法 微囊 吸附 苯甲酰精氨酸乙酯 ATP、肌酸 Asn 苯甲酰精氨 0.9 10 102 1.8 一般来说,酶在固定化以后,一般都表现为Km值增大,即K’m/Km大于l。

CH5-2 固定化酶的性质 3. 固定化的酶催化条件 ⑹ 最大反应速度的变化 固定化酶的最大反应速度(V’m)与游离酶的Vm值大多基本相同, 事实上,对于最大反应速度的比较是很难进行的,因为Vm与反应体系中的加酶量有关,单纯Vm的比较,也难以说明什么问题,最客观的比较参数应该是Kcat 但到目前笔者尚未收到有关研究资料报道。

CH5-2 固定化酶的性质 4. 固定化酶的稳定性 ⑴ 固定化酶的热稳定性 ⑶ 固定化酶对蛋白酶的稳定性 一般来说,酶固定化以后,增强了对蛋白酶的抵抗力。例如用尼龙或聚服膜包埋,或用聚丙烯酰胺包埋的天冬酰胺酶,对蛋白酶极为稳定,而游离酶在同样条件下,几乎全部失活。据认为,这可能与固定化酶的载体不允许大分子酶蛋白透过有关。 ⑴ 固定化酶的热稳定性 大多数酶经固定化以后,热稳定性提高。 例如,乳酸脱氢酶、脲酶、氨基酰化酶、胰蛋白酶等,固定化后,热稳定性都比游离酶高; 也有固定化之后耐热性反而下降的例子。 DEAE—纤维素离子交换吸附的转化酶,40℃加热30分钟,其剩余活力为4%,而游离酶,在相同条件下其活力为100%。 ⑷ 固定化酶的操作稳定性和贮藏稳定性 大多数酶固定化以后,操作稳定性和贮藏稳定性都明显提高。这对工业生产是很重要的有利性质。例如三酯酸纤维素包埋的转化酶,在25℃操作530日,活力仅丧失一半。重氮化结合于多孔玻璃的葡萄糖异构酶,60℃下的半寿期为14天。一般说来,操作稳定性要有一个月以上的半寿期,才有工业应用价值。 贮藏稳定性下降的例子也存在。游离核酸酶4℃下保存一周,活力不减;而共价固定化酶(载体苯乙烯马来酐)则丧失50%的活力。 ⑵ 固定化酶对化学试剂的稳定性 大多数情况下,酶固定化之后,增强了对化学试剂的耐受力。例如氨基酰化酶,用DEAE—葡聚糖交换吸附法制成固定化酶后,在6mol.L—l尿素、2mol.L—l中,保存活力分别为146%和117%;而游离酶在相应条件下,保存活力仅9%和49%。CMC偶联的胰蛋白酶,在3mol.L—l 脲中的保存活力为120%,游离酶只60%。尿素、盐酸脲这样的蛋白质变性剂,不仅没有损失固定化酶的活性,反而提高酶活性的现象,据认为可能与酶的柔顺性增加有关。个别酶如葡萄糖淀粉酶,固定化以后,对某些抑制剂更为敏感。

CH5-2 固定化酶的性质 5. 固定化酶稳定性的途径 探讨固定化过程增强酶稳定性的机制,从中寻求提高固定化酶稳定性途径,是值得重视的课题,不少研究者已在这方面作了有益探索。初步归纳有以下几点。 ⑶ 添加隋性蛋白质 研究固定化葡萄糖氧化酶的稳定性指出,在固定化过程中,以1:10(酶:Hb)的比例添加血红蛋白,提高酶活性效果最为明显,这可能是惰性蛋白质提供了对酶更为有利的微环境之故。 ⑸ 同时固定化能消除产物抑制的酶 葡萄糖氧化酶氧化葡萄糖的产物之一为H202,易使该酶钝化,若同时固定化葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化氢酶(Cat),当Cat/GOD为27时,固定化双酶,使葡萄糖氧化酶半寿期延长了12倍。25℃连续使用36小时活力不变,半寿期达1155小时(约:,48天)。 ⑷ 增强载体凝胶多孔性和结构有序性 研究卡拉胶的结构与其包埋的异构酶热稳定性的关系时,发现含硫酸根多的卡拉胶,具有较好的孔隙性和结构上的有序性。而这种有序性与酶对底物的亲和力呈正相关。在制备固定化酶时,添加氨基葡萄糖,可提高胶的结构有序性,同时得到了理想的酶稳定性。 ⑵ 固定化酶与底物形成复合物 研究固定化多核苷酸磷酸化酶微环境对酶稳定性的作用时,证明固定化酶与其反应产物大分子核酸形成的复合物,对酶的稳定性起很大的作用。 在实际工作中,经常在固定化处理时,先将酶和底物结合,以酶-底物复合物的形式进行,获得的固定化酶的收率和稳定性都有明显改善。 ⑴ 用化学修饰增加与载体相反的电荷 例如用乙酰酐和琥珀酰酐作为酶的酰化剂,酶经酰化后与阴离子交换剂DEAE—纤维素结合。如此制备的固定化葡萄糖淀粉酶,55℃糖化可溶性淀粉,经7.5小时,酶活力保留71%,而未经酰化的固定化酶,只保留17%的活力。

CH5-3固定化酶反应器 1.固定化酶反应器类型 酶反应器是以酶作为催化剂进行反应所需的设备。性能优良的反应器,可大大提高生产效率。 酶反应器的形式很多,根据进料和出料方式,可概括为两种类型: 分批搅拌式反应器(BR)与连续流式反应器(CFR)。 后者又有两种基本形式:连续流搅拌桶(罐)反应器(CST)、复合搅拌反应器(CSR)、填充床反应器(PR) 和流化床反应器(FBR)。

CH5-3固定化酶反应器 1.固定化酶反应器类型

CH5-3固定化酶反应器 1.固定化酶反应器类型 ⑴ 分批搅拌反应器 ⑵ 填充床反应器 这是当前采用最多的一种反应器形式。床内通常用颗粒状或片状固定化酶填充,也可平行地填充各向异性的半透性中空纤维;或者作成管状,内部填充酶膜、酶片等。运转时,底物按照一定方向以恒定流速通过反应床。根据底物流动方式,又有下向流动,上向流动和循环法之分。工业生产中,液流方向常用上向方式,避免下向流动的液压对柱床的影响。对反应产生气体者尤应注意。 ⑶ 流化床反应器 和连续流搅拌桶反应器一样,是让适量的颗粒状酶悬浮于反应床中,但不搅拌,而是通过向上的底物流,达到混合的目的。因此,流速应以能使酶颗粒不下沉,而又不致使颗粒溢出反应床为度。 ⑴ 分批搅拌反应器 这类反应器结构简单,不需特殊装置,适于小规模试验。目前我国酶反应器主要用这种形式的反应器。用溶液酶或粗酶制剂催化时,酶一般不回收,待反应转化为一定程度后,直接加热或用其它方法使酶失效除去。这种反应器在工业生产中,很少采用固定化酶,因为在反复过滤或离心回收过程中,容易造成酶失效损失。

CH5-3固定化酶反应器 2.固定化酶反应器的选择 ③ 酶的动力学特性 在填充床反应器、流化床反应器中,酶催化反应速度直 接受到底物在反应器的流速有关,换个角度讲是底物在 反应器中的保留时间问题;另外当酶催化反应速度受催 化产物的抑制时,采用填充床反应器效果明显优于其它 两者。 ④ 固定化酶的稳定性 这里考虑的稳定性问题,主要是考虑酶蛋白固定化处理 后与载体结合的稳定性问题,如果结合不够紧密、牢固, 就不宜采用分批式反应器,以免在应用过程中,由于搅 拌,使酶蛋白脱离载体。 酶反应器的选择主要考虑以下几个方面的问题: ① 酶的应用形式 颗粒状或片状固定化酶对可以选择分批式反应器或填充床反应器但对于膜状或纤维状固定化酶却只适用于填充床反应器,此时要求固定化酶的载体必须具备一定的刚性,否则在使用过程中,容易受流体压的影响出现堵塞现象。 ② 底物的物理性质 一般情况下,酶催化作用底物包括三种情况,即可溶性液体、颗粒状悬浮液体和胶状液体;对于可溶性溶液状态的底物选择酶反应器时,不受任何限制;而对于后两者,只能选择分批式和流化床反应器。