猪健康养殖的营养调控 谯仕彦 现代农业技术体系北京市生猪创新团队 2011-01-08 石家庄.

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猪健康养殖的营养调控 谯仕彦 现代农业技术体系北京市生猪创新团队 2011-01-08 石家庄

主要内容 日粮能量水平与猪生产性能 日粮蛋白质水平与仔猪生产性能和肠道健康 功能性氨基酸与母猪繁殖性能和仔猪肠道屏障功能 生长肥育猪低蛋白质日粮研究 微生物制剂、抗菌肽对猪肠道健康的调控

一、日粮能量水平与猪的生产性能

Schneider对赖氨酸能量比的研究 (J. Anim. Sci., 2010, 88:137-146) 设计了4个试验 试验一、360头仔猪,起始体重10.2 kg 试验二、351头仔猪,起始体重9.3kg 试验三、350头仔猪,起始体重9.4kg 试验三、350头仔猪,起始体重7.5kg

试验一结果: 日粮标准可消化赖氨酸对培育猪生长性能的影响 日粮SIDLys水平 (%) 0.99 1.07 1.15 1.22 1.30 ADG, g 547 556 574 587 586 ADFI, g 909 887 900 912 896 增重/饲料 0.60 0.63 0.64 0.65 0.66 SID采食量, g/d 8.98 9.45 10.31 11.15 11.66 21天试验, 日粮CP19.8%

试验一结果: 日粮日粮能量浓度对培育猪生长性能的影响 日粮ME水平 (Mcal/kg) 2.95 3.09 3.24 3.38 3.52 ADG, g 573 607 597 585 596 ADFI, g 1058 1019 966 923 896 增重/饲料 0.55 0.61 0.63 0.64 0.66 SID采食量, g/d 13.65 13.17 12.52 11.98 11.66 21天试验, 日粮CP19.8%

试验二结果: 日粮标准可消化赖氨酸对培育猪生长性能的影响 日粮SIDLys水平 (%) 1.11 1.19 1.26 1.34 1.42 ADG, g 555 573 588 598 ADFI, g 805 800 783 795 增重/饲料 0.70 0.72 0.73 0.76 SID采食量, g/d 8.93 9.53 10.14 10.49 11.29 21天试验, 日粮CP 21.6%

试验三结果: 日粮SID Lys/ME对培育猪生长性能的影响 日粮SIDLys/ME水平(g/ Mcal ME) 3.10 3.35 3.60 3.85 4.10 2.95 ME, Mcal/kg; 18.3% CP ADG, g 538 558 598 573 591 ADFI, g 1001 994 1035 966 1027 增重/饲料 0.54 0.57 0.59 0.60 3.29 ME, Mcal/kg; 21.1% CP 547 594 589 565 570 923 930 940 891 879 0.65 0.64 0.66 21天试验

试验四结果: 日粮SID Lys/ME对培育猪生长性能的影响 日粮SIDLys/ME水平(g/ Mcal ME) 3.50 3.75 4.05 4.29 4.50 2.95 ME, Mcal/kg; 20.2% CP ADG, g 449 455 470 503 509 ADFI, g 727 719 751 773 744 增重/饲料 0.62 0.64 0.63 0.66 0.70 3.29 ME, Mcal/kg; 22.8% CP 466 482 478 504 479 686 681 671 676 652 0.68 0.71 0.72 0.75 0.74 21天试验

日粮ME水平对8-15kg断奶仔猪生长性能的影响 ME (Mkcal/kg) 3.2 3.25 3.3 3.35 SEM 日增重 (g/d) 580 586 609 600 13 日采食量 (g/d) 910 879 874 848 11 增重/饲料 (g/g) 0.64 0.66 0.70 0.71 0.01 Li P. F, X. X. Piao, et al. 2010

日粮ME/Lys对8-15kg断奶仔猪生长性能的影响 (Mcal/g) 3.1 3.3 3.5 3.7 3.9 4.1 日增重 (g/d) 577 596 617 628 639 629 日采食量 (g/d) 1029 1018 1020 1017 1034 1027 增重/饲料 (g/g) 0.56 0.58 0.61 0.62 Li P. F, X. X. Piao, et al. 2010

日粮能量水平对20-50kg 生长猪生产性能的影响 日粮能量含量 NE 2280 2330 2380 2430 2490 SEM P值 DE 3240 3300 3370 3430 3490 平均始重(kg) 20.82 20.74 20.81 20.72 20.84 0.05 0.99 平均末重(kg) 56.67 55.28 55 56.26 56.41 0.74 0.93 日增重(kg/d) 0.80 0.77 0.76 0.79 0.02 0.22 采食量(kg/d) 1.55 1.47 1.45 1.57 1.56 增重/饲料 0.52 0.53 0.50 0.51 0.03 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2009;CP,18%;Lys, 1.0%

日粮能量水平对20-50kg 生长猪胴体品质的影响 DE,MJ/kg 13.62 13.87 14.12 14.37 14.62 SEM P ANOVA Linear Quadratic SW, kg 54.17 51.50 53.33 50.67 1.60 0.23 0.32 0.54 HCW, kg 33.87 31.05 32.98 33.47 30.27 1.58 0.11 0.20 0.40 DP, % 62.47 60.39 61.79 61.69 59.62 1.16 0.16 0.34 10RBD, cm 0.70 0.65 0.71 0.89 0.09 <0.01 0.10 LRBD, cm 0.60 0.58 0.64 0.77 0.61 0.08 LMA, cm2 5.60 5.94 6.91 5.50 5.58 0.59 0.01 0.66 0.07 FFL,kg 16.40 15.49 16.33 15.62 14.85 0.04 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2009;CP,18%;Lys, 1.0%

50-80kg生长猪的生产性能 日粮能量含量 NE 2280 2330 2380 2430 2490 SEM P值 DE 3240 3300 3370 3430 3490 平均始重(kg) 56.11 57.58 56.43 58.25 56.42 1.83 0.995 平均末重(kg) 日增重(kg/d) 0.64 0.65 0.69 0.72 0.09 0.046 采食量(kg/d) 1.92 1.88 1.89 1.95 0.02 0.701 饲料/增重 3.00 2.89 2.95 2.84 2.55 0.04 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2008

50-80kg生长猪的胴体品质 日粮能量含量 NE 2280 2330 2380 2430 2490 SEM P值 DE 3240 3300 3370 3430 3490 屠宰体重(kg) 82.60 80.00 82.80 0.68 0.657 屠宰率(%) 62.20 66.31 61.28 62.84 65.09 0.45 0.017 第6、7肋间背膘厚(cm) 1.34 1.43 1.60 1.89 2.17 0.05 <0.01 第10肋背膘厚(cm) 1.22 1.08 1.26 1.48 1.69 0.06 0.047 最后肋背膘厚(cm) 0.94 1.10 1.17 1.30 1.32 0.188 眼肌面积(cm2) 27.88 27.09 26.48 25.68 24.07 0.57 0.238 无脂瘦肉重(kg) 27.79 28.73 27.02 26.47 26.37 0.25 0.008 无脂瘦肉增重(kg/d) 0.38 0.42 0.36 0.34 0.33 0.01 0.009 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2008

80-110kg肥育猪的生产性能 日粮能量含量 NE 2280 2330 2380 2430 2490 SEM P值 DE 3240 3300 3370 3430 3490 平均始重(kg) 78.65 78.94 78.39 78.29 78.61 1.35 0.99 平均末重(kg) 日增重(kg/d) 0.92 0.95 0.98 1.00 1.02 0.02 0.299 采食量(kg/d) 3.10 2.98 2.96 2.94 2.90 0.03 0.335 饲料/增重 3.42 3.17 3.02 2.95 2.85 0.06 0.046 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2008

80-110kg生长猪的胴体品质 日粮能量含量 NE 2280 2330 2380 2430 2490 SEM P值 DE 3240 3300 3370 3430 3490 屠宰体重(kg) 112.0 111.0 113.0 110.0 0.59 0.384 屠宰率(%) 65.49 68.42 68.13 67.72 68.57 0.38 0.103 第6、7肋间背膘厚(cm) 1.64 1.82 1.60 1.65 1.62 0.08 0.885 第10肋背膘厚(cm) 1.28 1.33 1.37 1.55 0.05 0.509 最后肋背膘厚(cm) 1.01 1.10 1.13 1.16 1.35 0.04 0.110 眼肌面积(cm2) 36.44 36.14 35.27 34.84 33.04 0.66 0.527 无脂瘦肉重(kg) 38.84 39.75 40.07 38.63 38.25 0.28 0.245 无脂瘦肉增重(kg/d) 0.41 0.45 0.46 0.39 0.01 0.257 楚丽翠、易学武、谯仕彦,2008

二、日粮蛋白质水平与仔猪的肠道健康

日粮蛋白水平对10-20kg仔猪生产性能和粪便指数的影响 指标 日粮蛋白质水平(%) 22.4 20.4 18.4 16.9 ADG(g) 642 661 690 663 ADFI(g) 959 1039 1061 1048 Feed/gain 1.50 1.58 1.54 各种粪便所占比例(%) 硬粪 81.9 82.0 95.4 89.0 软粪 14.7 14.5 4.1 9.0 液体状粪 3.4 3.5 0.5 2.0 排泄氮(g/d) 10.7 9.4 6.8 5.1 沉积氮(g/d) 17.8 17.7 18.5 15.6 饮水量(g/d) 1941 1887 1867 1645 排尿量(g/d) 757 643 625 481 Bellego 和 Noblet, 2002

日粮蛋白水平对6-15kg仔猪生长性能和粪指数的影响 日粮DE水平(%) 23.1 21.2 18.9 17.2 SEM P值 始重(kg) 6.80 6.75 6.72 0.03 0.935 末重(kg) 10.52 10.61 10.27 9.65 0.28 0.042 ADG(g/d) 266 275 252 209 17 0.027 采食量(g/d) 357 370 342 307 22 0.134 饲料/增重 1.35 1.34 1.36 1.49 0.04 0.036 粪指数 0.61 0.49 0.42 0.38 0.02 0.015 血浆尿素氮(mg/L) 139.3 94.4 80.4 60.5 5.8 <0.01 Y. L. Yao and S. Y. Qiao, Livestock Science, 2007

日粮蛋白水平对6-15kg仔猪肠绒毛发育的影响(um) 日粮DE水平(%) 23.1 21.2 18.9 17.2 SEM P值 十二指肠 绒毛高度 454 461 457 433 7.5 0.016 隐窝深度 186 179 190 180 4.5 0.717 高度/深度 2.45 2.57 2.41 0.08 0.575 空肠 436 429 419 393 8.8 0.017 197 192 182 7.7 0.509 2.21 2.26 2.18 2.16 0.12 0.887 回肠 399 395 400 386 7.9 0.451 181 176 189 175 5.8 0.194 2.20 2.24 2.19 1.0 0.437 Y. L. Yao and S. Y. Qiao, Livestock Science, 2007

日粮蛋白质水平对6-15kg仔猪粘膜蛋白和二糖酶活性的影响 日粮DE水平(%) 23.1 21.2 18.9 17.2 SEM P值 粘膜蛋白含量(mg/g粘膜) 55.9 56.5 54.2 51.8 3.1 0.078 小肠二糖酶活性 乳糖酶 39.7 35.6 29.5 2.0 0.016 蔗糖酶 55.2 50.7 43.7 2.1 0.015 麦芽糖酶 85.3 87.0 86.9 85.7 2.4 0.753 Y. L. Yao and S. Y. Qiao, Livestock Science, 2007

日粮蛋白质水平对断奶仔猪生产性能和肠道健康的影响(Opapeju等, 2009) 40头杜 ×大 ×长仔猪, 17 ± 1 d断奶, 体重5.32 ± 0.24 kg ,2个组,每组5圈,每圈5头 处理1日粮CP水平,22.5%;处理2日粮CP水平17.6% CP 试验期14天,第8天用 5 × 1010 cfu/mL的大肠杆菌口服感染, 感染后1、3、7天屠宰 Opapeju et al., 2009. J. Anim. Sci.

结果:生产性能 Item 22.5% CP 17.6% CP SEM Initial BW, kg 5.34 5.30 0.24 Final BW, kg 8.51 8.07 0.30 ADG, g d 1 to 7 201a 147b 8.5 d 9 to 10 333 304 21.81 d 12 to 14 322 343 29.39 Overall 286 265 13.01 G:F, g/g 1.00a 0.82b 0.02 1.20 1.11 0.10 1.08 1.06 0.07 1.04 0.05 Fecal consistency score 24 h after challenge 0.68 0.32 0.19 30 h after challenge 1.00 0.60 48 h after challenge 1.40a 0.50b 0.29 72 h after challenge 0.60b 0.17 5 d after challenge 1.10a 0.30b 0.23 1.12a 0.46b

日粮蛋白质水平对结肠菌群的影响 Taxonomic level, % 22.5%CP 17.6%CP SEM Fhylum Bacteroidetes 1.5 2.5 0.50 Class unclassified Bacteroidetes 厚臂菌门 92.4 88.6 1.90 杆菌纲 11.6 13.9 1.15 梭菌纲 77.3 74.7 1.30 梭菌目 50.0a 73.4b 11.7 Family Lachnospiraceae 18.2a 43.0b 12.4 Genus Roseburia 2.5a 12.7b 5.10 Order unclassified Clostridia 27.3a 1.3b 13.0 Class unclassified Firmicutes 3.5 0.0 1.75 Phylum Lentisphaerae 0.5 1.3 0.40 Class Lentisphaerae Phylum Proteobacteria 5.6 7.6 1.00 Class Epsilonproteobacteria 1.25 Class Deltaproteobacteria Class Gammaproteobacteria Class Betaproteobacteria 2.0 Class unclassified Proteobacteria Phylum unclassified Bacteria 0.25

日粮蛋白质水平对结肠氨浓度和总挥发性脂肪酸的影响 Item 22.5% CP 17.6% CP SEM Ammonia N, mg/L 1 d before challenge 237.85a 168.97b 20.68 3 d after challenge 293.99 211.77 71.28 7 d after challenge 414.97a 182.65b 73.89 Total VFA, mmol/L 17.24 21.85 2.45 16.75 15.32 1.47 17.85 18.65 2.48

日粮蛋白质水平对回肠绒毛发育的影响 Item 22.5% CP 17.6% CP SEM Villus height, μm 402.03 405.52 16.15 1 d before challenge 330.16a 458.52b 26.38 3 d after challenge 412.92 409.51 9.13 7 d after challenge 351.94a 243.38a 21.12 Crypt depth, μm 324.77 312.11 19.28 357.88 299.41 24.75 Villus height:crypt depth 1.18a 1.67b 0.10 1.03a 1.47b 0.06 1.20 1.39 0.11

小 结 对于断奶仔猪,补充适量的限制性氨基酸,19%的日粮蛋白质水平对生产性能无影响,对肠道的健康有益。

三、功能性氨基酸与母猪繁殖性能和肠道屏障功能

肠道屏障 维持肠道微生态平衡 降低肠道pH值 激活肠道免疫系统活性 促进营养素消化吸收 粘液层 肠上皮层 紧密连接层 粘膜下固有层 常驻菌群微生态平衡 机械屏障 生物屏障 肠道屏障 上皮内淋巴细胞 派尔集合淋巴小结 肠上皮的识别功能 M细胞 肠道免疫球蛋白 胃酸 胆汁 各种消酶溶菌酶 粘多糖 研究较多的为肠上皮细胞屏障和免疫屏障 化学屏障 免疫屏障 注:研究较多的为肠上皮细胞屏障和免疫屏障

小肠氨基酸代谢 能量 粘液蛋白 细胞修复 信号分子 抗氧化 Wu,1998 注:Asp,天冬氨酸;BCAA,支链氨基酸;BCKA,支链酮酸脱氢酶;CP,氨甲酰磷酸;Glu,谷氨酸;a-KG,a-酮酸;MTF,N5,N10-亚甲基四氢叶酸;OAA,草酰乙酸;Pyr,丙酮酸;TF,四氢乙酸 Wu,1998

1、苏氨酸

苏氨酸在肠道的去向? 采食的苏氨酸 肠道 (60~85%) 97% 3% 蛋白质合成 氧化供能 黏膜蛋白 黏液蛋白 IgA 内源分泌 CO2

日粮真可消化苏氨酸对7-13kg猪蛋白质合成效率的影响 指标 真可消化苏氨酸水平,% SEM P值 0.37 0.75 1.11 肝脏 99.9 136.8 144.0 10.45 0.020 背最长肌 5.0 9.8 5.2 1.18 0.017 十二指肠粘膜 13.3 86.8 51.8 6.41 0.012 空肠粘膜 75.5 115.8 88.8 7.35 0.006 回肠粘膜 78.1 85.3 70.2 9.97 0.575 十二指肠黏液 58.5 79.6 49.1 7.55 0.047 空肠黏液 52.8 96.7 52.6 8.29 0.029 回肠黏液 55.9 77.9 75.2 5.77 0.032 Xu Wang,Shiyan Qiao,2007,J. nutr.

日粮TID苏氨酸水平对大肠杆菌激发前后断奶仔猪空肠黏膜IgG含量的影响 IgG是动物自然感染和人工主动免疫后,机体所产生的主要抗体,它是人和动物血清中含量最高的免疫球蛋白,在机体防御中发挥抗感染、中和毒素及调理作用。但在黏膜免疫中并不发挥很重要的作用。本试验中 E.coli K88+激发有提高断奶仔猪空肠黏膜中IgG浓度的趋势。日粮真可消化苏氨酸水平对断奶仔猪空肠黏膜中IgG浓度的影响与E.coli K88+激发存在互作效应,日粮真可消化苏氨酸的添加有提高断奶仔猪空肠黏膜中IgG的浓度的趋势。可能的原因是苏氨酸是IgG中含量最丰富的必需氨基酸,苏氨酸的添加促进了黏膜中免疫球蛋白IgG的生成。 日粮TID苏氨酸水平 (g/kg) IgG: 苏氨酸水平 P > 0.05 E. coli P = 0.06 互作 P = 0.07 王旭, 谯仕彦. 2006

日粮真可消化苏氨酸对21日龄断奶仔猪小肠黏液蛋白含量的影响 Weiwei Wang,Shiyan Qiao, etal., 2009, J. Nutr.

日粮真可消化苏氨酸对仔猪小肠黏液蛋白基因表达的影响 项目 真可消化苏氨酸水平(%) SEM1 P值 0.37 0.74 0.89 1.11 十二指肠 0.313b 0.466b 0.806a 0.396b 0.063 0.0004 空肠 0.196b 0.429ab 0.598a 0.229b 0.083 0.0156 回肠 0.124b 0.345a 0.367a 0.240ab 0.044 0.0086 Weiwei Wang,Shiyan Qiao, etal., 2009, J. Nutr.

日粮真可消化苏氨酸对仔猪小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响 Weiwei Wang,Shiyan Qiao, etal., 2009, J. Nutr.

80 70 60 65% 50 TID Thr/ TID Lys(%) 40 30 20 10 5-10kg 10-20kg 20-50kg 50-120kg Lactation sow Mao, X. B., X. F. Zeng, S. Y. Qiao, D. F. Li, Frontiers in Bioscience

2、精氨酸与N-氨甲酰谷氨酸(NCG)

初产母猪(n=53)妊娠第30-114天添加 1%L-精氨酸盐酸盐对繁殖性能影响 Mateo et al. (2006) J. Anim. Sci. 84 (Suppl. 2): 7-8

猪奶与7日龄仔猪机体的精氨酸/赖氨酸比较 0.4 0.8 1.2 猪奶 仔猪 精氨酸/赖氨酸 Means ± SEM, n=10 0.4 0.8 1.2 猪奶 仔猪 精氨酸/赖氨酸 Means ± SEM, n=10 Wu G and KnabeDA (1994) J Nutr124:415-424. Wu G et al. (1999) J Nutr129:1031-1038.

精氨酸添加量对仔猪日增重的影响 a-c: p<0.05 a a a b b b c c c

断奶仔猪日粮中添加精氨酸对小肠绒毛形态的影响 A B 日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠绒毛高度的影响 日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠隐窝深度的影响 Zhenfeng Zhan, Defa Li,et al., 2008, J. Nutr.

断奶仔猪日粮中添加精氨酸对小肠NO和血管内皮素的影响 十二指肠 空肠 回肠 一氧化氮 (μmol/g) L-Arg A 内皮素 (pg/mg) 十二指肠 空肠 回肠 L-Arg B 日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠中ET-1浓度的影响 日粮添加精氨酸对14日龄断奶仔猪小肠中NO浓度的影响 Zhenfeng Zhan, Defa Li,et al., 2008, J. Nutr.

N-氨甲酰谷氨酸,NCG N-氨甲酰谷氨酸(NCG)是N-乙酰谷氨酸( NAG)的代谢稳定类似物,可激活精氨酸内源合成的限速酶-氨甲酰磷酸合成酶-1(CPS-1),从而提高精氨酸的内源合成。 NAG COOH NH2 C CH2 C O OH H CH3 O NCG N-乙酰谷氨酸 N-氨甲酰谷氨酸

瓜氨酸 谷氨酰胺 哺氨酸 NCG 精氨酸

妊娠全期日粮添加 N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对母猪繁殖性能的影响 对窝产总数和窝产活仔数的影响 岳隆耀,曾祥芳,谯仕彦, 2009 妊娠全期母猪日粮添加NCG对仔猪初生重的影响

妊娠前期日粮添加 N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对母猪繁殖性能的影响 妊娠后期母猪日粮添加 NCG对仔猪初生重的影响 妊娠前期母猪日粮添加NCG 对窝产总数和窝产活仔数的影响 岳隆耀,曾祥芳,谯仕彦, 2009

经产母猪怀孕后期日粮添加 N-氨甲酰谷氨酸(NCG)对繁殖性能的影响 对窝产总数和窝产活仔数的影响 岳隆耀,曾祥芳,谯仕彦, 2009

精氨酸及NCG提高母猪产仔数和促进胎儿发育机理示意图 验证假设 精氨酸及NCG提高母猪产仔数和促进胎儿发育机理示意图

小 结 日粮TID苏氨酸的首要功能是满足肠道蛋白质的合成,对断奶仔猪小肠黏膜形态、肠黏膜和黏液蛋白质合成、肠上皮细胞凋亡由重要影响,进而影响肠道屏障功能 保障小肠黏液屏障功能对日粮苏氨酸的需要高于满足生产性能的需要 日粮精氨酸通过促进营养物质的供应提高胎儿成活率和均匀度,新生仔猪和断奶仔猪日粮添加适宜精氨酸可以有效促进小肠微血管损伤的修复 NCG通过促进精氨酸内源合成发挥与精氨酸相似的作用

四、生长肥育猪地蛋白质日粮研究

图4 日粮净能含量与育肥猪最小平均日增重百分比的折线和二次趋势图 最小平均日增重百分比 (%) Broken point = 2.36 R2 = 0.84 Maximum quadratic = 2.38 R2 = 0.89 试验结果表明,日粮粗蛋白降低4个百分点时,当净能从2.64 Mcal/kg降低到2.25 Mcal/kg时,平均日增重受净能水平的显著影响,采用折线模型和二次回归模型,以平均日增重为评价指标时,得到生长猪低蛋白日粮净能需要量为2.36 Mcal/kg 日粮净能含量 (Mcal/kg) 图4 日粮净能含量与育肥猪最小平均日增重百分比的折线和二次趋势图

图5 日粮净能含量与育肥猪最小饲料转化率百分比的折线和二次趋势图 最小饲料转化率百分比 (%) Broken point = 2.36 R2 = 0.80 Maximum quadratic = 2.40 R2 = 0.81 试验结果表明,日粮粗蛋白降低4个百分点时,当净能从2.64 Mcal/kg降低到2.25 Mcal/kg时,平均日增重受净能水平的显著影响,采用折线模型和二次回归模型,以平均日增重为评价指标时,得到生长猪低蛋白日粮净能需要量为2.36 Mcal/kg 日粮净能含量 (Mcal/kg) 图5 日粮净能含量与育肥猪最小饲料转化率百分比的折线和二次趋势图

图6 日粮净能含量与育肥猪最小无脂瘦肉率百分比的折线和二次趋势图 最小无脂瘦肉率百分比 (%) Maximum quadratic = 2.42 R2 = 0.86 Broken point = 2.40 R2 = 0.87 试验结果表明,日粮粗蛋白降低4个百分点时,当净能从2.64 Mcal/kg降低到2.25 Mcal/kg时,平均日增重受净能水平的显著影响,采用折线模型和二次回归模型,以无脂瘦肉率为评价指标时,得到生长猪低蛋白日粮净能需要量为2.40 Mcal/kg,最大不宜超过2.42 Mcal/kg 日粮净能含量 (Mcal/kg) 图6 日粮净能含量与育肥猪最小无脂瘦肉率百分比的折线和二次趋势图

基于净能体系的生长育肥猪低蛋白质日粮 在玉米-豆粕型日粮中,以净能基础配制日粮,并合理补充限制性氨基酸,将日粮蛋白降低4个百分点后,可获得与高蛋白日粮相似的生产性能和胴体品质。 生长猪低蛋白玉米-豆粕型日粮中,获得最大增重和最佳饲料转化率的净能需要量为2.36 Mcal/kg,相应的赖氨酸净能比为4.70 g/Mcal。 在肥育猪低蛋白日粮中,获得最佳生产性能的净能需要量为2.36 Mcal/kg,获得最佳胴体品质的净能需要量为2.40 Mcal/kg,相应的赖氨酸净能比为3.50 g/Mcal。

低蛋白质日粮的环保意义 指标 日粮蛋白质降低1个百分点 最大化效果 (4-5个百分点) 总氮排泄量 -10% -50% 空气中氨浓度 -13% -60% 饮水量 -3% -28% 排泄物总量 -5% -30% Relendeau等,2000

五、微生态制剂和抗菌肽与猪健康养殖

仔猪日粮中使用益生素时ADG和饲料转化效率的变化(与不加益生素日粮相比变化的%,53个试验) p<0,05 ADG(正效应37个;负效应9个;无变化7个) p<0,05 饲料转化效率(正效应15个;负效应18个;无变化20个)

日粮添加益生素对仔猪腹泻的作用(20个试验) 正效应13个;负效应3个,无作用4个 p<0,05 not significant

天蚕素抗菌肽载体构建与表达 载体的构建: 62 62

天蚕素抗菌肽:分子结构清楚,37个氨基酸、分子量3.72KD 这是天蚕素抗菌肽的分子电泳图 63 63

表达产物的氨基酸序列和分子量 表达产物的氨基酸序列:KWKLFKKIEKVGQRVRDAVISAGPAVATVAQATALAK 64 64

表达产物的二级结构 表达产物纯化后,圆二分光光度仪测定二级结构表明:两亲性α-螺旋占78%,无规则卷曲21%,无β折叠,属于线性结构。 65

表达产物的三级结构 应用Anthe-5.0软件分析表达产物三级结构如图所示: 66 66

Salmonella enteritidis 16 Staphylococcus aureus 0.2 天蚕素抗菌肽的最小抑菌浓度(抗菌谱) 细菌名称 最小抑菌浓度(ug/ml) E.coli K12D31 1.8 E.coli K88 2 E. coli K99 Salmonella typhimurium 8 Salmonella enteritidis 16 Staphylococcus aureus 0.2 Streptococcus faecalis 24 67

左:硫酸粘杆菌素 右:天蚕素抗菌肽 上:杆菌肽锌 下:金霉素 左:硫酸粘杆菌素 右:天蚕素抗菌肽 上:杆菌肽锌 下:金霉素 这是天蚕素抗菌肽与几种抗生素对金黄葡萄球菌的抑菌效果对比试验,右边为天蚕素抗菌肽,作用效果最好 天蚕素抗菌肽与几种抗生素对金黄葡萄球菌的 抑菌效果对比 68 68

热稳定性研究(时间20min)

生物学特性—对pH的耐受性

生物学特性--对消化酶的稳定性试验 71

天蚕素抗菌肽安全评价试验 (2)小鼠骨髓细胞微核试验:结果为阴性 (3)小鼠精子畸形试验:试验结果为阴性。 (1)大小鼠急性毒性试验: LD50大于5000mg/kg 体重 (2)小鼠骨髓细胞微核试验:结果为阴性 (3)小鼠精子畸形试验:试验结果为阴性。 (4)大鼠精子畸形试验:结果为阴性 (5)亚慢性毒性试验:无明显亚慢性毒性。 (6)大鼠慢性毒性试验:饲喂大鼠1年,无慢性毒性 72

饲用抗生素和CAD对肉鸡作用机制的对比 +,促进;-,抑制;0,无变化 指标 饲用抗生素 CAD 乳酸菌 魏氏梭菌 0,- - 魏氏梭菌 0,- - 致病性大肠杆菌 产气荚膜杆菌 抗药性转移 +,-,0 致病性链球菌 部分病毒 -,0 抗体形成 + CD4+等细胞因子 肠壁吸收能力 能量沉积 氮沉积 氨基酸、维生素吸收 葡萄糖吸收 肝脏蛋白质合成 +,促进;-,抑制;0,无变化 73

小结 天蚕素抗菌肽是继乳链菌肽后用生物工程技术成功开发出的第二个抗菌肽,与化学合成相比,实现了低成本生产,使其在兽药和饲料中使用成为可能。 与国内市场目前销售的所谓的抗菌肽产品相比,是唯一一个结构清晰、成分明确、作用效果和作用机理确切的抗菌肽。 至少为减少抗生素的使用或抗生素的配伍提供了一种手段。 74

谢 谢!