如何提高血栓与止血检验结果的可靠性？ 卫生部临床检验中心 彭明婷
必要性 满足临床诊疗的需要，为病人服务 《医疗机构临床实验室管理办法》的要求 “医疗机构间医学检验结果互认”的要求 “医院管理年” 检查的要求 应对投诉、举证倒置、自我保护 实验室认可（ISO/CAP）的要求 其他：科研、教学等工作的需要
主要内容 人员 设施和环境条件 实验室设备 检验前程序 检验程序 检验程序的质量保证 检验后程序 结果的报告
人员 ◆对岗位描述、培训内容和计划应有详细的规定 ◆依据岗位特点规定技术能力评估的方法和指标 ◆对工作人员技能的重新培训和评估提出具体要求 ◆对专业组长/审核人的要求 ◆对岗位描述、培训内容和计划应有详细的规定 ◆依据岗位特点规定技术能力评估的方法和指标 ◆对工作人员技能的重新培训和评估提出具体要求
培训计划 培训目的 培训内容：包括专业理论/操作技能/信息系统/安全等 参加培训的人员、时间 提供培训经费 提供培训时间 可供使用的最新参考资料 形式：内部培训、定期学术交流、病案分析等
技术能力的评估 初次培训的考核结果 现场考核 检验结果的分析与判断 检查工作单与各种记录
工作人员技能的重新培训和评估 人员的职责发生改变 当程序、方法更改时 人员长时间离岗后 未达到要求时，需要采取的措施
设施和环境条件 ◆实验室应明确划分并规定检测区和清洁工作区的要求与控 制方法（包括空间和安全的要求） ◆实验室管理层应确定对环境条件进行监测的标准，并确保达到此标准，应咨询仪器制造商，明确可能对检验结果造成影响的因素和程度 ◆实验室使用的保存标本或试剂的冷藏箱和冷冻箱应满足要求，应提供其温度在制冷过程中不超出允许范围的证据
实验室设备 ◆对检测系统的评价应有明确的要求 如评价指标/方法/标准/范围（项目/系统） 对非配套检测系统的要求等 ◆对评价标准进行研究(依据制造商的规定、 临床允许范围和颁布文件的要求）
对检测系统的要求 对仪器、试剂和耗材的要求（23条） ☆符合国家有关规定：注册证、批文号 保证检测系统的完整性和有效性（24条） 存在的问题 -医疗器械监督管理条例 -医疗器械注册管理办法 -体外诊断试剂注册管理办法 保证检测系统的完整性和有效性（24条） 存在的问题 -按系统进行注册和管理有难度 -检测标准 -校准物和质控物的管理
使用非配套检测系统的要求 符合国家有关规定 提供证明检测系统有效性的实验数据 与配套检测系统进行结果的比对 （EP-9文件）
检测系统性能的初步评价 精密度： 批内 日间 线性范围 可比性：NCCLS EP9文件/5份标本 准确性 抗干扰性
检验前程序 ◆依据不同的项目类型提出检验前程序的要求 ◆合理设计工作流程 ◆ 加强与临床科室的沟通 ◆不合格标本及处理原则： 明确列出不合格 标本的类型（如有凝块、采集量不足、肉眼观 察有溶血等）和拒收程序
举例：血液凝固试验标本的采集运送与保存 血液凝固试验标本的采集要求使用枸橼酸钠抗凝剂；血液与抗凝剂的体积比一般为9∶1，当标本的HCT>0.55时，应对血液与抗凝剂的体积比进行调整 应规定标本运送的温度条件和送达时间。标本应在实验室规定的时间内离心并分离血浆 ；若标本不能在4小时之内检测，应分离出血浆并转移至洁净干燥的合乎要求的试管中加盖保存于2-8℃。当天不能检测的样本应在-20℃条件下保存，两周内完成检测；-70℃条件下标本的保存期限可达6个月
检验程序 列出参考标准（如设备说明书、参考文献、学术组织颁布的文件等），要求对不同类型的检验项目制定科学、完善、实用的SOP文件 - 按照说明书和相关标准的要求建立操作程序 - 对患者标本进行重复检验的标准及程序
检验程序的质量保证 溯源和校准 室内质量控制 室间质量评价 结果的比对 参考范围的验证
溯源和校准的要求（ISO15189） 参加适当的实验室间比对计划 使用有证书说明其材料特性的适当参考物质 用其他程序进行检验或校准 使用已明确建立的、经规定的、性能已确定的、 被各方承认的协议标准或方法 若由供应商或制造商提供溯源性，应有关于试剂、程序或检验系统溯源性的声明文件
设备的校准 有校准物的项目 无校准物的项目 仪器 加样器 校准 天平 离心机器
校准物和校准项目 例如： PT 百分活动度 Clauss 法定量检测纤维蛋白原 AT-III PC PS D-Dimer 标准物：适用于特定检测系统的定值具有溯源性的血浆，可用于部分检测项目标准曲线的建立 例如： PT 百分活动度 Clauss 法定量检测纤维蛋白原 AT-III PC PS D-Dimer 无法定标的测定项目如APTT，可使用配套的 定值质控物进行测定，测定结果应在允许范围内， 同时参加EQA
INR定标血浆 来 源： 口服抗凝剂（香豆素类）病人血浆 人工去因子血浆 处理方式： 冻干 冷冻 获得途径： 中心机构 厂商 来 源： 口服抗凝剂（香豆素类）病人血浆 人工去因子血浆 处理方式： 冻干 冷冻 获得途径： 中心机构 厂商 INR定值方法：直接用IRP或WRP测定 多个实验室的INR均值
INR定标血浆 例： 包装（盒） 6瓶 x 1ml (冻干品) PT-多点定标 水平 1 1 x for 1ml 注: 彩色盖以示区别
例： INR定标血浆进行检测 Thromborel S Innovin Thromboplastin C Plus % INR % INR INR Level 1 98 0.97 103 0.99 0.91 Level 2 62 1.24 63 1.18 1.08 Level 3 37 1.82 38 1.56 1.47 Level 4 19 3.49 19 2.67 2.79 Level 5 13 5.05 13 3.70 4.34 Level 6 - - 10 4.76 6.02
血凝仪校准的实施 投入使用前 在更换试剂批号后应重新建立标准曲线 维修后需确认检测结果的可靠性 室内质量控制结果失控 室间质量评价成绩不理想 与临床症状、体征不符 其他：如投诉
室内质控的要求 质控品的选择：定值或非定值质控物 质控品的数量：至少1个水平 质控项目 质控频度：检测当天1次 质控方法：至少使用L-J方法 靶值的确定 失控的判断规则：实验室自定，推荐至少使用1 3S规则 失控原因的分析与处理，失控报告的填写 质控数据的管理：原则上每月统计1次
注 意 应确定不同检测系统对应的靶值和允许范围 当试剂、质控品批号变更时，应重新确定靶值和允许范围 如果质控结果失控，则应查明原因并采取纠正措施后再发出检验报告
室间质量评价的要求 EQA样本的处理：应尽可能使用与患者样本相同的处理方法 EQA样本的检验 - 与普通患者标本一样由日常实施检验的人员使用相同的方法进行 检测 - 与患者样本日常检测的次数相同 当没有正式的实验室间比对计划时，实验室管理层应制定对该项目的检测结果进行比对和确认的方法，例如与其他实验室交换样本和/或用已知结果样本的盲样检验 EQA评价报告由实验室负责人审核并签字
分组统计方法 根据使用试剂和仪器的种类进行分组 各组的实验室数在10个以上
凝血实验质评的分组 Dade Behring 试剂/ Sysmex仪器 Dade Behring 试剂/除Sysmex仪器外的其他仪器 IL试剂/ IL仪器 IL试剂/ 除IL仪器外的其他仪器 Stago 试剂/ Stago 仪器 Stago 试剂/ 除Stago 仪器外的其他仪器 Pacific 试剂/ 各种类型仪器 不使用IL、 Dade Behring 、Stago 、Pacific试剂的实验室
评价方法 靶值：各组的加权均值 评价指标：偏差 评价标准： PT ±15% APTT±15% FIB ±20%
存在的问题 “试剂与仪器未配套组” 特别是“其他组”的CV偏大 检测异常质评物时, CV偏大 一些实验室Fbg回报结果的单位有误 互相核对结果
结果的比对 系统内部评价性能：非配套检测系统与配套检测系统间的比对：NCCLS EP-9文件的要求 实验室内部的比对 实验室之间的比对：EQA/与其他实验室的比较
实验室内部结果比对的要求 内部比对：方法/分析系统/场所不同 使用临床标本（含正常和异常）进行比对 选择临床标本的数量 比对频率 比对结果的判别标准 原则：检测数据/允许误差/临床可接受的范围 结果超出判别标准的纠正措施：统一标准校准设备/信息系统调整参数/分别使用不同的参考范围
参考范围的验证 参考范围的制定应尽可能符合NCCLS文件C28-A2中的建议 可由制造商或其他机构制定参考区间后，由使用相同分析 系统的实验室对参考区间进行验证 ①确认实验室使用的分析系统与制造商提供参考区间的分析系统相同 ②确认检验项目针对的人群相同 ③确认检验前程序和分析检测程序一致 ④每组用20份健康人标本检测后进行验证
参考范围的验证 实验室内部有相同的检测系统（仪器型号、试剂批号以及消耗品等相同）时，可调用相同的参考范围 新仪器在检测常规标本前/当系统、方法、程序更改时，应对参考范围重新进行验证 当临床需要时，应根据年龄和/或性别分组建立参考范围
检验后程序 系统评审的措施 不同类型样本保存的要求 废弃物处置方法的最低要求
结果的报告 报告内容的要求：完整 可识别 报告格式的规范：相对统一 检验周期的确定：满足临床需要 保证检测质量 报告内容的要求：完整 可识别 报告格式的规范：相对统一 检验周期的确定：满足临床需要 保证检测质量 报告延期发出的处理：程序 记录 危急值的报告：程序 记录 对报告结果测量单位的要求 报告审核的要求
加强与临床的沟通 分析前的各有关环节 各检测参数的临床意义 参考范围的提供 参考范围有变动时（如系统变更等） 新项目的开展 特殊项目的报告方式 标本拒收的程序 临床反馈意见的途径与处理
小结 人员 设施和环境条件 实验室设备 检验前程序 检验程序 检验程序的质量保证 检验后程序 结果的报告
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