兴奋剂的分析研究 报告 报告人：周明 03081068

兴奋剂的有关概述 兴奋剂的定义 兴奋剂的历史和现状 兴奋剂的分类

检测基质的多样化趋势 尿液 血液 发样 体液（汗液、唾液）

兴奋剂检测的发展 兴奋剂检测生物芯片 —我国已处于领先技术 基因兴奋剂 —2008的新挑战

最新消息，我国已自主研制成功兴奋剂检测生物芯片，这是一种蛋白芯片，可同时对9种刺激剂和麻醉剂进行检测。经过对1300多例运动员的实际尿样检测表明，该蛋白芯片与经典方法的符合率达到100%。

北京博奥生物芯片公司将在2005年进一步丰富兴奋剂检测生物芯片的检测指标，2006年在世青赛上初步投入使用并积累经验和数据，2007年完成国产化兴奋剂检测生物芯片装置的最终定型和批量生产，以期在2008年北京奥运会大范围兴奋剂筛查中应用。 *   

兴奋剂的英文为Dope，一说原为南非黑人方言中的一种有强壮功能的酒，一说起源与荷兰语Dop 。 兴奋剂药物并不都具有兴奋性（如利尿剂），甚至有的还具有抑制性（如b-阻断剂），国际上对禁用药物仍习惯沿用兴奋剂的称谓。因此，如今通常所说的兴奋剂不再是单指那些起兴奋作用的药物，而实际上是对禁用药物的统称。

有的可抑制和减轻疼痛，从而增强运动员的自信心；有的可以增加心率、肌肉血流量、肺通气量，从而提高循环系统和呼吸系统的机能，加强能量代谢；有的可以增加肌肉块头和力量，有助于增加训练强度和时间，从而提高速度和耐力；等等。 *

1886年，一位自行车运动员因为过量使用兴奋剂而致死，成为第一例史上记录。 20世纪50年代，兴奋剂在体坛上已被广泛使用，尤其是苯丙胺，曾经风靡一时。 据有关方面估计，目前世界各国一流选手中有6%的人使用兴奋剂。 *

Ω 对兴奋剂的监控 已成为当今国际体 育界的一个重要问题 ！

外源性： 是人体自身不能分泌，由外部引入的物质，如刺激剂、麻醉剂、合成蛋白剂、利尿剂、b-阻断剂。尿样中一 旦查出就可判断为阳性。 分析方法相对内源性药物简易很多。

内源性： 自身能分泌，体内本身含有的物质。 主要有肽类激素和甾体类固醇激素。 由于要区自身分泌与人为引入，所以分析难度较大。 #

同位素比质谱的应用 原理：碳元素在自然界中存在的规律，同一来源化合物中碳的两种同位素13C和12C的丰度比是相同的。商品化的类固醇激素来源于大豆等植物的提取，其13C/12C比值较低，而人体内的该比值比较高。

程序：先利用气象色谱将目标化合物分离，经燃烧炉氧化成CO2，并进入质谱分析仪，记录m/z=44，45，46的强度，分别对应于12C16O16O，12C16O16O+13C16O16O，13C16O16O的丰度，校正后可计算出13C/12C值。

仪器：GC/C/IRMS gas chromatography / combustion / isotope-ratio mass spectrometry

分析方法改进后 更加公正 我过某著名乒乓球运动员，曾因为脑垂体腺体瘤导致尿样中表睾酮异常增高而被怀疑使用了兴奋剂，后来正是因为同位素比质谱的分析方法，为其洗去了冤屈。 *

尿液 尿样检测是兴奋剂检测的理想样本。其优点在于：取样方便；对人无损害；尿液中的药物浓度高于血液中的药物浓度；尿液中的其他干扰少。 尿样进入实验室，首先进行尿样ph和尿比重测定，然后按药物的化学特征分为四组进行筛选分析，主要是化学提取和仪器分析两步，最后由计算机打出检测报告。 *

血样 血样检测的目的主要是补充尿样分析方法的 不足，目前尚处于研究探索阶段，目前仅用于血液回输，红细胞生成素，生长激素，绒毛膜促性腺激素，睾酮等的测量。 *

发样 在法医，毒性分析中已有较长历史，但在 兴奋剂研究中是才兴起研究方向。 有采样容易，无损伤，不易作弊的特点， 备受关注。

样品处理：有机溶液-去离子水-有机溶液洗涤；剪碎或磨成粉末，以增加提取时的表面积；药物与头发中的角蛋白结合牢固，需预先消化。 Fabien Bevalot等将50mg的发样用甲醇处理并用固相柱处理以后，HPLC-ESI-MS检测，灵敏度达1×10-7。

优势：皮质类固醇在体内消除很快，如果 赛前停药，尿液分析就检测不到，而发样分 析仍可检出。 #

体液 虽然药物含量浓度低，但可提供有益的互补信息，仍不失为一种值得研究的基质。 *

* 利尿剂，顾名思义，此类药物有稀释尿液的功能。主要用于掩盖或“清洗”体内其它违禁药品的存在，以逃避兴奋剂检查。 高效液相色谱法 （HPLC） *

基因兴奋剂将挑战“北京2008”： 随着科学和医疗的发展，高科技手段将进一步挑战WADA一向引以为傲的口号“玩真的（playtrue）”，目前最先进且已经迫在眉睫的当属基因兴奋剂（genedoping）。

2008 奥运会远离兴奋剂！

与经典液相色谱法的主要区别 流动相改为高压输送、采用高效固定相、具有在线检测器及仪器化等。该法具有分离效能高、分析速度快及应用范围广等特点。根据这些特点，人们又称该法为高速液相色谱法、高压液相色谱法、高分辨液相色谱法等。这些名称都是在发展过程中人们根据该法的某些特点而命名，高效液相色谱法是当前色谱工作者认同的名称。

高效液相色谱法与气相色谱法比较 高效液相色谱法分析对象广，它只要求样品能制成溶液，而不需要气化，因此不受样品挥发性的约束。对于挥发性低、热稳定性差、分子量大的高分子化合物以及离子型化合物尤为有利。如氨基酸、蛋白质、生物碱、核酸、甾体、类脂、维生素、抗生素等。分子量较大、沸点较高的有机物以及无机盐类，都可用高效液相色谱法进行分析。 *