四川大学华西第二医院 儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断 四川大学华西第二医院检验科. EBV 简介： EBV 是人疱疹病毒 4 型，在淋巴细胞中潜伏。 EBV 在正常人群中感染非常普遍，约 90% 以上的成人血清 EBV 抗体阳性 EBV 主要通过唾液传播，也可经输血传染 EBV 原发感染后，大多数无临床症状，

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1 四川大学华西第二医院 儿童 EBV 感染及其 相关疾病的实验室诊断 四川大学华西第二医院检验科

2 EBV 简介： EBV 是人疱疹病毒 4 型，在淋巴细胞中潜伏。 EBV 在正常人群中感染非常普遍，约 90% 以上的成人血清 EBV 抗体阳性 EBV 主要通过唾液传播，也可经输血传染 EBV 原发感染后，大多数无临床症状， 4-6 岁以下儿童大多表现 为隐性或轻型发病，多发生传染性单核细胞增多症。 一旦感染， EBV 在人体 B 细胞建立潜伏感染，受感染者将成为 终生带毒者 在机体免疫功能下降和某些因素触发下，潜伏的 EBV 可以被再 激活，引起病毒复制及临床疾病

3 EBV 相关疾病 传染性单核细胞增多症（ Infectious mononucleosis,IM) 慢性活动性 EB 病毒感染（ Chronic active EBVinfection ， CAEBV ） EB 病毒相关性嗜血细胞综合征（ EBV-associated hemophagocytic syndrome, EBVAHS) Burkitts 淋巴瘤 何奇金淋巴瘤

4 临床需要回答的问题 是否感染 EBV? EBV 感染的时相？ 是否 EBV 活动性感染？ 疾病是否与 EBV 感染相关？

5 EBV 感染的实验室诊断方法简介 EBV 特异性抗体检测 原发性 EBV 感染过程中首先产生针 对衣壳抗原（ capsid antigen,CA) 的 IgM 和 IgG 在急性感染的晚期，抗早期抗原 （ early antigen,EA) 抗体出现 在恢复期晚期，抗核抗原（ nuclear antigen,NA) 抗体产生 抗 CA-IgG 和抗 NA-IgG 可持续终生

6 传统检测策略的问题 5% 新近 EBV 感染不出现 CA-IgM 抗体 在罕见的病例中抗 CA- IgM 会持续存在 约 20-30% 的新近感染不出现 EA- IgG 抗体 抗 EBNA-IgG 抗体可能呈现阴性，由于： - 慢性活动性 EBV 感染 - 细胞免疫被抑制

7 EBV 抗体检测结果分析 1 NA-IgG (+) CA-IgG(+) 和 EA- IgG(+) 和 / 或 CA- IgM(+) 或 CA-IgA 强 阳性 复发 只是高亲合力的 CA-IgG 既往感染

8 EBV 抗体结果分析 2 NA-IgG(-) CA-IgG(+) NA-IgG 阴性 CA-IgG 和 IgM （ - ） 未感染 EBV CA-IgM(-) 和高亲和力的 CA-IgG CA-IgM(+) 和 低亲和力 CA- IgG,EA-IgG 可能阳性 原发感染 EA-IgG(+) NA-1 抗体丢 失的复发 EA-IgG(-) NA-1 抗体丢 失的既往感 染

9 EBV 病毒核酸检测 实时荧光定量 PCR 是目前最主要的监测 EBV 载量的方法 鉴别 EBV 健康携带者的低水平复制与 EBV 相 关疾病患者高水平活动性感染。

10 不同 EBV 相关疾病中 EBV 病毒 载检测的标本选择 疾病感染细胞检测病毒载量的标本类型 血浆或血清单个核细胞全血 传单 B 细胞合适不推荐 移植后淋巴组织增生性 疾病 B 细胞有争议合适更好 何杰金淋巴瘤何杰金细胞（ B 细胞来源） 合适不推荐 ND 慢性活动性 EBV 感染 T 细胞或 NK 细胞预后诊断 ND 鼻咽癌鳞状上皮细胞合适不推荐 ND

11 传单的 EBV 感染实验室诊断 血清学检测： 同时满足下列 2 条者可以诊断为 EBV-IM: 1. 下列临床症状中的 3 项：发热、咽峡炎、颈淋巴结肿大、肝肿 大、脾肿大； 2. 原发性 EBV 感染的血清学证据，满足下列 2 条中任一项： （ 1 ）抗 EBV-CA-IgM 和抗 EBV-CA-IgG 抗体阳性，且抗 EBV- NA-IgG 阴性 （ 2 ）抗 EBV-CA-IgM 阴性，但抗 EBV-CA-IgG 阳性，且为低亲 和力抗体

12 传单的 EBV 感染实验室诊断 DNA 检测 : IM 患者外周血中 EB 病毒载体在 2 周内达到峰值，随后很快下降 。 至病程 14 天，多数 EBV-IM 患者血清中已检测不到病毒核酸，病 程 22 天后，所有 EBV-IM 患者血清中均检测不到病毒核酸。 IM 患者不推荐进行 EB 病毒载量检测

13 慢性活动性 EBV 感染的实验室 诊断 EBV 抗体检测 抗体反应类型 EBV 抗体比例（ % ） CA-IgGCa-IgMEA-IgGNA-IgG 1+-++54.9 2+-+-25.5 3++++5.9 4+++- 5+--+3.9 6+---

14 慢性活动性 EBV 感染的实验室 诊断 DNA 检测 : 绝大多数 CAEBV 患者 PBMC 中 EBV-DNA 水平高于 10 2.5 拷贝 /ug DNA 部分 CAEBV 患者血浆 / 血清中 EBV-DNA 阴性 CAEBV 患者血浆 / 血清中 EBV-DNA 水平与病情严重程度和预后 有关

15 EB 病毒相关噬血淋巴组织细 胞增生症 EBV-HLH 可以发生在原发性 EBV 感染时期，既往 EBV 感染再激活时 期 EBV-HLH 患者血清中 EBV 抗体反应呈多种反应类型，单纯血清 EBV 抗体检测对 EBV-HLH 的诊断意义不大。 感染类型 EBV 抗体比例（ % ） CA-IgGCa-IgMEA-IgGNA-IgG 再次激活 +-++30.8 +--+21.8 ++++17.9 原发感染 ++--16.7 +++-12.8 总阳性率（ % ） 10047.448.770.5

16 EB 病毒相关噬血淋巴组织细 胞增生症 DNA 检测 : EBV-HLH 患者外周血单个核细胞和血浆 / 血清均含有很高的 EBV-DNA 载量，结合血清学抗体检测，有助于 EBV-HLH 的诊 断。 监测 EBV-HLH 患者血清中 EBV-DNA 载量有助于评估治疗效果 。

17 小结 人群 EBV 感染普遍， EBV 与许多疾病相关 EBV 血清学抗体检测有助于判断是否 EBV 感 染，以及感染的大致时相 EBV-DNA 定量检测有助于判断是否存在活动 性感染