一、广义的肝功能试验 （一）肝脏本身的功能试验肝脏本身的功能试验 （二）肝胆疾病的血清标志物肝胆疾病的血清标志物.

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2 一、广义的肝功能试验 （一）肝脏本身的功能试验肝脏本身的功能试验 （二）肝胆疾病的血清标志物肝胆疾病的血清标志物

3 肝脏本身的功能试验 1 、有机阴离子运输： ①色素试验： BSP （磺溴酞钠）, ICG （靛青绿） ②胆红素试验 ③血清胆汁酸 BSP 2 、 肝脏代谢功能 ①药物代谢 ②半乳糖廓清 ③尿素合成 3 、肝脏合成功能 ①凝血因子 ②白蛋白、球蛋白 ③脂蛋白

4 肝胆疾病的血清标志物 1 、肝细胞损害 : ①转氨酶： AST 、 ALT ②腺苷酸脱氨酶（ ADA ） ③ LDH5 2 、胆汁郁积 ① ALP ② 5‘-NT （ 5’ 核苷酸酶） ③ LAP （亮氨酸氨基肽酶） ④ GGT （ γ- 谷氨酰转肽酶） 3 、疾病特异性标志物 ①病毒性肝炎：甲型肝炎病毒 Ab （ IgG 与 IgM 型） 乙肝： HBsAg, eAg, 抗 S 、抗 e 、抗 c ②原发性胆汁性肝硬化：抗线粒体抗体（ AMA ） ③慢性自身免疫性肝炎：抗平滑肌抗体（ SMA ） ④原发性肝癌： AFP 、 GGT Ⅱ、 ALP 同工酶 ⑤肝豆状核变性：铜蓝蛋白

5 二、血清胆红素的测定 结合胆红素：胆红素 - 葡萄糖醛酸，可与重氮试 剂直接反应（直接胆红素, 1’IBL ） 未结合胆红素：需用加速剂（咖啡因）打开氢键， 才与重氮试剂反应（间接胆红素） 是发现肝病、诊断黄疸、判断预后的简便又不可 缺少的试验。一般是测血清 TBil 与尿三胆，还可 以测 1’ Bil.

6 测定方法： ①咖啡因法（改良 J-G 法） ②胆红素氧化酶法

7 常规方法 原理： ① 对氨基苯磺酸 + 亚硝酸钠 → 重氮苯磺酸（不稳定） ② 重氮苯磺酸 以咖啡因为加速剂 改良 J-G 法 + 胆红素 → 显色： 酸性呈红色不稳定 加碱（碱性酒石酸钠）后呈绿色 更灵敏稳定

8 改良 J-G 法 评价： ①测定 TB 在 10~37 ℃条件下不受温度影响。呈色在 2h 内非常稳定。 ②灵敏度高。 ③色素、轻度溶血无干扰 ④叠氮钠防腐的质控血清可引起偶氮反应不完全。 ⑤ Bil 对光敏感，标准及标本应避光。 ⑥脂血对测定有干扰，应取空腹血 ⑦线性范围﹤ 100mg/L 。 ⑧结合胆红素的测定至今无侯选参考方法。 ⑨问题：胆红素（尤其是结合胆红素）的标准品不 纯。

9 胆红素氧化酶（ BOD ）法 原理： 胆红素 +1/2O 2 胆绿素 +H 2 O 胆绿素 +O 2 淡紫色化合物 （ 460nm △ A↓ ） 评价： ①简便、特异性高、能用于全自动生化分析仪， 已有商品试剂盒供应。 ② Hb ﹥ 1.5g/L 使测定结果明显降低 ③线性范围至少可达 513μmol/L BOD

10 三、血清总胆汁酸测定 意义 : 胆盐由肝合成，经胆道排入肠内。小肠内胆盐大部分 重吸收入肝，再分泌入胆汁，称肠肝循环。正常肝每天从 门脉血摄取胆盐 15 - 20 克，负荷极大（肝每日仅摄取 BIL250-300mg ）。因此，轻微肝损害时胆盐代谢即可发 生变化。 方法： 气 - 液色谱法 HPLC RIA 酶法：简便，易于推广。

11 酶法测血清总胆汁酸 原理： 3α- 羟基胆汁酸 +NAD + 3 α- 羟类固醇脱氢酶 （ 3 α-HSD ） 3- 酮基胆汁酸 +NADH+H + NADH+H + +NBT 黄递酶 NAD+ 甲替 540nm 有吸收峰 评价： 线性范围： 250μmol/L 高浓度的 LDH 、 Bil 、 VitC 、 Prot 有干扰。

12 四、血浆氨的酶两点法测定 原理： α- 酮戊二酸 +NH 4 + +NAD （ P ） H 谷氨酸脱氢酶 （ GLDH ） 谷氨酸 +NAD （ P ） + +H 2 O △ A340nm↓ △ A=A 10S － A 70s 评价：简便，特异性高，广泛应用。 其他方法：离子交换树脂法、直接法、电极法。

13 五、转氨酶测定 ALT （ GPT ） ：谷丙转氨酶或丙氨酸氨基转移酶 α-KG+ 丙氨酸 ALT 谷氨酸 + 丙酮酸 丙酮酸测定：比色法 : + 2,4- 二硝基苯肼 → 赖氏法 ( 卡门氏单位 ) 速率法： +NADH+H + LDH 乳酸 +NAD + 各种方法单位定义、保温时间不同. 340nm △ A↓ AST （ GOT ） ：谷草转氨酶或天门冬氨酸氨基转移酶 α-KG+ 天门氨酸 AST 草酰乙酸 + 谷氨酸 速率法： +NADH+H + MDH 苹果酸 +NAD + 草酰乙酸测定： 比色法 : + 2,4- 二硝基苯肼 → 赖氏法 ( 卡门氏单位 )

14 六、血清蛋白试验 1 、白蛋白（ Alb ） 一般认为肝病时 Alb↓ 是因为合成 ↓ 或分泌异常。测 定 Alb 的主要价值在于判断预后：无腹水的肝硬化 Alb↓ 预后不好。 2 、蛋白电泳 主要对慢性肝病有一定诊断价值 ①肝硬化的典型改变为： Alb↓ 、 γ-G 呈多克隆性 ↑ ， 其中以快 γ-G↑ 为主，以致 βγ 区之间分不开，形成特 征性的 β-γ 桥 ② α 1 -AT 酶缺乏性肝病时 α 1 -G↓ ③胆汁郁积时 β-G↑ 3 、总蛋白测定： 4 、 A/G 比值：

15 七、血清脂质和脂蛋白测定 1 、急性肝损害时： TG↑ 、 CE↓ ， α 1 - 脂蛋白消失 2 、胆汁郁积时： TC 和 CE↑ ， 出现特殊的脂蛋白 X

16 八、凝血酶原时间（ PT ）测定 评价：能良好地反映肝 合成功能，可作为肝病 预后的指标 1 、凝血酶原活动度 ↓ 至正 常的 10% 以下时预后险 恶 2 、胆汁郁积时 VitK 吸收 ↓→PT↑ ，注入 VitK 后 可纠正

17 常见肝功检查项目 选用空腹血清标本为宜。 TP( 总蛋白） Alb A/G 转氨酶： ALT 、 AST TBil 、 1’Bil GGT ALP 总胆汁酸

18 评价：最敏感的肝功能试验之一 意义： BSP45min 滞留率 ≤5% ，可排除肝硬化 BSP45min 滞留率＞ 14% ，可肯定为异常 干扰： BSP↑ 如肥胖、高龄、血容量不足、胆囊造影 剂等 BSP ↓ 如低蛋白血症（以白蛋白为主） 应用： ① Dubin-Johnson 综合症时，呈先低后高的双峰，主 要为结合型 BSP ； ②测定腹水量 BSP 试验：