第二节 灭菌制剂与无菌制剂的相关技术和理论

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0 第十章 灭菌制剂与无菌制剂

1 第二节 灭菌制剂与无菌制剂的相关技术和理论

2 一、水处理技术 二、液体的过滤技术 三、热原去除技术 四、渗透压调节技术 五、灭菌和无菌操作技术 六、空气净化技术

3 4.注射用水（water for injection） 5.灭菌注射用水（sterile water for injection）
一、水处理技术 （raw water） 1.原水 （tap water） 2.饮用水 3.纯化水（purified water） 4.注射用水（water for injection） 5.灭菌注射用水（sterile water for injection） （一）概述

4 （二）各种水的来源和质量要求 名称 来源 用途 质量要求 原水 自来水或深井水 不能直接为制药使用 - 饮用水 天然水经净化处理所得
制备制药用水，药材的漂洗、制药用具粗洗，药材的提取溶剂。 符合GB 《生活饮水卫生标准》 纯化水 饮用水经蒸馏、离子交换或反渗透 配制普通制剂的溶剂或试验用水、灭菌或非灭菌制剂所用药材的提取溶剂、灭菌制剂用器具的精洗，不得用于注射剂的配制与稀释 符合《中国药典》2010年版二部纯化水项下规定 注射用水 纯化水经蒸馏或反渗透 注射剂、输液、眼用制剂的配制及其容器的精洗，注射剂须经灭菌方可应用于临床 符合《中国药典》2010年版二部注射用水项下规定 灭菌注射用水 注射用水经灭菌 可直接用于临床，溶解或分散灭菌粉末的溶剂，注射剂的稀释，冲洗伤口等 符合《中国药典》2010年版二部灭菌注射用水项下规定

5 （三）原水处理技术 1. 初滤和精滤 2. 电渗析法（electrodialysis method）
3. 反渗透法（reverse osmotic method） 4. 离子交换法（ion-exchange method）

6 过滤是除去原水中悬浮固体杂质的有效方法。
初滤和精滤 过滤是除去原水中悬浮固体杂质的有效方法。 石英砂滤器可滤除较大固体杂质； 活性炭滤器可吸附热原等有机物； 细过滤器由聚丙烯多孔管上缠绕聚丙烯滤线组成，可除去5mm以上微粒。

7 2. 电渗析法（electrodialysis method, EM）
主要是除去原水中带电荷的某些离子或杂质。

8 3. 反渗透法（reverse osmotic method）
反渗透法是目前国内纯化水制备使用较多的方法，具有耗能低，水质好、设备使用与保养方便等优点，若装置合理，也能达到注射用水的质量要求。

9 反渗透法制备高纯水的工艺流程图

10 4.离子交换法（ion-exchange method）
优点：水质化学纯度高， 所需设备简单，成本低， 对热原、细菌也有一定 去除作用。 缺点：除热原效果不可 靠，离子交换树脂需经 常再生或定期更换树脂。 类型：阳离子树脂（氢 型、钠型），阴离子树 脂（羟型、氯型）

11 （四）注射用水的制备技术 1. 蒸馏法（distillation method） 2. 反渗透法 3. 综合法 4. 注射用水的收集保存
5. 注射用水的检查

12 1. 蒸馏法 用蒸馏法制备注射用水是在纯化水的基础上进 行，可除去水中所有不挥发性微粒（包括悬浮物、 胶体、细菌、病毒、热原等杂质）、可溶性小分子 无机盐、有机盐、可溶性高分子材料等，是最经典、 最可靠的制备注射用水的方法。

13 （1）多效蒸馏水器（multi-effect distillator）
特点：热效率高、耗能低、 出水快、纯度高、水质稳 定，并有自动控制系统。

14 （2）气压式蒸馏水器（vapor compression still）
利用离心泵将蒸汽加 压，以提高蒸汽利用率的 蒸馏水器。它利用外界能 量（机械能、电能）将低 温热能转化为高温热能的 原理而设计。

15 目前国内由于膜材料除离子还不够彻底，仍以蒸馏法制备注射用水为主。
2. 反渗透法 一级反渗透装置能除去一价离子90%~95%，二价离子98%~99%，同时还能除去热原和病毒，但除去氯离子的能力达不到药典的要求。 需要至少二级反渗透系统才能制备注射用水。 目前国内由于膜材料除离子还不够彻底，仍以蒸馏法制备注射用水为主。

16 3. 综合法 目前国内普遍采用该法制备注射用水 自来水 砂滤器 活性炭过滤器 细过滤器 电渗析装置或反渗透装置 阳离子树脂 脱气塔
阴离子树脂 混合树脂床 多效蒸馏水机或气压式蒸馏水机 热贮水器(80℃) 注射用水 目前国内普遍采用该法制备注射用水

17 注射用水的贮罐和输送系统应设置在线清洗、灭菌设施。
4. 注射用水的收集保存 2009年GMP修行办规定注射用水可采用 80℃以上保温 70℃以上保温循环 4℃以下存放 注射用水的贮罐和输送系统应设置在线清洗、灭菌设施。

18 5. 注射用水的质量检查 氯化物 重金属 pH 铵盐 热原 《中国药典》2010年版注射用水项下有关规定。

19 二、液体的过滤技术 （一）概述 过滤：利用过滤介质截留液体中混悬固体颗粒而达到固液分离的操作。 滤材 过滤介质 滤浆 待过滤液体
滤饼（滤渣） 被截留于过滤介质的固体 滤液 通过过滤介质的液体

20 （二）过滤机制与影响因素 1. 过滤机制 （1）介质过滤（medium filtration） 表面过滤 深层过滤
（2）滤饼过滤（cake filtration）

21 （1）介质过滤（medium filtration）
1)表面过滤系指粒子截留 在介质表面上，此时粒子 大小必须大于过滤介质的 微孔。 2)深层过滤系指粉尘的过 滤过程发生在过滤介质内 部，此时尘粒的粒径可小 于介质的微孔。 微孔滤膜、超滤膜、反渗 透膜等。 砂滤棒、垂熔玻璃漏斗、 多孔陶瓷、石棉过滤板等。

22 （2）滤饼过滤 被截留的固体粒子聚集在过 滤介质表面形成滤饼，使过滤 的拦截作用主要由滤饼产生。
若药液中固体粒子含量在 3%~20%时易产生滤饼过滤。 滤饼过滤的过滤速度和阻力 受滤饼的影响，如药物重结晶、 药材浸出液的过滤都属于滤饼 过滤。

23 2. 影响滤过的因素 过滤速度系指单位时间通过单位面积的滤液量。假定滤液 流过致密滤渣层的间隙为均匀的毛细管束，此时液体的流动遵 循Poiseuille公式： V=Pπr4t/8ηL 时间 单位面积上的过滤容量 毛细管长度 ①过滤操作压力—压力越大，滤速越快； ②空隙大小 —空隙越小，阻力越大，滤速越慢； ③滤液黏度 —黏度越大，滤速越慢； ④毛细管长度 —滤饼沉积量越多，滤速越慢。 ①提高过滤介质上下压差； ②设法使颗粒变粗以减少滤饼阻力； ③提高滤液温度以降低滤液黏度； ④先进行预滤，减少滤饼厚度。 操作压力 介质层中毛细管半径 液体黏度

24 （三）过滤器和过滤装置 1.砂滤棒过滤器 2.垂熔玻璃过滤器 3.微孔滤膜过滤器 4.板框过滤器

25 1. 砂滤棒过滤器 硅藻土滤棒：主要成分为SiO2Al2O3，适用于粘度高、大量 的药液过滤。
多孔素瓷滤棒：白陶土烧结而成，适用于低粘度的药液过 滤。 优点：价廉易得，滤速快，适用于大生产中粗滤。 缺点：易于脱砂，对药液吸附性强，难清洗，有改变药液pH现象，且吸留滤液多。

26 2. 垂熔玻璃过滤器 根据滤器形状分为：垂熔玻 璃漏斗、垂熔玻璃滤球、垂 熔玻璃滤棒。
滤板号 1 2 3 4 5 6 滤板孔径 (μm) 80-120 40-80 15-40 5-15 2-5 2以下 用途 常压过滤 减压过滤/加压过滤 除菌过滤 优点：化学性质稳定；吸附性低；易清洗，不易裂漏和脱屑。 缺点：价格高，脆而易破。

27 3. 微孔滤膜过滤器

28 微孔滤膜常用材料 主要用途 醋酸纤维素膜 无菌过滤 硝酸纤维素膜 水溶液、空气、油类、酒类除去微粒和细菌 醋酸与硝酸纤维混合酯膜 同上
聚酰胺（尼龙）膜 弱酸、弱碱、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯 聚四氟乙烯膜 酸性、碱性、有机溶剂的过滤 聚偏氟乙烯膜（PVDF） 过滤精度 ；pH1-12

29 3. 微孔滤膜过滤器 优点 微孔孔径小、均匀、截留能力强，不受液体流速和压力的影响，有利于提高注射剂澄清度； 滤膜吸附性小，不滞留药液； 1
4 滤膜吸附性小，不滞留药液； 2 优点 微孔质地轻而薄（ mm），而且空隙率大（80%左右）,因此通过滤膜时阻力小，滤速快； 5 滤膜用后弃去，无产品之间交叉污染。 滤膜是一个连续整体，过滤时无介质脱落，不影响药液pH； 3 缺点： 易堵塞；有些纤维素类材质稳定性不理想。

30 4. 其他过滤器 板框压滤机 超 滤

31 （四）常见过滤方式 常见过滤方式 特点 高位静压过滤 适用于生产量不大，缺少加压减压设备的情况。
药液在楼上配制，通过管道到楼下过滤。此法压力稳定，滤速稍慢； 减压过滤 即抽滤，从过滤到灌注都在密封条件下进行，药液不宜被污染。此法操作压力不够稳定，操作不当易使滤层松动，影响质量； 加压过滤 压力稳定、滤速快、质量好、产量高，多用于药厂大生产。此法全部装置保持正压，外界空气不易漏入过滤系统，有利于防止污染，适合无菌过滤，但需要耐压设备。

32 三、热原去除技术 1. 热原（pyrogen） 热原是微生物的一种内毒素（endotoxin），它 存在于细菌细胞膜和固体膜之间。
热原是磷脂、脂多糖和蛋白质的复合物，其中脂 多糖是内毒素的主要成分，具有特别强的致热活 性。通常认为热原＝内毒素＝脂多糖。热原分子 量一般为1106左右。

33 2. 热原的性质 耐热性 过滤性 吸附性 在180℃-200℃，干热2h
2. 热原的性质　　 耐热性 过滤性 吸附性 在180℃-200℃，干热2h 250℃干热45min 650℃ 1min可使热原彻底破坏。（普通灭菌法无效） 热原体积小，约在1-5nm之间，故一般滤器均可通过。但活性炭可以吸附热原。 多孔活性碳可吸附热原。 水溶性 不挥发性 其他 热原本身不挥发，但在蒸馏时，往往可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水。（注射用水用蒸馏法的原理） 热原能被强酸、强碱破坏，也能被强氧化剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，超声波也能破坏热原。 热原能溶于水。（无法沉淀除去）

34 3. 热原的污染途径 注射用水 原辅料 生产过程 注射剂被热原污染的主要途径，应避免注射用水贮存时间过长，尽量使用新鲜的注射用水。
注意右旋糖酐、水解蛋白、抗生素、葡萄糖、乳糖等原辅料生产贮存条件。 注意室内卫生条件、避免操作时间过长，装置密闭不严。 容器、用具、管道和装置等 注射器具 输液瓶、乳胶管、针头与针筒也是不可忽视的污染源，目前都采用一次性输液器具。 严格按GMP要求认真清洗处理，合格后方能使用。

35 4. 去除热原的方法 (6)凝胶过滤法：二乙氨基乙基葡聚 糖凝胶(分子筛)。 (1)高温法：250℃，30min以上。
(2)酸碱法：重铬酸钾硫酸清洗液 或稀氢氧化钠液。 (7)反渗透法：通过三醋酸纤维膜除 去热原。 (3)吸附法：活性碳用量 %(w/v)。（注射剂除热源的主要方法） (8)超滤法： nm超滤膜。 (4)蒸馏法：利用热原的不挥发性， 在多效蒸馏水器中制备蒸馏水时， 热原仍留在浓缩水中。 (9)其他方法：如二次以上湿热灭菌，或适当提高灭菌温度和时间，以及微波等。 (5)离子交换：效果不可靠（注意 药液是否吸附）

36 四、渗透压调节技术 1. 等渗与等张的概念 系指血浆渗透压相等的溶液，因为渗透压是溶液的依数性之一，可用物理化学实验方法求得。 属于物理化学概念。 等渗溶液 指渗透压与红细胞膜张力相等的溶液，在等张溶液中既不会发生红细胞体积改变，更不会发生溶血。属于生物学概念。 等张溶液

37 红细胞在等渗、高渗、低渗溶液中的状态

38 配制等渗溶液所需加入的等渗调节剂的量，%， g/ml； 用以调节等渗的等渗调节剂1%溶液的冰点下降度。
2. 渗透压的调节方法 （1）冰点降低法：血浆的冰点为-0.52℃，因此任何 溶液，只要其冰点降低为0.52℃,即与血浆等渗。 配制等渗溶液所需加入的等渗调节剂的量，%， g/ml； 用以调节等渗的等渗调节剂1%溶液的冰点下降度。 等渗调节剂的用量可用下式计算： W=(0.52-a)/b 药物溶液的冰点下降度；

39 例1：用氯化钠配制100ml等渗溶液，问需要多少氯化钠？
查表知a=0, b=0.58，代入冰点降低法计算公式， W=(0.52-0)/0.58=0.9% 100 ml×0.9% g/ml=0.9g 例2：配制2%盐酸普鲁卡因溶液100 ml ，需加多少克氯化钠使 其成为等渗溶液？ 查表知1%盐酸普鲁卡因冰点下降度为0.12，因此2%盐酸普鲁 卡因的冰点降低为a=0.12×2=0.24，b=0.58，代入冰点降低法计 算公式， W=( )/0.58 =0.478% 100 ml×0.478% g/ml=0.478 g

40 （2）氯化钠等渗当量法：与1g药物呈等渗效应的氯化 钠量。每100mL药物溶液所需等渗调节剂的用量X可 用下式计算：
X=0.9-EW 对于复方制剂有EW = E1W1 + E2W2 + … + EnWn。 欲配药物的氯化钠等渗当量，g 100mL溶液中药物含量，% (g/mL)

41 例3：配制100ml葡萄糖等渗溶液，需要加入多少克无 水葡萄糖？
葡萄糖的E=0.18，氯化钠等渗溶液的浓度为0.9%，因 此在100 ml溶液中， 0=0.9–0.18×W，W=5% g/ml 100ml×5% g/ml= 5g 例4：配制2%盐酸麻黄碱溶液200ml，欲使其等渗， 需要加入多少克氯化钠或无水葡萄糖？ WNaCl =(0.9–0.28×2)×200/100=0.68g Wglu:0.68g =5%:0.9%, Wglu= 3.78g

42 五、灭菌和无菌操作技术 无菌（sterility）
灭菌（sterilization） 无菌操作（aseptic processing） 防腐（antisepsis） 消毒（disinfection） 杀灭或除去所有 微生物繁殖体和 芽孢，最大限度 地提高药物制剂 的安全性，保证 制剂的临床疗效。

43 灭菌方法 物理灭菌法 化学灭菌法 无菌操作法 过滤除菌法 干热灭菌法 射线灭菌法 气体灭菌法 化学药剂灭菌法 湿热灭菌法 火焰灭菌法 干热空气灭菌法 热压灭菌法 流通蒸汽灭菌法 煮沸灭菌法 低温间歇灭菌法 辐射灭菌法 紫外线灭菌法 微波灭菌法

44 （一）物理灭菌法（physical sterilization）
利用加热、射线和过滤方法杀灭或除去微生物的 技术称为物理灭菌法，也称物理灭菌技术。 1. 热力灭菌法 （1）干热灭菌法 火焰灭菌法 干热空气灭菌法 （2）湿热灭菌法 热压灭菌法 流通蒸汽灭菌法 煮沸灭菌法 低温间歇灭菌法

45 （1）干热灭菌法 包括： 灭菌温度和时间： 160 -170℃灭菌 ＞2h； 170 -180℃灭菌 ＞1h；
　　包括： 　　灭菌温度和时间： ℃灭菌 ＞2h； ℃灭菌 ＞1h； 250℃灭菌 ＞ 45min. 火焰灭菌法 干热空气灭菌法

46 1）火焰灭菌法 用火焰直接灼烧灭菌的方法，迅速、可靠、简便。 适用于耐火焰材质（如金属、玻璃及瓷器等）的物 品与用具的灭菌， 不适合药品灭菌。

47 2）干热空气灭菌法 系指用高温干热空气灭菌的方法。 适用耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿气穿透的油脂类和耐高温的粉末化学药品的灭菌， 不适于橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。

48 热压灭菌法 流通蒸气灭菌法 煮沸灭菌法 低温间歇灭菌法
（2）湿热灭菌法 系指用饱和蒸气 、流通蒸气或沸水进行进行灭菌 的方法。 热压灭菌法 流通蒸气灭菌法 煮沸灭菌法 低温间歇灭菌法 是药物制剂在生产中最常用的灭菌方法。

49 系指用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢。
1）热压灭菌法 —注射剂生产中最广泛应用 　　系指用高压饱和水蒸气加热杀灭微生物的方法。能杀灭所有细菌繁殖体和芽孢。 适用于耐高温和耐高压蒸汽的所有药物制剂、玻璃容器、金属容器、瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等。

50 1）热压灭菌法 优点：灭菌可靠、操作方便、易于控制、经济。 常用灭菌温度和时间（必须保证SAL≤10-6）： 116℃(67 kPa)、40 min； 121℃(97 kPa)、30 min / 15 min 126℃(139 kPa)、15 min

51 2）流通蒸汽灭菌法 该法适用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。 3）煮沸灭菌法 该法灭菌效果较差，常用于注射器、注射针等器皿的消毒。 4）低温间歇灭菌法 该法适合于不耐高温、热敏感物料和制剂的灭菌。

52 影响湿热灭菌的因素： 微生物的种类与数量 1 蒸汽性质 2 灭菌温度和时间 3 液体制剂的介质性质 4

53 微生物种类与数量 耐热、压次序：芽孢＞繁殖体＞衰老体 微生物数量↓ → 灭菌时间 ↓

54 蒸汽性质 灭菌温度和时间 液体制剂的介质性质 饱和蒸汽： 热含量↑ 热穿透力↑ 灭菌效率↑ 湿饱和蒸汽：热含量↓ 热穿透力↓ 灭菌效率↓
饱和蒸汽： 热含量↑ 热穿透力↑ 灭菌效率↑ 湿饱和蒸汽：热含量↓ 热穿透力↓ 灭菌效率↓ 过热蒸汽： 热含量↑ 热穿透力↓ 灭菌效率↓ 灭菌温度和时间 灭菌温度愈高，灭菌时间愈长。药品被破坏的可能性愈大。 液体制剂的介质性质 耐热性：中性〉碱性〉酸性 营养物质↑ → 耐热性↑

55 2. 过滤除菌 系采用过滤法除去微生物的方法。 药品生产中采用的除菌滤膜孔径一 般不超过0.22μm。过滤除菌法虽 能除去微生物，但无法截留热原， 并非可靠的灭菌方法。 适用于对热非常不稳定的药物溶液、 气体、水等物料的灭菌。

56 3. 射线灭菌法（ray sterilization）
紫外线灭菌法（ultraviolet sterilization） 适合于照射物表面灭菌、无菌室空气；不 适合于药液的灭菌及固体物料深部的灭菌。 微波灭菌法（microwave sterilization） 适合液态和固体物料的灭菌，且对固体物料具有干燥作用。 不适用于生物大分子药物灭菌，对某些药用高分子材料可能产生药效降低或产生毒性物质和发热物质等。 辐射灭菌法（radiation sterilization）

57 （二）化学灭菌法 化学灭菌法（chemical sterilization）系指用化 学药品直接作用于微生物药物将其杀死的方法。
目的：减少微生物的数目， 控制一定的无菌状态。

58 1. 气体灭菌法 用化学消毒剂形成的气体杀灭微生物的方法。 常用的气态杀菌剂：环氧乙烷、甲醛、气态过氧化氢、臭氧等。
适用于:环境消毒和不耐热 的医用器具、设备和设施 等的消毒。

59 2. 药液法 指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法。 常用的消毒液有：75%乙醇、1%聚维酮碘溶液、 %新洁尔灭溶液、2%酚或煤酚皂溶液等。 适用于:皮肤、无菌器具和设备的消毒。

60 （三）无菌操作法 无菌操作法（aseptic processing）系指在无菌 控制条件下制备无菌制剂 的操作方法。

61 1. 无菌操作室的灭菌 （1） 甲醛溶液加热熏蒸法 灭菌较彻底，是常用方法之一 （2） 紫外线灭菌 无菌室灭菌的常用方法 （3） 液体灭菌
无菌室常用的辅助灭菌方法 （4） 臭氧灭菌法 替代紫外线照射与化学试剂 熏蒸灭菌的方法。

62 甲醛溶液加热熏蒸法 气体发生装置 （蒸气加热夹层锅） 液态甲醛 甲醛蒸气 鼓风机 无菌室关闭熏蒸12-24 h 湿度﹥60%温度﹥25℃ 25%氨水 除气

63 2. 无菌操作 场所：无菌操作室、层流洁 净工作台和无菌操作柜。 物品、器具及环境：均需按 前述灭菌方法灭菌，
人员：进入操作室之前要洗 澡，并换上已灭菌的工作服 和清洁的鞋帽，以免造成污 染机会。

64 （四）灭菌效力的检查方法与F0值 为保证终产品的无菌效果，多采用F与F0值来验证灭 菌的可靠性。 D值 Z值 F值与F0值

65 1. D 值 灭菌时其微生物的杀灭速度符合一级过程，
N0-原有微生物数，Nt-灭菌时间为t时残存的微生物数，k-灭菌 速度常数。以lgNt对t作图，得到一直线，斜率为 D 值的物理意义为，在一定温度下，杀灭90%微生物或残存率 为10%（降低一个对数单位，如lg100降至lg10）所需的灭菌时 间。 在一定灭菌条件下，不同微生物具有不同的D值；同一微生物 在不同灭菌条件下，D值亦不相同。

66 不同灭菌法不同微生物的D 值 灭菌方法 微生物 温度 介质或样品 D值(min) 蒸气灭菌 嗜热脂肪芽孢杆菌 105 5％葡萄糖水溶液
87.8 121 2.4 注射用水 3.0 产芽胞梭状芽孢杆菌 1.3 干热灭菌 枯草芽胞杆菌 135 纸 16.6 红外线灭菌 160 玻璃板 18秒

67 2. Z值 当灭菌温度升高时，速度常数k增大，而D值（灭 菌时间）随温度的升高而减少。在一定温度范围内 （ ℃）lgD与温度T之间呈直线关系。 Z值为降低一个lgD值所需升高的温度,即灭菌时间减 少到原来的1/10所需升高的温度或在相同灭菌时间内， 杀灭99%的微生物所需提高的温度。

68 3. F与F0值 （1）F值：系在一定灭菌温度（T）下给定的Z值所产 生的灭菌效果与在参比温度（T0）下给定的Z值所产生 的灭菌效果相同时，其灭菌效果相当于在参比温度下 灭菌了多长时间。 F 值常用于干热灭菌，其数学表达 式为： 每隔Δt时间内所测得灭菌物温度，℃ T0-参比温度，℃ 被灭菌物在某温度下的灭菌时间，min

69 （2）F0值：在湿热灭菌时，常用参比温度定位121℃， 以嗜热脂肪芽孢杆菌为微生物指示菌，该菌在121℃时， Z值为10℃，则：
为在一定灭菌温度（T）、Z值为10℃时灭菌t时间所 产生的灭菌效果与121℃、 Z值为10℃所产生的灭菌效 果相同时，其灭菌效果相当于在121℃下灭菌F0时间的 效果。因此称F0为标准灭菌时间，目前F0值仅限于热 压灭菌。

70 物理F0值等于D121值与微生物的对数降低值的乘 积。由于F0由微生物的D值和微生物的初始数及残存 数决定，所以F0又叫生物F0。
Nt-灭菌后预期达到的微生物残存数，又称染菌度 概率，一般取Nt为10-6，即原有菌数的百万分之一，或 100万个制品中只允许有一个制品染菌，认为达到了可 靠的灭菌效果。

71 为了保证F0值得灭菌效果，应注意以下两个问题：
①N0越大，即被灭菌物种微生物越多，则灭据时间越 长，故尽可能减少各工序中微生物对药品的污染，分 装好的药品应尽快灭菌，使初始微生物数在最低水 平。 ②为了得到可靠的灭菌效果，一般增加50%的F0值， 如规定F0为8 min，则实际操作应控制F0为12 min。

72 六、空气净化技术 （一）概 述 制剂生产车间需要采取空气净化技术，去除车间空气中的粉尘、烟、雾、蒸汽、不良气体、微生物等，保证制剂生产的洁净环境。

73 我国2009年GMP修订版将无菌药品生产所需结净区分为A、B、C、D四个级别：
（二）洁净室的净化标准 我国2009年GMP修订版将无菌药品生产所需结净区分为A、B、C、D四个级别： A级为高风险操作区，灌装区、 放置胶塞桶、敞口安瓿瓶、敞口 西林瓶的区域及无菌装配或连接 操作的区域，相当于静态100级 净化。 B级为A级区的背景区域，相 当于动态100级。 C级相当于10万级净化，对 无菌要求不太严的洁净区。 D级为生产无菌药品过程中重 要程度较差的结净操作区。

74 洁净室各级别洁净度空气悬浮粒子的标准规定
洁净度级别 悬浮颗粒最大允许数/立方米 静态 动态 ≥0.5μm ≥5μm A级 3500 1 B级 350000 2000 C级 20000 D级 不作规定

75 洁净区微生物监控的动态标准 级别 浮游菌 cfu/m3 沉降菌 (φ90 mm) cfu/4h 表面微生物 接触碟 (φ55 mm)
5指手套 cfu/手套 A级 <1 B级 10 5 C级 100 50 25 - D级 200

76 不同制剂配制对空气洁净度有不同要求。 ①大于50ml，最终需要灭菌的制剂：要求在10000级条件 下进行称量、配制、过滤，在100级条件下进行罐封； ②小于50ml，最终需要灭菌的制剂：可在10000级条件下 进行称量、配制、过滤和灌封； ③最终不灭菌的无菌制剂：要求在100级条件下进行生产； ④对口服制剂：要求在100000级条件下进行配制和分装； ⑤对非无菌外用制剂，可在300000级条件下进行配制和分 装。

77 （三）洁净室的净化标准 1. 空气的过滤 初效过滤器 主要用于滤除大于5μm的悬浮粉尘 中效过滤器 主要用于滤除大于1μm的尘粒
亚高效过滤器 主要用于滤除小于1μm的尘埃 高效过滤器 主要用于滤除小于1μm的尘埃

78 2. 净化气流的组织 （1）层流：空气流线以平行状态单向流动。层流分 为垂直层流和水平层流，常用于100级洁净区
（2）乱流：气流具有不规则的运动轨迹。

79 垂直层流 垂直层流以高效过滤器为送风口布满顶棚，地板全部做成回风口，使气流自上而下地流动。实现层流必须有足够的气速，以克服空气对流。

80 水平层流 水平层流以高效过滤器为送风口满布一侧壁面，对应壁面为回风墙，气流以水平方向流动。

81 乱流 (c) (b) a、b形式可达到1000级，c、d可达到10000级，e形式只能达到10万级。

82 Thank you！