肿瘤免疫学 及检验 诊断学教研室 2007、5.

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1 肿瘤免疫学 及检验 诊断学教研室 2007、5

2 本章学习要点 ●掌握肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原、分化抗原的概念和分类，常用肿瘤标志物免疫学检测。 ●熟悉常见肿瘤标志物应用原则。
●了解肿瘤发生的因素、机体的抗瘤免疫效应机制肿瘤的免疫逃避机制。

3 引言 ●肿瘤免疫学研究的内容，主要涉及肿瘤的抗原性，肿瘤的免疫逃避机制，机体的抗瘤免疫效应，肿瘤的免疫学诊断和免疫学治疗等。
●肿瘤免疫学检验是通过免疫学方法检测肿瘤特异性或肿瘤相关性标志物，达到早期筛选、辅助诊断、病情检测和预后评估等目的。 ●由于免疫学方法的特异、简便、快速和敏感、肿瘤免疫学诊断已成为肿瘤的早期普查、辅助诊断和预后判断的重要手段。

4 第一节 肿瘤抗原 肿瘤抗原（tumour antigens) ——是细胞在癌变过程中表达的新抗原物质的总称、存
第一节 肿瘤抗原 肿瘤抗原（tumour antigens) ——是细胞在癌变过程中表达的新抗原物质的总称、存 在于肿瘤细胞表面或体液。 ——细胞癌变过程中合成的新的蛋白质分子 ——由于糖化等原因导致异常细胞蛋白质的特殊降解产物 ——由于突变等使蛋白质分子的结构发生改变 ——正常情况下处于隐蔽状态的抗原表位暴露出来 ——多种膜蛋白分子异常聚集 ——胚胎性抗原或分化性抗原的异常表达 产生机制

5 第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈠ 肿瘤特异性抗原（TSA） ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） 1. 胚胎抗原
第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈠ 肿瘤特异性抗原（TSA） ——指肿瘤细胞特有的或只表达于某种肿瘤细胞，而不存在于正常组织的抗 原。多为突变基因产物，如突变的ras癌基因产物。 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） ——不只存在于肿瘤患者的癌变细胞或体液中，也微量存在于正常细胞或体 液中，但发生肿瘤时，此类抗原含量明显升高，而无肿瘤特异性。 1. 胚胎抗原 ● 是一类在正常情况下表达在胚胎组织而不表达在成熟组织上的蛋白，当有 细胞癌变时，此类抗原可重新合成，如（AFP、CEA、FSA）等 ● 可表达于肿瘤细胞表面，也可分泌或脱落到体液中，作为诊断的物质基础 ● 此类抗原曾在胚胎时出现过，宿主对此不产生免疫应答 ● 在异种动物中具有很强的免疫原性，可利用制备特异性抗血清用于检测

6 第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） 2. 分化抗原
第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） 2. 分化抗原 ● 为特定组织类型以及该组织正常分化的特定阶段所特有 ● 肿瘤细胞从单一细胞发源的克隆性扩增群体，常过量表达 ● 来源于特定组织的肿瘤可表达该组织的分化抗原，如PSA 恶肿表达其他正常组织细胞特异性分化抗原，如ABO血型抗原 某些可表达未分化的或幼稚细胞的分化抗原，如（TL）抗原 ● 由于分化抗原是正常细胞的一部分，不能刺激抗肿瘤的免疫应答 ● 可作为免疫治疗的靶分子和肿瘤组织来源的诊断标志

7 第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） 3. 其他TAA 组织细胞来源 肿瘤 抗原
第一节 肿瘤抗原 一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） 3. 其他TAA ● 糖链抗原（CA）、组织多肽抗原、免疫抑制酸性蛋白、铁蛋白、 唾液酸、β2M等升高时可作为相应肿瘤的诊断指标 表 某些组织特异性肿瘤抗原 组织细胞来源 肿瘤 抗原 B细胞 B细胞白血病和淋巴瘤 CD10、Ig T细胞 T细胞白血病和淋巴瘤 IL-2R、TCR、CD45R、 CD4/CD8TL抗原 前列腺 前列腺癌 PSA、PAP 神经嵴 黑色素瘤 S-100等黑色素相关抗原瘤 上皮细胞 多种癌 细胞角蛋白

8 第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 肿瘤抗原 1. 理化因素诱发的肿瘤 理化因素 病毒诱发 自发性 胚胎性和分化 甲基胆蒽 紫外线
第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 肿瘤抗原 1. 理化因素诱发的肿瘤 ● 化学或物理因素  ● 肿瘤的抗原性较弱 ● 表现出高度个体化 ● 具有不同的抗原特异性 ● 人类肿瘤大多不属此类 理化因素 病毒诱发 自发性 胚胎性和分化 甲基胆蒽 紫外线 氨基偶氮染料 X射线 二乙基亚硝氨 放射性粉尘

9 第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 2. 病毒诱发的肿瘤 3. 自发性肿瘤的抗原 ● 人类大多数肿瘤属于自发肿瘤，无明显诱因
第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 2. 病毒诱发的肿瘤 ● 病毒基因整合到宿主细胞基因中，使其表达病毒基因编码蛋白 ● 编码蛋白经处理后形成病毒肽-MHC-I类分子，并表达在肿瘤细胞表面 刺激机体产生针对肿瘤的特异性免疫应答 ● 同一种病毒诱发的不同类型的肿瘤均可表达相同的抗原 ● 具有较强的免疫原性，在患者血清中可检出较高效价相关病毒抗体 3. 自发性肿瘤的抗原 ● 人类大多数肿瘤属于自发肿瘤，无明显诱因 ● 一些类似于化学因素诱发的肿瘤，有明显的个体特异性 ● 一些类似于病毒诱发的肿瘤具有共同抗原

10 第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制 一、细胞免疫机制 1. T 细胞 2. NK细胞 杀伤机制
● CD8+CTL是抗肿瘤免疫的主要效应细胞，其杀伤肿瘤细胞受MHC-I类 抗原限制，可识别肿瘤细胞表面的MHC-I类分子-肿瘤抗原肽复合物， 也可通过分泌多种细胞因子如IFN-γ、TNF直接杀伤肿瘤细胞。 ● CD4+Th细胞杀伤肿瘤细胞受MHC-II类抗原限制抗原限制，同时在激活 CD8+CTL 中起辅助作用，通过释放细胞因子如IL-2、IFL- γ等激活单核 -巨噬细胞、NK细胞，增强CD8+CTL的杀伤功能。 2. NK细胞 ● 不受MHC限制，非特异性、可直接杀伤肿瘤细胞 ● 释放穿孔素和颗粒酶引起肿瘤坏死或凋亡 ● 释放NK细胞因子和TNF等可溶性介质，杀伤肿瘤细胞 ● 通过 ADCC作用杀伤肿瘤细胞 杀伤机制

11 第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制 一、细胞免疫机制 3. 巨噬细胞 杀伤机制 4. LAK细胞 ● Mφ即作为提呈抗原APC、
3. 巨噬细胞 ● Mφ即作为提呈抗原APC、 也参与T、B细胞的特异性杀瘤效应 ● 活化Mφ与肿瘤细胞结合后，释放特异性 Mφ武装因子杀伤肿瘤 ● 处理和提呈肿瘤抗原，协助T、B细胞发挥特异性杀伤作用 ● 细胞活化Mφ产生细胞毒性因子TNF、NO等介导杀伤、和溶解肿瘤 4. LAK细胞 ● 淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）属非特异性肿瘤杀伤细胞 ● 肿瘤侵润淋巴细胞大多是T细胞， 具有肿瘤抗原特异性和MHC限制性 ● LAK细胞和TIL细胞均在IL-2诱导下产生，对多种来源的肿瘤细胞杀伤 杀伤机制

12 第二节 机体的抗肿瘤免疫效应机制 二、体液免疫机制 1. 补体依赖的细胞毒作用 2. ADCC效应杀伤瘤细胞作用 3. 调理吞噬作用
1. 补体依赖的细胞毒作用 ● 抗瘤抗体与肿瘤抗原结合形成抗原-抗体复合物，通过激活补体的 经典途径，发挥溶细胞作用 2. ADCC效应杀伤瘤细胞作用 ● 效应细胞如Mφ、 NK细胞、中性粒细胞等表面有表面有FcrR，可与 肿瘤特异性抗体结合，并借助ADCC效应直接杀伤肿瘤细胞 3. 调理吞噬作用 ● 抗瘤抗体可通过调理作用促进巨噬细胞吞噬肿瘤细胞的作用 4. 干扰肿瘤细胞的黏附特性 ● 抗体与抗原结合，封闭肿瘤细胞表面的受体，抑制肿瘤增殖 ● 封闭肿瘤抗原，阻碍肿瘤细胞的黏附特性而影响肿瘤生长和转移

13 第三节 肿瘤逃避免疫攻击机制 一、与肿瘤细胞有关的因素 肿瘤患者机体并不能有效地清除癌变细胞，这除与机体的内在因
素有关外，与肿瘤细胞本身的逃避宿主免疫系统攻击有关。 1. 肿瘤细胞的抗原缺乏和抗原调变 ● 肿瘤细胞缺乏有效的抗原性表位，难以激发抗肿瘤免疫效应 ● 抗原调变指宿主免疫系统攻击肿瘤，使其表面抗原决定簇减少或 丢失而逃避杀伤 2. 肿瘤细胞异常表达的MHC分子 ● 肿瘤细胞表面的MHC-I类分子表达降低或缺失，使机体的 CTL不 能识别肿瘤细胞表面的抗原，肿瘤细胞得以逃避宿主免疫攻击。

14 第三节 肿瘤逃避免疫攻击机制 一、与肿瘤细胞有关的因素 3. 肿瘤细胞表面“抗原覆盖” 4. 肿瘤细胞缺乏共刺激分子
3. 肿瘤细胞表面“抗原覆盖” ● 肿瘤细胞表面被肿瘤细胞表达的唾液粘多糖或表达肿瘤激活的凝 聚系统所封闭或覆盖，阻碍CTL对肿瘤细胞的识别和攻击 ● 血清中存在的封闭因子可封闭肿瘤细胞表面抗原决定簇或效应细 胞的抗原识别受体，逃脱效应细胞的识别，免遭CTL攻击 4. 肿瘤细胞缺乏共刺激分子 ● 某些肿瘤细胞缺乏共刺激分子B7-1和黏附分子，因此，不能诱 发机体产生有效抗肿瘤疫应答，使T细胞不能有效的杀伤瘤细胞

15 第三节 肿瘤逃避免疫攻击机制 一、与肿瘤细胞有关的因素 5. 肿瘤细胞的“漏逸” 6. 肿瘤细胞导致免疫抑制 7. 肿瘤细胞表达FasL
5. 肿瘤细胞的“漏逸” ● 当肿瘤的生长速度，超过的机体有效清除肿瘤细胞的能力，大量 肿瘤细胞留在体内得以生长 6. 肿瘤细胞导致免疫抑制 ● 肿瘤细胞直接侵犯免疫器官而引起免疫抑制作用 ● 也可通过分泌细胞因子抑制机体产生抗肿瘤免疫应答的产生 7. 肿瘤细胞表达FasL ● 某些肿瘤细胞高表达FasL，与肿瘤细胞特异性T细胞表达的Fas 作用，导致CTL的凋亡 二、与宿主免疫系统有关的因素

16 第四节 肿瘤的免疫学检验 肿瘤标志物的定义：
第四节 肿瘤的免疫学检验 肿瘤标志物的定义： 肿瘤标志物（tumor marker, TM）是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的，反映肿瘤存在和生长的一类物质。这类物质包括蛋白质、激素、酶（同工酶）、多胺及癌基因产物等。肿瘤患者血液或体液中肿瘤标志物的检测，对肿瘤的辅助诊断、鉴别诊断、疗效观察、病情监测以及预后的评价具有一定的价值。

17 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 1. 甲胎蛋白（AFP） 成人血清AFP升高见于： ㈠ 血清肿瘤标志物的检验
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 1. 甲胎蛋白（AFP） 是胎儿早期血清中主要的蛋白质，其浓度4-5月的胎儿血清含量最高随胎儿增长而逐渐下降，出生后1岁趋于正常。当肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶性病变时，AFP含量升高. AFP的检测: EIA 和RIA ；正常成人<20 μ g/L 成人血清AFP升高见于： ☞原发性肝癌（80-90 %）可在症状出现前3-8个月作出诊断 ☞非转移性肝癌及肝外肿瘤，生殖腺胚胎癌、胃癌或胰腺癌 ☞非肿瘤性疾病；先天性胆道闭锁症，急性肝炎，肝硬化等 ☞孕妇血清AFP增高，当＞300 μ g/L时，胎儿可出现异常。

18 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 2. 癌胚抗原（ CEA） 血清CEA升高见于： ㈠ 血清肿瘤标志物的检验
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 2. 癌胚抗原（ CEA） 主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常情况下CEA 入胃肠道，而肿瘤细胞分泌的CEA则进入血液和 淋巴液，故血中CEA 含量会增高。CEA是一种广谱的肿瘤标志物。 CEA的检测： EIA 、RIA 参考值<5μg/L （97%健康人低于此值） 吸烟者可达 5 μg/L 血清CEA升高见于： ☞ 消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。 ☞ 非消化道恶性肿瘤：如卵巢癌、肺癌有不同程度升高。 ☞ 检测胸、腹水或胃液的CEA含量对鉴别诊断有意义。 ☞ CEA与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症的检出率。

19 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 3. 前列腺特异性抗原(PSA) ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 血清PSA 分子形式：
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 3. 前列腺特异性抗原(PSA) 血清PSA 分子形式： 复合型PSA (t-PSA) 参考值 < 4.0 μg /L F/T比值＞0.11 游离型PSA (f-PSA) 参考值 < 1.0 μg /L （PSA）是一种仅由前列腺上皮细胞分泌的糖蛋白，正常人血清中PSA含量极微，当恶性肿瘤或炎症时，正常腺管结构遭到破坏，血清中PSA水平升高。正常人血清中PSA＜4ug/L。 PSA升高有 41～42%的前列腺增升患者升高 两种情况： 前列腺癌时升高

20 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 3. 前列腺特异性抗原(PSA) ㈠ 血清肿瘤标志物的检验
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 3. 前列腺特异性抗原(PSA) ● 血清中PSA含量测定与前列腺体积之比对鉴别诊断有很大价值。 ● 血清中PSA含量测定的最大价值是鉴别前列腺癌疗效和判断预后。 注意：采集病人的血清标本前，若进行前列腺按摩，将导 致血清PSA升高。

21 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 4. 糖链抗原（CA） ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 （1）CA19-9、CA50
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈠ 血清肿瘤标志物的检验 4. 糖链抗原（CA） （1）CA19-9、CA50 CA19-9在消化道腺癌病人血清中的浓度可明显升高，是胰腺癌和胆管癌的肿瘤标志物。 （2）CA125 CA125是存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内的糖蛋白类相关抗原，作为卵巢癌的辅助诊断是个重要的标志物。 （3）CA15-3 CA15-3 是乳腺细胞上皮表面糖蛋白的变异体，因为对乳腺癌有一定的特异性，尤其晚期乳腺癌100%，故作为诊断乳腺癌的重要标志物。

22 第四节 肿瘤的免疫学检验 肿瘤标志物检测的临床意义 放射免疫测定法（RIA） 酶免疫测定法（EIA） 荧光免疫测定法 （FEIA）
第四节 肿瘤的免疫学检验 肿瘤标志物检测的临床意义 放射免疫测定法（RIA） 酶免疫测定法（EIA） 荧光免疫测定法 （FEIA） 时间分辨荧光分析法 化学发光法 电化学发光法酶免疫测定法（EIA）

23 第四节 肿瘤的免疫学检验 常用肿瘤标志物检测的免疫学方法 ● 用于大人群普查，可早期发现和诊断肿瘤 ● 鉴别良恶性肿瘤
第四节 肿瘤的免疫学检验 常用肿瘤标志物检测的免疫学方法 ● 用于大人群普查，可早期发现和诊断肿瘤 ● 鉴别良恶性肿瘤 ● 某些可定位肿瘤发生部位和肿瘤大小 ● 监测肿瘤治疗效果 ● 预测肿瘤的复发 ● 肿瘤的联合检测，提高肿瘤诊断的阳性率和准确性

24 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ——借助免疫组织学技术和流式细胞术检测细胞表面某些TAA可用于肿瘤的辅助诊断，如
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈡ 细胞表面肿瘤标志物 ——借助免疫组织学技术和流式细胞术检测细胞表面某些TAA可用于肿瘤的辅助诊断，如 ● 淋巴瘤和白血病细胞表面CD分子的检测 ● 探寻腹腔渗出液中的癌细胞 ● 细胞核抗原辅助诊断恶黑、和霍奇金淋巴瘤和预后 ● 角蛋白辅助诊断小细胞未分化癌和低分化癌 ● 波状蛋白辅助诊断胸腺癌、甲状腺癌、胃癌和卵巢癌 ● 癌胚铁蛋白辅助诊断肝癌

25 第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 二、肿瘤患者的免疫功能状态评估 ——放射性核素导向对肿瘤进行体内定位诊断
第四节 肿瘤的免疫学检验 一、肿瘤患者的免疫学诊断 ㈢ 体内免疫成像诊断 ——放射性核素导向对肿瘤进行体内定位诊断 二、肿瘤患者的免疫功能状态评估 ● 肿瘤患者免疫功能的高低与肿瘤的预后关系密切 ● 判断病情发展、评估手术和化疗的疗效的效果和预后 肿瘤免疫功能状态评估 ● T 细胞亚群、NK细胞和吞噬细胞数量、活性和功能测定 ● 血清中抗体、补体和某些细胞因子水平检测

26 第三十章 移植及其 免疫检验 宁医临床学院 诊断学教研室 杨宝珍

27 本章学习要点 ●掌握供者、受者、移植抗原；急性、超急性、慢性排斥反应的概念。 ●熟悉排斥反应的种类及发生机制，排斥反应的免疫学检测，
●了解器官移植的基本目的，主要组织相容性、次要组织相容性、其他组织相容性的特点。

28 移植免疫及其免疫检测 器官移植 ●应用自体或异体的正常组织或器官置换病变的或功能缺损的组织、器官，借以维持和重建机体生理功能，这种疗法称为组织或器官移植。 ●提供健康组织或器官的个体称供者（donor） ●接受组织或器官者称受者（recipient） ●抗原成分（MHC）表达于细胞表面， 触发受体针对移植物发生排斥反应 ●移植免疫学是研究与排斥反应相关的 抗原及其诱导免疫应答机制的学科

29 第一节 概 述 一、移植类型 ●自体移植—将患者自身的器官、组织或细胞移 植给患者本人。
第一节 概 述 一、移植类型 ●自体移植—将患者自身的器官、组织或细胞移 植给患者本人。 ●同种同基因移植—遗传背景完全相同（同卵孪生子或近交系动物）之间移植。 ●同种异基因移植—同种系内不同个体间遗传背景不同的移植。 ●异种移植—不同动物种系个体间移植。

30 第一节 概 述 二、移植排斥反应 移植排斥反应 排斥反应发生的基础 指移植后，受体发生针 对移植物的免疫应答，造成 其免疫损伤的过程。
第一节 概 述 二、移植排斥反应 指移植后，受体发生针 对移植物的免疫应答，造成 其免疫损伤的过程。 移植排斥反应 排斥反应发生的基础 激活受体的 T、B细胞 以及其他免疫细胞，引 起一系列免疫炎症发生，而影响体内凝血、纤 溶系统和补体系统反应，导致移植物病理损伤。 是以受供体间组织 细胞的MHC及其他 组织相容性抗原 的差异。

31 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 人 类 白 细 胞 抗 原 （HLA） I类 II类 第 6 对 染 色 体 HLA-A HLA-b
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ● 最大限度减少存在于供受者之间组织相容性抗原的差异，是 提高同种移植器官的存活率，减少GVHR和HVGR反应。 第 6 对 染 色 体 人 类 白 细 胞 抗 原 （HLA） HLA-A HLA-b HLA-c HLA-DR HLA-DQ HLA-DP I类 II类 I类抗原—存在于所有 有核细胞膜上，以淋巴 细胞上的密度最大， 是排斥反应的最大抗原。 II抗原—主要表达在B细胞、 巨噬细胞和其它抗原递呈细 胞上，与免疫应答及免疫调 节有关。

32 第一节 概 述 一、 主要组织相容性抗原 ●HLA抗原（I、II）是最重要的人类主要组织相容性抗原
第一节 概 述 一、 主要组织相容性抗原 ●HLA抗原（I、II）是最重要的人类主要组织相容性抗原 ●T细胞对移植物具有超常的反应性和有效的细胞作用 ●供、受者之间HLA型别差异是发生排斥反应的主要原因 ●触发移植排斥的生物学效应，与HLA广泛的组织分布和特殊的分子结构密切相关。 来自供体HLA抗原提呈细胞和其它免疫细胞发挥双重作用 同种异体抗原 介导宿主抗移植物 反应（HVGR） 过客细胞的膜分子 参与移植物抗宿主 反应（GVHR）

33 第一节 概 述 一、 主要组织相容性抗原（ MHA） 直接识别—受体T细胞对移植物表面的同种异基因HLA
第一节 概 述 一、 主要组织相容性抗原（ MHA） 受者免疫细胞对移植物表面HLA的识别 ● 直接识别，活化以CD8+CTL为主的细胞， 参与强烈急性排斥反应。 ● 间接识别，活化以CD4+Th为主的细胞，慢性排斥反应中发挥作用。 二、次要组织相容性抗原（ mHA） ● 在供受者HLA完全配型情况下，引起的轻度、缓慢的移植排斥反应 的抗原，与个体间存在的 mHA密切相关。 两种方式 直接识别—受体T细胞对移植物表面的同种异基因HLA 分子的识别，无须加工、处理和递呈 间接识别—受体T细胞对具有相同基因背景的APC所加 工、处理的移植物HLA抗原肽的识别

34 第一节 概 述 三、其它组织相容性抗原 ● ABO抗原系统 ●组织特异性抗原
第一节 概 述 三、其它组织相容性抗原 ● ABO抗原系统 ► ABO血型抗体系天然抗体，系红细胞膜上的一类糖蛋白，位于人的 第九对染色体上，是一种重要的移植抗原。 ►广泛分布于人体器官组织血管内皮细胞表面，可使受者针对存在移植 物血管内皮表面的 ABO抗原发生血管排斥，导致移植失败。 ●组织特异性抗原 是一类特异性表达于各种器官、组织、细胞上的抗原系统 ►血管内皮细胞特异性抗原 ►肾、肝脏、胰腺、心脏、骨髓、皮肤等特异性抗原

35 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） —时间、组织免疫损伤机制和病理改变分为 超急性、急性、慢性排斥反应
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ——受者对供者组织器官移植产生的排斥反应 ● 供受者之间组织相容性抗原不相容 ● 受体内的免疫活性细胞能够发生免疫应答 —时间、组织免疫损伤机制和病理改变分为 ⑴ 超急性排斥反应 ——是指移植器官与受者血管接通后数分钟至24小时内发 生不可逆的体液 排斥反应。 超急性、急性、慢性排斥反应

36 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） 抗体 抗原 ⑴ 超急性排斥反应 反 应机 制 结 合
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑴ 超急性排斥反应 由于受者体内预存有抗供者组织抗原的抗体 （ HLA、ABO血型、血小板、血管内皮细胞表面抗原） ●激活补体，导致组织、器官损伤。 ●炎症介质引起血管通透性增高和中性粒细胞侵润，导致毛细血 管和小血管内皮细胞损伤、纤维蛋白沉积和大量血小板聚集， 形成血栓，从而使移植器官发生不可逆性缺血、变性和坏 死 反 应机 制 抗体 抗原 结 合 病 理 学 特 点

37 细胞免疫应答在急性排斥反应中发挥主要作用
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑵ 急性排斥反应 ——发生于移植后数周至数月内（80～90%）。在同种异基 因器官移植中最常见的一类排斥反应。 ——病理检查可见移植物组织出现大量巨噬细胞和淋巴细胞 侵润，提示T细胞发生活化和增殖。 ●CD4+Th细胞介导的迟发型超敏反应是主要的损伤机制 ●CD8+和CD4+CTL可直接杀伤表达异型抗原的移植物细胞 ●激活的Mφ和NK细胞也参与急性排斥反应的组织损伤 细胞免疫应答在急性排斥反应中发挥主要作用

38 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑵ 急性排斥反应 机 制
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑵ 急性排斥反应 ——急性血管排斥反应，主要是移植物血管受损伤 ——病理改变特点：血管栓塞，中性粒和淋巴细胞侵润、 纤 维蛋白沉积和血小板聚集，血管内皮细胞肿胀、坏死。 ● 受体产生针对移植物血管内皮细胞MHC 抗原的抗体，激 活补体导致细胞损伤。 ● 移植物血管内皮细胞抗原激活T细胞，CTL可直接杀伤靶 细胞，造成移植物血管内皮细胞损伤；CD4+T细胞产生细 胞因子，活化炎症细胞。 机 制

39 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑶ 慢性排斥反应 ——发生于移植手术后数月至数年，病情进展缓慢
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑶ 慢性排斥反应 ——发生于移植手术后数月至数年，病情进展缓慢 ——肾移植引起的排斥反应临床表现 ●单核细胞、中性粒细胞或血小板粘附于移植物肾血管内皮 部位，导致内膜纤维组织增生、小动脉管腔狭窄甚至闭塞 多发性硬化，肾间质中单核细胞侵润。 ●免疫抑制药不能抑制慢性排斥反应发生。 病 理 改 变

40 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑶ 慢性排斥反应 ——免疫学因素 ——非免疫学因素
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒈ 宿主抗移植物反应（HVGR） ⑶ 慢性排斥反应 ——免疫学因素 ●细胞与体液免疫反应均参与，T细胞 、Mφ等介导迟发型超敏反应 ●B细胞通过产生的抗体，激活补体或通过ADCC破坏血管内皮细胞。 ●由于移植物血管壁表达的同种异型抗原激活淋巴细胞进而诱导Mφ 分泌平滑肌细胞生长因子所致。 ——非免疫学因素 ●与组织器官退行性变有关，诱发因素为供者年龄、某些并发症、移 植物缺血时间过长、免疫抑制剂、微生物感染等。

41 第一节 概 述 三种排斥反应的特点 排斥反应类型 特点与发生机制 超急性排斥反应 发生于手术后48小时以内，受者体内预存HLA或ABO
第一节 概 述 三种排斥反应的特点 排斥反应类型 特点与发生机制 超急性排斥反应 发生于手术后48小时以内，受者体内预存HLA或ABO 血型抗体介导的体液免疫应答。 急性排斥反应 发生于手术后数周至数月内，临床最常见。以细胞免 疫应答为主，也可发生以抗内皮细胞HLA抗体介导的 体液免疫，后者又称急性脉管排斥反应。 慢性排斥反应 一般发生于移植后数月至数年，病程进展缓慢。引起 慢排的因素可有免疫相关与非免疫相关之分，前者与 细胞和体液免疫均相关，包括T细胞、 Mφ等介导迟发 型超敏反应等免疫损伤；后者主要与局部缺血、再灌 注、微生物感染等相关，此外与年龄、并发症等有关。

42 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒉ 移植物抗宿主反应（VGHR） 移植物含有大量免疫活性细胞， 受体免疫功能严重低下，
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒉ 移植物抗宿主反应（VGHR） 移植物含有大量免疫活性细胞， 受体免疫功能严重低下， 供受者MHC抗原不符等。 ——mHA抗原不符也可导致VGHR ——T细胞是介导VGHR主要效应细胞 ●供者CD4+T细胞识别受体MHC抗原，活化、增殖并分泌细胞因子，激活CTL、 Mφ细胞、NK细胞，直接或间接杀伤宿主靶细胞；细胞因子诱导LAK的产生，杀伤靶细胞。 原 因

43 第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒊ 微嵌合状态与双向移植排斥模式 ——在某些器官移植长期存活患者皮肤、淋巴结、骨髓、
第一节 概 述 ㈠ 移植排斥反应的类型 ⒊ 微嵌合状态与双向移植排斥模式 ——在某些器官移植长期存活患者皮肤、淋巴结、骨髓、 胸腺等多种器官中可检出供体来源的淋巴细胞，受体 对供体MHC抗原发生了免疫耐受，由此提出“双向移 植排斥反应”理论。 ——实体器官移植或骨髓移植后，受者体内均可同时存在 HVGR和GVHR ——器官移植成功后，在长期使用免疫抑制剂诱导下的双 向免疫耐受，形成微嵌合状态。

44 第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒈ 受体T细胞对供体MHC分子的识别
第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒈ 受体T细胞对供体MHC分子的识别 ——由于供受之间的组织相容性抗原的不同，移植物可刺 激受者的免疫应答，导致排斥反应。 ——受体细胞对供体MHC分子的识别可以通过两种途径提 供给受体细胞识别 ⑴直接途径— 受体T细胞识别移植物细胞表面的同种异型MHC分子 ● 移植物中树突状细胞和单核细胞等表面富含有 HLA的I、II分子，它 可以刺激供者移植物内的抗原提呈细胞 对受者机体的免疫系统提供 最初的抗原刺激。导致同种异基因移植排斥反应。

45 第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒈ 受体T细胞对供体MHC分子的识别
第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒈ 受体T细胞对供体MHC分子的识别 ⑵间接途径— 指通过受者的抗原提呈细胞对具有同种异基因HLA的 I、II分子的移植物细胞的识别。 ● 供者的同种异型抗原从移植物细胞脱落，被受者APC摄取，由受者 APC的MHC分子提呈给受体T细胞识别。 ● 间接识别，活化以CD4+Th为主的 细胞，分泌细胞因子，为CTL和B 细胞增殖、分化和成熟提供必须信息，导致移植物排斥的反应。 ● 次要组织相容性抗原也可通过间接识别途径提呈给受体T细胞识别， 引起缓慢的排斥反应。

46 第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒉ 不同T细胞亚群对同种异型MHC分子识别
第一节 概 述 ㈡ 移植排斥反应的免疫机制 ⒉ 不同T细胞亚群对同种异型MHC分子识别 ● CD8+和CD4+CTL分别识别不同类型的MHC分子； ● CD8+T细胞同种异型MHC-I类分子； ● CD4+T细胞同种异型MHC-II类分子；

47 第二节 移植排斥反应的监测 一、免疫细胞生物学活性的监测 ⒈ T细胞亚群的比例和功能监测 ⒉ T淋巴细胞表面活性标志的分析
第二节 移植排斥反应的监测 一、免疫细胞生物学活性的监测 ⒈ T细胞亚群的比例和功能监测 ● CD4 + /CD8 +细胞在临床排斥反应开始前4-5天升高。 ● CD4 + /CD8 +比值升高， ＞ 1.2时， ＜ 1.08时。 ⒉ T淋巴细胞表面活性标志的分析 ● CD45 + RO和CD45 + RA区别T 细胞静止和活化状态。 ● T细胞表达HLA-DR分子增加与移植肾的功能丧失密切相关。 ⒊ NK细胞功能监测 ●在排斥反应发生时活化T细胞分泌淋巴因子吸引NK细胞进入移植物，引起细胞毒反应。

48 第二节 移植排斥反应的监测 一、免疫细胞生物学活性的监测 ⒋ 细胞介导的淋巴细胞溶解（CML）试验 ⒌ 混合淋巴细胞培养（MLC）
第二节 移植排斥反应的监测 一、免疫细胞生物学活性的监测 ⒋ 细胞介导的淋巴细胞溶解（CML）试验 ● CML试验测定分两步 ： ● CML试验的高低与排斥反应的严重程度密切相关。 ⒌ 混合淋巴细胞培养（MLC） ● MLC试验测定受者淋巴细胞对供者移植物刺激后的反 应和抑制细胞的功能水平。 ⒍ 白细胞移动抑制试验 ● 测定的是致敏的淋巴细胞对细胞移动抑制因子的分泌。 ● 可以预测排斥反应的发生

49 第二节 移植排斥反应的监测 二、特异性体液免疫的监测 ⒈ 补体依赖性细胞毒（CDC） ⒉ B细胞细胞毒抗体的测定
第二节 移植排斥反应的监测 二、特异性体液免疫的监测 ⒈ 补体依赖性细胞毒（CDC） ● 检测受者血清中是否存在有抗供者MHC-I、II的抗体 ● 受者通过CDC作用破坏供者表达的I和II抗原细胞 ● CDC持续阳性的病例往往由于排斥反应的长期存在导 致移植肾功能丧失。 ⒉ B细胞细胞毒抗体的测定 ● 移植后受者产生抗供者B细胞抗体与排斥反应的发生关 系密切，持续存在表明排斥反应不可逆转。

50 第二节 移植排斥反应的监测 二、特异性体液免疫的监测 ⒊ 红细胞抗体抑制（EAI）试验 ⒋ 内皮-单核细胞抗体的测定
第二节 移植排斥反应的监测 二、特异性体液免疫的监测 ⒊ 红细胞抗体抑制（EAI）试验 ● 移植后EAI抗体存在与排斥反应的发生密切相关。 ⒋ 内皮-单核细胞抗体的测定 ● 内皮-单核细胞抗体是指针对血管内皮细胞的一种抗体, 同时与单核细胞有交叉反应。 ● 血管内皮细胞是超急性排斥反应和急性排斥反应中最早 受损的部位，其在排斥反应中起重要作用。

51 第二节 移植排斥反应的监测 三、细胞因子及其受体的监测 ⒈ IL-1及IL-1R的检测意义 ⒉ IL-2及IL-2R的检测意义
第二节 移植排斥反应的监测 三、细胞因子及其受体的监测 ⒈ IL-1及IL-1R的检测意义 ⒉ IL-2及IL-2R的检测意义 ⒊ TNF和可溶性TNF受体(sTNFR)的检测意义 ⒋ IL-6的检测意义 ⒌ 其他细胞因子的监测

52 第二节 移植排斥反应的监测 四、粘附分子的监测与排斥反应 VCAM-1和ICAM-1等。
第二节 移植排斥反应的监测 四、粘附分子的监测与排斥反应 ● 与移植排斥反应关系密切的黏附分子主要有ELAM-1、 VCAM-1和ICAM-1等。 ● 在急性移植排斥反应时（ ICAM-1主要在内皮细胞上、VCAM-1在肾球囊和近端肾小管）不仅原位表达增强，而且存在异位表达。

53 第二节 移植排斥反应的监测 五、非特异性免疫学监测 六、细针穿刺病理活检 ⒈ C反应蛋白（CRP） ⒉ β2-微球蛋白（ β2 -M）
第二节 移植排斥反应的监测 五、非特异性免疫学监测 ⒈ C反应蛋白（CRP） ● 在器官移植中CRP的增高对急性排斥反应有一定的价值 ⒉ β2-微球蛋白（ β2 -M） ● 肾小球滤过率的减少可导致血浆β2-M水平升高，当肾 小管吸收受损时可导致尿中β2-M出现。 ● β2-M在临床诊断急性排斥反应中前1-3天，血清水平 显著高于移植后正常曲线。是预测肾移植排斥反映发 生的有效方式， 六、细针穿刺病理活检

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