第十四章 中药及其制剂分析概论.

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1 第十四章 中药及其制剂分析概论

2 第一节 概述 基本概念 中药：以中医药学理论的术语表述其性味、功效和使用规律，并按中医药学理论指导临床应用的传统药物。包括植物药、动物药、矿物药。

3 例：人参 Ch.P.（2010） 【性味与归经】甘，微苦。归脾、肺、心经 【功能与主治】大补元气，复脉固脱，补脾 益肺，生津，安神。用于体虚欲脱，肢冷 脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴， 内热消渴，久病虚赢，惊悸失眠，阳痿宫 冷，心力衰竭，心源性休克。

4 例：牛黄 Ch.P.（2010） 【性味与归经】甘，凉。归心、肝经。 【功能与主治】清心，豁痰，开窍， 凉肝，息风，解毒。用于热病神昏， 中风痰迷，咽喉肿痛，口舌生疮。

5 中药制剂：Chinese Patent Medicine
系指以中药为原料按中医药学理论基础配伍、组方，以一定制备工艺和方法制成一定剂型的药物制剂，有规格、用法和用量，又称中成药。

6 中药制剂分析： 是以中医药理论为指导，运用现代分析理论和方法研究中药制剂质量的一门应用学科。

7 中药制剂分析的意义和任务 意义 保证人民用药安全、合理和有效 2. 监 控工艺和原料

8 任务： 1. 原料的质量分析 2. 制剂的质量分析 3. 体内药物分析 4. 对照品的研究 5. 中药分析方法学研究

9 WHO统计 全世界80%的人使用天然药物 香港 60%的人服用中药进行保健与治病 90%中药材和75%中成药从内地输入 日本 汉方药纳入医保，70%的医生开汉方药 德国、法国 草药已纳入医疗保险体系 英国 伦敦有近1000家中药店，600家中医诊所 美国 开始接受天然药物的复方制剂作为治疗药

10 不少国家和地区从我国进口中药材，多数加工成中成药出口（包括返销中国）

11 美国 万美元/1995年 英国 万美元/年 德国 万美元/年 日本 亿美元/年（生产15亿美元中成药） 韩国 万美元/年（生产10亿美元中成药) 新加坡 万美元/年 马来西亚 3000万美元/年 泰国 万美元/年

12 中 国 日 本 批准生产的制剂 ＞5000 147 国际市场复盖率 3% 70%
WHO统计（2006年5月） 世界植物药年销售额超过160亿美元 日本和朝鲜占国际市场覆盖率达80～90% 我国中药制剂年出口额1亿左右，占3～5% 中 国 日 本 批准生产的制剂 ＞5000 147 国际市场复盖率 3% 70% 救心丹→六神丸，牛黄清心丸→牛黄清心液 75%原料来自中国

13 我国中药制剂目前存在的主要问题 中药材 *无产地、采收时间、主成分含量标记 *农药残留和重金属含量超标 中成药 *无安全性、质量可控性、有效性数据 *剂型包装落后

14 一、中药及其制剂分析的特点 * 绝大多数由多味中药组成 * 每味中药的成分都十分复杂（几十种性质不同的有机物或无机物、性质相似的同系物）
* 绝大多数由多味中药组成 * 每味中药的成分都十分复杂（几十种性质不同的有机物或无机物、性质相似的同系物） * 在制剂的生产过程中，各成分之间相互作用，使其发生质和量的变化

15 （一）化学成分的多样性与复杂性 活性成分含量悬殊 例 五倍子 鞣质＞70% 例 槐米 芦丁＞20% 例 长春花 长春新碱百万分之一
例 五倍子 鞣质＞70% 例 槐米 芦丁＞20% 例 长春花 长春新碱百万分之一 例 美登木 美登木碱千万分之一

16 例 黄芩 黄芩苷 ≥ % 蟾酥 华蟾酥毒基+脂蟾毒配基 ≥ % 三七 人参皂苷Rg1+Rb ≥ % 穿心连 内酯和脱水内酯 ≥0.80 % 大黄 大黄素和大黄酚 ≥0.50 % 人参 人参皂苷Rg1+Re ≥0.25 % 红参 人参皂苷Rg1+Re ≥0.20 % 吴茱萸 吴茱萸胺和吴茱萸次碱 ≥0.20 % 大青叶 靛玉红 ≥0.080%

17 单味药亦是混合物 酯类 生物碱 维生素 甾醇 多种酶 皂苷　　30多种 挥发油　29种 氨基酸　15种 矿物质　19种 糖类　　16种 有机酸　11种 例　人参

18 活性成分相互影响 例 柴胡皂苷d含量偏高 （柴胡、牡蛎） 牡蛎含碳酸钙＞90%，使药液pH↑， 减少了柴胡皂苷d的分解

19 （二）评价中药制剂质量要以中医药理 论为指导原则
（二）评价中药制剂质量要以中医药理 论为指导原则 组方分析 君、臣、佐、使 或有成熟分析方法、用量多的臣药

20 例 万氏牛黄清心丸 透邪泄热，开窍安神 牛黄 黄连 黄芩 栀子 朱砂 郁金 行气开窍 清心解毒豁痰开窍 清心安神 清热泻火 佐使 君 臣
例 万氏牛黄清心丸 透邪泄热，开窍安神 10g g g g g g 牛黄 黄连 黄芩 栀子 朱砂 郁金 行气开窍 清心解毒豁痰开窍 清心安神 清热泻火 佐使 君 臣

21 同一味药在不同的方中作用不同 例 左金丸 泻火，舒肝，和胃，止痛 （黄连、吴茱萸） 君药 例 黄连上清丸 清热通便，散风止痛 （黄连、栀子、连翘、蔓荆子、防风等）

22 例 安宫牛黄丸 清热解毒，镇惊开窍 （牛黄、水牛角浓缩粉、麝香、珍珠、 朱砂 雄黄、黄连、黄芩、栀子、郁金、冰片） 臣药

23 选择有临床疗效成分为分析重点 黄连 小檗碱（抗菌消炎） 麻黄 麻黄碱（治疗支气管哮喘） 洋地黄 强心苷（强心） 延胡索 延胡索乙素（镇痛）
黄连 小檗碱（抗菌消炎） 麻黄 麻黄碱（治疗支气管哮喘） 洋地黄 强心苷（强心） 延胡索 延胡索乙素（镇痛） 乌头 乌头碱（毒性）

24 根据临床作用选择分析重点 山楂 有机酸 消食健胃 黄酮类 降压、活血、强心

25 毒剧药 马钱子，生川乌，草乌，酯型生物碱，蟾酥，斑蝥，朱砂等

26 分析重点 君药 有成熟的分析方法、用量多的臣药 有临床疗效的成分 贵重药 毒剧药

27 （三）原料药材质量的差别 1. 原料药材的影响 原料药材的品种、规格、 产地、药用部位、采收季节、 加工方法的影响

28 （1）品种的影响 同名异物 例 重楼 百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎 又名 草河车、七叶一枝花、蚤休 例 拳参
例 重楼 百合科Paris polyphylla Smith. 的根茎 又名 草河车、七叶一枝花、蚤休 例 拳参 为蓼科Polygonum bistra L.的根茎 又名 草河车

29 （2）产地的影响 例 曼陀罗 日照可提高其叶中生物碱的含量 例 不同产地高低含量的差异（%） 高 低 金银花 绿原酸 3.42 0.45
例 曼陀罗 日照可提高其叶中生物碱的含量 例 不同产地高低含量的差异（%） 高 低 金银花 绿原酸 淫羊藿 淫羊藿苷 黄芪 黄芪甲苷

30 （3）药用部位的影响 例 不同部位人参皂苷的含量（%） 重量比 总皂苷 周皮 6.9 2.60 韧皮 46.6 3.04
例 不同部位人参皂苷的含量（%） 重量比 总皂苷 周皮 韧皮 木质部 叶（Rg1、Re）

31 例 小檗科作为淫羊藿入药的植物中淫羊藿苷含
量的比较（%） 品种 叶 茎 根 淫羊藿 箭叶淫羊藿 柔毛淫羊藿 朝鲜淫羊藿

32 （4）采收季节的影响 例 丹参酮 11、12月份含量最高 例 薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高 例 益母草 水苏碱 营养期含量最高
例 丹参酮 11、12月份含量最高 例 薄荷脑 秋季叶变黄时含量最高 例 益母草 水苏碱 营养期含量最高 益母草碱 营养期含量最低

33 例 丁香 Ch.P.（2010） 本品为桃金娘科植物丁香Eugenia caryophy- llata Thunb. 的干燥花蕾。当花蕾由绿色转红时采摘，晒干。 例 山茱萸 Ch.P.（2010） 本品为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb. Et Zucc. 的干燥成熟果肉。秋末冬初果皮变红时采收果实

34 2. 加工方法的影响 毒 流通蒸汽蒸制草乌 酯型生物碱↓ 总生物碱稳定

35 3. 伪劣药材的影响 （1）地方习惯用药 例 白花蛇舌草与水线草 板蓝根与南板蓝根 （2）贵重药材、紧缺药材

36 （四）制剂工艺及辅料的特殊性 制剂工艺的特殊性 例 3个地区生产的“黄精丸” 全浸膏、半浸膏、水提、酒提 同一制备工艺，不同生产企业有差别

37 例 三黄泻心汤干浸膏 常压 减压 逆浸透 成分（%） 浓缩 浓缩 喷雾 大黄酸葡萄糖苷 小檗碱 黄连碱 黄芩苷

38 辅料的特殊性 蜡丸 蜂蜡 蜜丸 蜂蜜 糊剂 糯米粉、黄米粉 水丸 药汁、生姜、大枣汤 曲剂 发酵 胶剂 豆油、黄酒、冰糖

39 （五）杂质来源的多途径性 泥沙，非药用部位，残留农药， 水质，虫蛀，发霉，泛糖
中药制剂的杂质来源要比化学制剂复杂的多，如药材中非药用部位及未除净的泥沙；药材中所含的重金属及残留农药；包装、保管不当所产生的霉变、走油、泛糖、虫蛀等产生的杂质；洗涤原料的水质二次污染等途径均可混入杂质。所以中药制剂易含有较高的重金属、砷盐、残留农药等杂质。

40 （六）有效成分非单一性 各有效成分的临床疗效非加和性 有效成分的含量高低与临床疗效不一定是简单的线性关系 检测任一活性成分都不能反映制剂所体现的整体疗效

41 中医辩证施治用的是药味而非某个 化学成分，是药味物质群（数量、组成 比例）的整体作用 例 人参皂苷 = 人参 麻黄碱 = 麻黄
比例）的整体作用　 例 人参皂苷 = 人参 麻黄碱 = 麻黄 甘草酸 = 甘草 多种成分协同作用或“相克作用

42 是提取物“整体”保证了其所具有的治疗作用
例 德、法联合开发的银杏叶提取物EG6761 把提取物所含的内酯和黄酮分离，则“都不具 备全部提取物整体的功效” 是提取物“整体”保证了其所具有的治疗作用

43 二、 中药制剂的分类与质量分析要点 （一）中药材及其炮制品 中药制剂的生产原料，是中药生产过程中质量保证的首要环节，其质量控制应严格按国家药品标准执行。

44 （二）液体制剂 1. 合剂与口服液 合剂：药材用水或其他溶剂提取， 提取液经浓缩制成的内服液体制剂。 口服液：单剂量包装的合剂。
合剂是在传统汤剂基础上改进后的一种新剂型

45 合剂：系指药材用水或其它溶剂，采用适宜方法提取、纯化、浓缩制成的内服液体制剂。单剂量灌装者也可称“口服液”。
例 八正合剂 Ch.P.（2010） 【处方】瞿麦、车前子、萹蓄、大黄、栀子等九味 【制法】以上九味，车前子用25%乙醇浸渍，收集浸渍液。大黄照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法（附录Ⅰ O），用50%乙醇作溶剂，浸渍24小时后进行渗漉，收集渗漉液，减压回收乙醇。其余七味加水煎煮三次，与浸渍液、渗漉液合并，静置，滤过，滤液浓缩至近1000 ml，加入苯甲酸钠3g，加水使成1000ml，搅匀，分装，即得。 【规格】 每瓶装（1）100ml（2）120ml（3）200ml 合剂：系指药材用水或其它溶剂，采用适宜方法提取、纯化、浓缩制成的内服液体制剂。单剂量灌装者也可称“口服液”。 合剂若加蔗糖作为附加剂，除另有规定外，含蔗糖量应不高于20%（g/ml）。 （口服，15～20ml/次）

46 药典规定： 不得有酸败、异臭、产生气体或 其他变质现象。 要求检查相对密度、 pH、装量。 微鉴别。糖或其他附加剂有干扰。
此制剂无植物组织与细胞，无显 微鉴别。糖或其他附加剂有干扰。 提取可采用煎煮、渗漉法和蒸馏法，并浓缩至规定的相对密度； 含糖，所以要加防腐剂，不得有酸败等现象，检查PH值； 口服液要检查装量。

47 2. 酒剂与酊剂 酒剂：药材用蒸馏酒提取制成的澄清 液体制剂（药酒） 酊剂：药材用规定浓度的乙醇提取或 溶解而制成的澄清液体制剂 区别：浸出溶剂不同；酒剂可加糖或 蜂蜜调味，酊剂不加。

48 例 冯了性风湿跌打药酒 Ch.P.（2010） 【处方】桂枝、麻黄、羌活、当归等27味 【制法】以上二十七味，除乳香、五灵脂、木香、没药、麻黄、桂枝、白芷、小茴香、羌活、猪牙皂外，其余丁公藤等十七味混匀，蒸2小时，取出，放冷，与上述各味药合并，置容器内，加入白酒10kg，密闭浸泡30~40天，滤过，即得。

49 例 颠茄酊 Ch.P.（2010） 【制法】 取颠茄草粗粉1000g，照颠茄浸膏 的[制法]项下制得稠膏，测定定生物碱的含量后, 加85%乙醇适量，并用水稀释，使含生物碱和乙 醇量均符合规定，静置，俟澄清，滤过，即得。

50 质量分析： 总固体（适于尚未建立含量测定 项目的品种，以控制提出组分的量作 为质量评价的指标。） 乙醇量、甲醇量、最低装量、微 生物限度。
组成复杂，检查总固体量。 含糖与否，检查总固体量方法步骤不同。

51 3. 注射剂 供注入人体内的灭菌液等。 体、注射剂的指纹图谱。 从药材中提取的有效物质制成的可 要求制订中药材、有效部位或中间
需要制备中药材、有效部位、中间体和注射剂的指纹图谱。

52 （三）半固体制剂 1. 煎膏剂（膏滋） 药材用水煎煮、去渣浓缩后，加炼蜜或糖制成的半流体制剂。 质量分析： 应无焦臭、异味、无糖结晶析出
检查项目： 相对密度、不溶物 含有较多的糖，分析时应注意。

53 药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶剂，调整浓度至规定浓度而制成的制剂。
2. 浸膏剂与流浸膏剂 药材用适宜的溶剂提取，蒸去部分或全部溶剂，调整浓度至规定浓度而制成的制剂。 多为制备其他中药制剂的原材料，少数品种直接供药用。 流浸膏为1ml浸膏含1g原药材，浸膏为1g含2~5g原药材。

54 例 甘草流浸膏 Ch.P.（2010） 【性状】本品为棕色或红褐色的液体。 例 甘草浸膏 Ch.P.（2010） 【性状】本品为棕褐色的固体。

55 例 姜酊 Ch.P.（2010） 【制法】取姜流浸膏200ml，加90%乙醇使成1000ml，混匀，静置，滤过，即得。 例 刺五加片 Ch.P.（2010） 【制法】取刺五加浸膏150g，加辅料适量，混匀，制成颗粒，干燥，压制成1000片，包糖衣，即得。

56 3. 糖浆剂 含有药材提取物的浓蔗糖水溶液。 相对密度、pH、装量差异

57 （四）固体制剂 药材提取物、药材粉末加赋形剂、制备而成。包括有丸剂、胶剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、锭剂、胶剂、茶剂、栓剂、滴丸剂。
如有植物组织与细胞，可显微鉴别。

58 1. 丸剂 指药材细粉或药材提取物加适宜的粘合剂或其他辅料制成球形或类球形制剂，分为蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、浓缩丸、蜡丸、微丸等。 中药传统剂型，崩解缓慢，作用持久，可减小药物的刺激性和剧毒作用。

59 《黄帝内经》最早记载丸剂。 《伤寒论》和《金匮药略》首次记述用动物胶 汁、炼蜜和淀粉作为黏合剂制备丸剂。 《太平惠民和剂局方》收载了300种左右丸剂。

60 丸剂的特点 * “丸者，缓也”。丸剂在胃肠道崩解缓慢，逐渐 释放药物，故作用持久。 * “大毒者须用丸”。对毒、剧、刺激性药物可延 缓吸收，减弱毒性和不良反应。 * 在制备中可容纳固体、半固体黏性药材或浸出 液，一些难入煎剂的药物或贵重芳香类不宜久 煎的药物更宜制成丸剂。 * 利用蜜作为赋形剂或丸衣可掩盖主药不良气味.

61 例 藿胆丸（水丸） Ch.P.（2010） 【处方】广藿香叶、猪胆粉 【制法】取广藿香叶粉碎成细粉，过筛；取 猪胆粉用乙醇加热回流，滤过，滤液回收乙醇，减压干燥，磨成细粉，与广藿香叶细粉混匀，用水泛丸，干燥，以滑石粉-黑氧化铁（1:1）包衣,干燥，即得。

62 例 二至丸（水蜜丸） Ch.P.（2010） 【处方】女贞子、墨旱莲 【制法】以上二味，女贞子粉碎成细粉，过 筛；墨旱莲加水煎煮二次，每次1小时，合并煎 液，滤过，滤液浓缩至适量，加炼蜜60g及水适 量，与上述粉末泛丸，干燥，即得。

63 质量分析： 显微鉴别、水分检查、 重（装）量差异、 溶解时限 微生物限度

64 2. 散剂 药材或药材提取物经粉碎、均匀混合制成的粉末状制剂，分内服和外用散剂。 制备简便、显效快、稳定、便 于携带贮藏。

65 制备简便 携带方便 奏效快 临床应用广 散者散也，去急病用 《黄帝内经》，最早有散剂的记载。 《名医别录》中关于制法，原则仍沿用： “先切细曝晒乃捣，有各捣者，有合捣者”

66 例 小儿惊风散 Ch.P.（2010） 【处方】全蝎，僵蚕，雄黄，朱砂，甘草 【制法】以上五味，雄黄、朱砂分别水飞成 极细粉；其余全蝎等三味粉碎成细粉，与上述粉末配研，过筛，混匀，即得。 【用法与用量】口服。 等体积递增配研法

67 质量分析： 显微鉴别、均匀度、水分检查、装量差异

68 3. 颗粒剂 药材提取物与适宜辅料或药材细粉制成的颗粒状制剂，分为可溶性颗粒剂、混悬性颗粒剂、泡腾性颗粒剂。 在传统汤剂基础上创新的新剂型，具有汤剂显效快的特点，且易于保存和携带。

69 例 乐脉颗粒 Ch.P.（2010） 【处方】丹参、川芎、赤芍、红花、香附、木香、山楂 【制法】以上七味，加水煎煮三次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液于离心薄膜蒸发器内低温（45～50℃）浓缩至相对密度为1.10～1.30 的清膏，在间歇式流化床内与乳糖流化，制成颗粒，干燥，制成1000g，即得。

70 质量分析： 显微鉴别、粒度、水分、溶化性、装量差异

71 4. 片剂 药材提取物加药材细粉或药材细粉与适宜辅料混匀压制而成的圆片状或异形片状的制剂。 质量分析： 崩解时限、重量差异

72 例 千柏鼻炎片 Ch.P.（2010） 【处方】千里光、卷柏、羌活、决明子、麻黄、川芎、白芷 【制法】以上七味，羌活、川芎、白芷粉碎 成细粉；其余千里光等四味加水煎煮二次，合并煎液，滤过，滤液浓缩成稠膏，加入上述羌活、川芎等细粉，混匀，干燥，粉碎成细粉，制成颗粒，压制成1000片，包糖衣，即得。

73 5. 胶囊剂 药材用适宜方法加工后，加入适宜辅料填充于空心胶囊或密封于软质囊材中的制剂。分为硬胶囊剂、软胶囊剂、肠溶胶囊剂
质量分析： 水分、装量差异、崩 解时限、微生物限度

74 （五）气体制剂 系指药材提取物、药材细粉与适宜的抛射剂共同封装在具有特制阀门装置的耐压容器中，使用时借助抛射剂的压力将内容物喷出呈雾状、泡沫状或其他形态的制剂。 * 冷凝液可以用布、纸或有机溶剂除去外，必要时还应低温除去所含水分，以免粘结、变质

75 平均重量 重量差异限度 ≤0.030g ±15% 0.030 ~ 0.30g ± 10% ＞0.30g ± 7.5% 三、微生物限度：
质量分析： 喷射速率、喷出总量、每瓶总揿次、每揿喷量、每揿主药含量、粒度检查、喷射试验、装量差异 一、重量差异：取供试品20丸，精密称定总重量，求得平均丸重后，再分別精密称定每丸的重量。每丸重量与平均丸重相比较， 超出限度的不得多于2丸，并不得有1丸超出限度的一倍。（包糖衣的滴丸应检查丸芯的重量差异并符合规定方， 包衣后不再检查重量差异。包薄膜衣滴丸应在包衣后检查重量差异并符合规定。 平均重量 重量差异限度 ≤0.030g ±15% 0.030 ~ 0.30g ± 10% ＞0.30g ± 7.5% 二、溶散时限：照崩解时限检查法（附录Ⅻ A）检查。在水中逐渐溶散，不是崩解，故称溶散时限。 三、微生物限度： 细菌 霉菌 金葡 铜绿假 酵母菌 菌 单胞菌 滴丸剂 － －

76 三、中药及其制剂中待测成分的提取分离与纯化方法
（一）提取方法 1. 萃取法 利用溶质在两种互不相溶的溶剂 中的溶解度的不同，使物质从一种 溶剂转移到另一种溶剂中，将测定组 分提取出来的方法。

77 适用于液体制剂的提取。 优点：操作简便、快速 缺点：浪费溶剂

78 （1）萃取溶剂的选择 皂苷 — 正丁醇 黄酮类 — 乙酸乙酯 生物碱 — 三氯甲烷 挥发油 — 石油醚、乙醚
（1）萃取溶剂的选择 皂苷 — 正丁醇 黄酮类 — 乙酸乙酯 生物碱 — 三氯甲烷 挥发油 — 石油醚、乙醚

79 （2）水相的pH值 （3）提取次数 鉴别：1次 含量测定：3~4次 （4）乳化的预防与消除

80 2. 冷浸法 样品研成细粉后置溶剂里，室温下浸泡一段时间，组分因扩散而从粉末中浸出的提取方法。

81 此方法主要用于固体制剂的提取。优点：操作简单、适宜于易溶出而遇热不稳定的组分的药物，提取杂质少
缺点：所需时间长（8～24小时）。

82 3. 回流提取法 样品置有机溶剂中加热回流的提取方法。 特点：提取速度快，但操作繁琐， 不适于受热不稳定成分的提取

83 仪器： 普通回流装置，可通过更换溶剂，使提取更完全。

84 样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。
4. 连续回流提取法 样品置有机溶剂中加热，蒸发的溶剂经冷凝流回样品管的提取方法。 特点： 节省溶剂，提取效率高 不适于受热不稳定成分的提取

85 仪器： 索氏提取器

86 5. 水蒸气蒸馏法 适用于具挥发性的可随水蒸气蒸出的组分。 如麻黄碱、槟榔碱丹皮酚以及各类挥发油的提取。

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88 6. 超声提取法 特点：操作简便、提取速度快 提取效率高
利用超声波的空化作用，破坏植物药材细胞，使溶剂易于渗入细胞内，同时超声波的强烈振动能传递巨大能量给浸提的药材和溶剂，使它们作高速运动，加强了胞内物质的释放、扩散和溶解，加速有效成分的浸出，极大地提高提取效率。 特点：操作简便、提取速度快 提取效率高

89 7. 超临界流体萃取（SFE） 超临界流体： 物质在三相点下气、液、固三态处于平衡状态，当物质处于临界温度和临界压力以上，此时的物质既不是气体也不是液体而始终保持流体，称为超临界流体（supercritical fluid，SF）。

90 超临界流体的特点： （1）密度与液体相似，故溶解性能较强 （2）扩散系数与气体相似，传质快 （3）表面张力为0，故易渗透到样品中带走组分 （4）正常状态下变为气体逸出，易浓集

91 （5）选择性强，通过改变萃取的压力和温度可以选择性地萃取某些成分。
多用于亲脂性较强的成分的提取，可用于提取对热不稳定或易氧化的成分。

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93 超临界流体萃取法 优点 提取率高，提取速度快 时间短，选择性好 避免使用危险或有害溶剂 可联机使用，易于测定自动化 缺点 成本高 对设备要求高

94 （二）纯化方法 1. 液—液萃取法 2. 沉淀法 3. 色谱法 4. 水蒸气蒸馏法

95 制剂中生物碱 H+ 生物碱成盐 过滤 有机溶剂提取 OH- 挥去有机溶剂，得生物碱残渣 纯品

96 第二节 中药及其制剂的分析方法

97 一、取样与样品保存 注意：取样要有科学性、真实性、代表性。 取样原则：均匀、合理。 严格按照规定的取样方法取样。

98 （一）中药材取样法 取样前注意事项 注意品名、产地、规格等级及包件式样是否一致，检查包装的完整性，清洁程度以及有无水迹，霉变或其他物质污染等，并详细记录

99 2. 同批药材取样原则 贵重药材 逐件取样 ＜ 5件 逐件取样 ＜ 100件 取5件 100 ～ 1000件 按5%取样 ＞ 1000件 超过部分按1%取

100 3. 破碎、粉末状的或大小在1cm以下的药材 取样量 一般药材 ~500g 粉末状药材 ~50g 贵重药材 ~10g

101 4. 抽取样品总量 5. 最终抽取的样品量 不得少于检验所需用量的3倍

102 （一）中药制剂取样法 粉状中药制剂 取样 100g 上、中、下三层或间隔相等部位 2. 液体中药制剂 取样 200mL
固体中成药 片剂 200片 丸剂 丸 胶囊 个

103 4. 注射剂 取样 支 5. 其他剂型的中药制剂

104 二、 中药及其制剂的鉴别 选取原则 ①单味制剂； ②当药味较多时，应首选君药、臣药、贵重药、毒性药进行鉴别研究；
二、 中药及其制剂的鉴别 选取原则 ①单味制剂； ②当药味较多时，应首选君药、臣药、贵重药、毒性药进行鉴别研究； ③原粉入药者，应作显微鉴别； ④原则上处方中的每一药味均应进行鉴别研究，选择尽量多的药味制订在标准中，但最少也要超过处方的1/3药味。

105 (一) 性状鉴别 利用其外观、形状及感官性质等特征作为真伪鉴别的依据。除去包装后的性状，指成品的颜色、形态、气味等。

106 在描述制剂性状特征时，应以中医药理论为指导。
性状鉴别内容及描述方法： ①颜色：从单一色到组合色不等，如红色、 深褐色、黄棕色等。 ②形态：如液体可分黏稠液体、液体、澄清 液体、澄明液体等。 性状鉴别的内容 ③形状：如栓剂可分为球形、鱼雷形、圆锥 形、卵形、鸭嘴形等。 ④气：可分为香、芳香、清香、腥、臭、特 异、气微、芳香浓郁等。 ⑤味：可分为甜、酸、苦、涩、辛、凉、 咸、辣、麻等。 ⑥其他：光泽感、滑腻感等。 在描述制剂性状特征时，应以中医药理论为指导。

107 例 玉真散 Ch.P.（2010） 【性状】 本品为黄白色至淡黄色的粉末；气香，味麻辣。 生白附子 g 防风 g 白芷 g 生天南星 50g 天麻 g 羌活 g

108 （二）显微鉴别 中药制剂的显微鉴别：利用显微镜来观察中药制剂中原药材的组织碎片、细胞或内含物等特征，从而鉴别制剂的处方组成。
凡以药材粉碎成细粉后直接制成制剂或添加有部分药材粉末的制剂，由于其在制作过程中原药材的显微特征仍保留到制剂中去，因此均可用显微定性鉴别法进行鉴别。

109 Ch.P.（2010）一部 附录ⅡC 显微鉴别法 显微鉴别的特点 A. 适用于含生药粉末的制剂，覆盖面广，简便 快速 B. 药味多，形态复杂；药材和辅料的显微特征 有可能互相影响 C. 药材经过炮制导致显微特征改变甚至消失

110 选择原则： 1. 应选择有专属性的特征来鉴别 例 左金丸 黄连 鲜黄色纤维束，石细胞 吴茱萸 腺毛、非腺毛，石细胞

111 2. 多来源的药材应选共有的显微特征 3. 显微特征应明显，易查见。 4. 取样注意代表性。 例 黄连 黄连（味连） 三角叶黄连（雅连）
例 黄连 黄连（味连） 三角叶黄连（雅连） 云连（不含石细胞） 鲜黄色纤维束 3. 显微特征应明显，易查见。 4. 取样注意代表性。

112 散剂、胶囊剂：取粉末少量，选用适当的试液
处理后直接进行显微观察。 片剂：切开，刮取少量样品，观察；粉末太粗则 先研细；糖衣片除去糖衣再研细。 制片方法 水丸、颗粒剂：于乳钵内研成粉末后观察。 氢氧化钾法 硝铬酸法 蜜丸 氯酸钾法 水溶法

113 例 安宫牛黄丸 1. 水牛角浓缩粉 2. 栀子 3. 黄连 4. 郁金 5. 珍珠 6. 麝香 7. 朱砂 8. 雄黄 9. 黄芩 1 2
例 安宫牛黄丸 1. 水牛角浓缩粉 1 2. 栀子 2 3. 黄连 4. 郁金 3 4 5. 珍珠 6. 麝香 5 7. 朱砂 6 8. 雄黄 9. 黄芩 8 7

114 （三）理化鉴别 利用中药中所含物质的理化性 质，通过与一定试剂发生化学反应， 用化学方法和仪器分析方法鉴别药材 的真伪优劣。

115 中药制剂的理化定性鉴别方法有：一般化学反应法、升华法、颜色反应与沉淀反映法、光谱法和色谱法等。

116 1. 显微化学反应法 在显微镜下观察化学反应。 黄连： 粉末滴加稀盐酸，放置5min， 可见黄色结晶析出（小檗碱的盐酸 盐）。

117 2. 升华法 操作方法： 取一块与载玻片大小相似的金属片，放在一块有一小孔的石棉板上，金属片中央放一内径约15mm，高约7mm的金属圈，于金属圈内加药材或中成药粉末0.5~1.0g，圈上方覆盖一载玻片，在石棉板下边用酒精灯加热，火焰对准小孔处，至粉末开始变焦黄时，去火，放冷，此时有升华物附着于载玻片上，将载玻片取下，反转，置显微镜下观察。 冰片

118 大黄→ 菱状针晶或羽状结晶（蒽醌类） 牡丹皮→长柱状、针状或羽状结晶（丹皮酚） 冰片→ 白色不定形片状结晶 薄荷→ 无色针簇状结晶（薄荷脑） 儿茶→ 无色树枝状结晶（儿茶素） 斑蝥→ 白色柱状或小片状结晶（斑蝥素）

119 例 大黄 Ch.P.（2010） 【鉴别】（2）取本品粉末少量，进行微量升华，可见菱状针晶或羽状结晶。

120 3. 颜色反应与沉淀反应法 二妙丸（苍术、黄柏）中苍术的鉴别 苍术酮 苍术炔

121 例 大山楂丸 Ch.P.（2010） 【处方】山楂1000g，六神曲150g，麦芽150g 【鉴别】（2）取本品9g，剪碎，加乙醇40ml ，加热回流10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml，加热使溶解，加正丁醇15ml振摇提取，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，滤过。取滤液1ml，加少量镁粉与盐酸2~3滴，加热4~5分钟后，即显橙红色。

122 4. 荧光法与分光光度法 利用中药中组分的光谱特征鉴别。 浙贝母： 取本品粉末，置紫外灯（365nm） 下观察，显亮绿色荧光。

123 例 复方丹参滴丸 Ch.P.（2010） 【处方】丹参、三七、冰片 【鉴别】（4）取本品15丸，加少量水，搅拌使溶解后用水稀释至100ml，摇匀，取2ml，加水至25ml，摇匀，照分光光度法（附录Ⅴ A）测定，在283nm的波长处有最大吸收。

124 5. 色谱法 分离效能高，灵敏。 TLC法： 应用最多 GC法： 适用于含挥发性成分的药物 HPLC法：常与含量测定同时进行

125 配制溶液： 供试品溶液 对照药材 阳性对照液 对照品 阴性对照液 TLC法
分别取供试品、对照药材或对照品溶液点于同一薄层板上，展开检视，供试品 溶液中应有与对照主斑点相对应的斑点。

126 色谱条件选择： 固定相选择 常用硅胶 生物碱 氧化铝 黄酮类和酚类 聚酰胺 氨基酸 纤维素 TLC法
生物碱 氧化铝 黄酮类和酚类 聚酰胺 氨基酸 纤维素 分别取供试品、对照药材或对照品溶液点于同一薄层板上，展开检视，供试品 溶液中应有与对照主斑点相对应的斑点。

127 色谱条件选择： 展开系统选择 Rf值在0.2~0.8 无水乙醇-苯（1：4） 苯-氯仿 （1：3） 丙酮-甲醇 （1：1）
TLC法 展开系统选择 Rf值在0.2~0.8 无水乙醇-苯（1：4） 苯-氯仿 （1：3） 丙酮-甲醇 （1：1） 分别取供试品、对照药材或对照品溶液点于同一薄层板上，展开检视，供试品 溶液中应有与对照主斑点相对应的斑点。 系统适用性试验 灵敏度、分离度和重复性

128 TLC法 对照物选择： 对照品对照法 对照药材对照法 阳性对照法 阴性对照法 显色与检视方法

129 对照与供试品和对照品在相同条件下试 验，阴性对照在鉴别特征斑点的位置应 无斑点出现，而阴性加上对照药材的色 谱应大致等于供试品的色谱图。
注意专属性，建立方法时应取阴性 对照与供试品和对照品在相同条件下试 验，阴性对照在鉴别特征斑点的位置应 无斑点出现，而阴性加上对照药材的色 谱应大致等于供试品的色谱图。

130 例 牛黄解毒片 Ch.P.（2010） 【处方】牛黄5g，雄黄50g，石膏200g，大黄200g，黄芩150g，桔梗100g，冰片25g，甘草50g 【鉴别】（1）大黄，雄黄 显微鉴别 （2）冰片 升华法 （3）牛黄 TLC （4）大黄 TLC （5）黄芩 TLC

131 阴性对照 对照品 对照药材 供试液

132 三、中药及其制剂的杂质检查 一般理化检查项目： 浸出物及总固体、 挥发油、总氮、相对密度、旋光度、折 光率、水分、干燥失重、乙醇含量
一般理化检查项目： 浸出物及总固体、 挥发油、总氮、相对密度、旋光度、折 光率、水分、干燥失重、乙醇含量 杂质检查： 杂质限量、灰分、酸碱度、 氯化物、特殊杂质与掺伪物检查 其他：铅盐、砷盐、铁盐、有机溶剂残 留、有机氯和有机磷农药残留量

133 （一） 水分检查法 1. 烘干法（不含或少含挥发性成分） 2.甲苯法（含挥发性成分） 3.减压干燥法（含挥发性成分的贵重药） 4.气相色谱法

134 例 鹿角胶 Ch.P.（2010） 【检查】水分 取本品1g，精密称定，加水2 ml，加热溶解后，置水浴上蒸干，使厚度不超过 2～3mm，照水分测定法（附录Ⅸ H 第一法）测 定，不得过15.0%。 例 陈皮 Ch.P.（2010） 【检查】水分 照水分测定法（附录Ⅸ H 第二法）测定，不得过13.0%。

135 （二） 总灰分和酸不溶性灰分 药材或制剂经加热炽灼灰化遗留的无机物，包括有生理灰分（无机盐）、外来杂质（泥土、砂石）。控制药材中泥土、砂土的量，同时还反映药材生理灰分的量。

136 总灰分的测定 △ 酸不溶灰分的测定 △ △

137 例 【检查】总灰分 Ch.P.（2010） 黄芩 ≤ 6.0% 黄连 ≤ 5.0% 石菖蒲 ≤10.0% 鹿角胶 ≤ 3.0% 枸杞子 ≤ 5.0% 大黄 ~ 20%

138 （三） 重金属 一般控制在百万分之二十以下 铅：百万分之十 镉：百万分之零点三 一般应先有机破坏后再检测。

139 （四） 砷盐 控制由除草剂、杀虫剂或化肥引 入的砷盐。

140 （五）残留农药 对中药及其制剂进行农药残留量检查已成为必然，尤其是出口中药材及中药制剂则必须进行该项检查。

141 为何要对中药材及中药制剂进行农药残留量检查
中药材生产有相当数量为人工栽培，为提高药材产量，减少昆虫、真菌和霉菌的危害，在生长过程中常需喷洒农药。此外，土壤中残留的农药也可能引入药材中。致使中药材中农药残留问题较为严重。 农药对人体危害极大，所以要对中药材及中药制剂进行农药残留量的检查。

142 常见农药的种类：按其化学结构，可分为 * 有机氯类：DDT、六六六等 * 有机磷类：敌敌畏、乐果等 * 拟除虫菊酯类：氯氰菊酯、溴氰菊酯等 * 苯氧羧酸类除草剂：2,4-D；2,4,5-T等 * 氨基甲酸酯类：西维因（甲萘威）等 * 二硫代氨基甲酸酯类：福美铁、福美锌等 * 无机农药：磷化铝、砷酸钙等 * 植物性农药：烟叶和尼古丁等

143 附录ⅨQ 农药残留量测定法 本法是用气相色谱法测定药材及制剂中部分有机氯、有机磷和拟除虫菊酯类农药。

144 例 黄芪 Ch.P.（2010） 【检查】有机氯农药残留量 照农药残留量 测定法（附录Ⅸ Q有机氯农药残留量测定）测 定，六六六（总BHC）不得过千万分之二；滴 滴涕(总DDT）不得过千万分之二；五氯硝基苯 （PC-NB)不得过千万分之一。

145 （六）黄曲霉素的检查 为何要测定中药材及中药制剂中黄曲霉毒素含量
中药材采集后干燥不够或贮存不当或在制备和加工过程中处理不善，可能污染在自然界普遍存在的黄曲霉而产生黄曲霉毒素。黄曲霉毒素具有极强的毒性和致癌性，故需对中药材及中药制剂中黄曲霉毒素含量进行控制。

146 黄曲霉毒素B1 （AFB1） 黄曲霉毒素B2（AFB2） 黄曲霉毒素M1 （AFM1） 黄曲霉毒素M2（AFM2） 黄曲霉毒素G1（AFG1） 黄曲霉毒素G2（AFG2）

147 黄曲霉毒素的检测方法 微柱色谱法 氧化铝-硅镁型吸附剂，测总量 薄层色谱法 HPLC法：柱后衍生-液相色谱荧光检测法 荧光分析法：黄曲霉毒素有荧光 免疫法：放射免疫法，酶联免疫法

148 四、中药及其制剂的含量测定 中药制剂组成复杂，产生的临床疗效不是某单一成分的作用结果。 测定任何一种活性成分都不能反映制剂的整体疗效。

149 （一）含量测定项目选定的原则 1.单方制剂所含成分类别必须清楚，要搞清是有效成分还是指标性成分，应有针对性地建立含量测定项目。
2. 复方制剂首选君药及贵重药建立含量测定方法，若上诉药物基础研究薄弱或无法进行含量测定的，也可依次选臣药及其他药测定含量。 3. 含有毒性药物必须建立含量测定项目，作为重点进行研究。 4. 有效成分或指标成分清楚的，可以测定有效成分或指标成分的含量。

150 （一）含量测定项目选定的原则 5.测应尽量与中医理论、用药的功能主治相近。 6. 测定成分需考虑与生产工艺的关系。
7.测定成分应归属于某一单味药，若两味或以上药材均含有的成分，则不应选为定量指标。 8. 若确实无法进行含量测定的，测定药物的总固体量。

151 （二）常用含量测定方法 1. 化学分析法 包括容量法、重量法。
适合测定制剂中含量较高的成分或含矿物药制剂中的无机成分，如总生物碱类、总酸类、总皂苷及矿物药制剂等。

152 优点：所用仪器简单，结果准确。 缺点：灵敏度低，操作繁琐、耗时 长，专属性不高，对于微量 成分准确性不理想。 适用于含量较高，干扰少的制剂

153 如：①冰硼散中朱砂的含量测定； ②地奥心血康胶囊中甾体总皂苷含量测定； ③昆明山海棠片中总生物碱的含量测定。

154 西瓜霜为葫芦科植物西瓜的成熟果实与芒硝经加工而成的白色结晶粉末。
例 西瓜霜润喉片 Ch.P.（2010） 【处方】西瓜霜，冰片，薄荷素油，薄荷脑 西瓜霜为葫芦科植物西瓜的成熟果实与芒硝经加工而成的白色结晶粉末。 【含量测定】取本品60片，精密称定，研细,混匀，取约18g，精密称定，加水150ml，振摇10分钟，离心，滤过，沉淀物用水50ml分3次洗涤,离心，滤过，合并滤液，加盐酸1ml，煮沸，不断搅拌，并缓缓加入热氯化钡试液使沉淀完全， Na2SO4 BaSO4↓

155 置水浴上加热30分钟，静置1小时，用无灰滤纸或已灼炽至恒重的古氏坩埚滤过，沉淀用水分次洗涤，至洗液不再显氯化物的反应，干燥，并炽灼至恒重，精密称定，与0.6086相乘，计算，即得。
本品每片含西瓜霜以硫酸钠（Na2SO4）计，小片应为11.5~13.5mg，大片应为23~27mg。

156 计算 北豆根片 Ch.P.（2010） 【含量测定】取本品20片（规格15mg/片）,精密称得重3.6785g，研细，精密称取0.9809g置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯25ml，振摇30分钟，滤过，用乙酸乙酯10ml分三次洗涤容器及滤渣，洗液与滤液合并，置水浴上蒸干，残渣加无水乙醇10ml使溶解，精密加入硫酸滴定液（ mol/ L）25ml与甲基红指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（ mol/L）滴定，

157 消耗氢氧化钠滴定液（ mol/L）11.85ml。 每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相当于6.248mg的蝙蝠葛碱（C38H44N2O6）。计算本品含总生物碱以蝙蝠葛碱（C38H44N2O6）计相当于标示量的百分含量。本品含生物碱以蝙蝠葛碱（C38H44N2O6)计，应为标示量的90%～110%。

158 适用在紫外-可见区吸收较强组分的含量测定，一般用于某一类成分总量的测定。
2. 紫外—可见分光光度法 特点：灵敏度高、简便、快速 精密度好，但专属性不高 适用在紫外-可见区吸收较强组分的含量测定，一般用于某一类成分总量的测定。 （一）紫外-可见分光光度法;（二）荧光分光光度法;（三）原子吸收分光光度法;（四）红外分光光度法

159 精密量取5ml，置氧化铝柱上，用乙醇25ml洗脱,收集洗脱液，置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取2ml，置50ml量瓶中，
例 左金丸（黄连） Ch.P.（2000） 【含量测定】精密称取本品粉末0.9987g，置索氏提取器中，加盐酸-甲醇（1:100）适量，加热回流提取至提取液无色。将提取液（必要时浓缩）移至50ml量瓶中，加盐酸-甲醇（1:100）稀释至刻度，摇匀，照柱色谱法（附录Ⅵ C）试验, 精密量取5ml，置氧化铝柱上，用乙醇25ml洗脱,收集洗脱液，置50ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，精密量取2ml，置50ml量瓶中， 黄连，吴茱萸

160 用0. 05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅴ A），在345nm波长处测得吸收度为0
用0.05mol/L硫酸溶液稀释至刻度，摇匀，照分光光度法（附录Ⅴ A），在345nm波长处测得吸收度为0.449，按盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）的吸收系数（ ）为728计算本品含量。 【水分】8.5%。本品按干燥品计算，每1g含总生物碱以盐酸小檗碱（C20H17NO4·HCl）计，不得少于60mg。

161 3. 薄层扫描法 对薄层板中可吸收紫外光或可见光 的斑点，或经激发后能发射出荧光的 斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及
用一定波长的光照射在薄层板上， 对薄层板中可吸收紫外光或可见光 的斑点，或经激发后能发射出荧光的 斑点进行扫描，将扫描得到的图谱及 积分数据用于药品的含量测定。

162 特点： 分离效能高、快速、简便。可用 于无紫外吸收或不能用高效液相色谱 分析的组分，作为高效液相色谱法的 补充。但重现性较差。

163 扫描方式：反射方式，吸收法或荧光法 扫描方法：直线式扫描和锯齿状扫描 单波长扫描或双波长扫描

164 要求稀释若干倍的对照品溶液，在规定条件下显清晰的斑点。
Ch.P.(2010) 系统适应性试验 （1） 检测灵敏度 限量检查 要求稀释若干倍的对照品溶液，在规定条件下显清晰的斑点。 （2）分离度 ≥ 1.0 （3）重复性 RSD≤3.0% 显色后 RSD≤5.0 %

165 线性回归二点法 × × × × × × × × × × × × 样 样 对 对 样 样 对 对 样 样 对 对 低 高 低 高 低 高

166 4. 高效液相色谱法 特点： 分离效能高、分析速度快、应用 范围广，重现性和准确度高，是中药 制剂含量测定的首选方法。组成复杂 的制剂应先预处理。

167 拈痛丸质量标准（草案） 拈痛丸 Nian Tong Pills 【处方】 广藿香 延胡索 厚朴（姜制） 白芷 降香 陈皮 木香（广木香） 薄荷脑 丁香 高良姜 石菖蒲 煅白矾（枯矾） 肉桂 黄连（姜制） 普洱茶（云南茶） 薄荷 茯苓（去皮） 灸甘草 【制法】 以上十八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。加入蜜糖10g及水适量，与上述粉末泛丸，干燥，抛光，即得。

168 【性状】 本品为棕褐色的小水蜜丸；气香，味微苦。
【鉴别】 （1）取本品10g，研细，加甲醇50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，加浓氨试液调至碱性，用乙醚振摇提取3次，每次10ml，合并乙醚液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取延胡索乙素对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录VI B）试验，吸取供试品溶液、对照品溶液各5µl，分别点于同一1%NaOH溶液制备的硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮（9：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置碘缸中约3分钟后取出，挥尽板上吸附的碘后，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

169 （2）取样品12g，研细，加乙酸乙酯10ml，密塞，超声处理30分钟，放冷后滤过，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取厚朴酚与和厚朴酚对照品，加甲醇制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液5µl、对照品溶液2µl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以三氯甲烷-苯-乙酸乙酯（5：4∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与厚朴酚、和厚朴酚对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光淬灭斑点。

170 【含量测定】厚朴 照高效液相色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥD）测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-磷酸（68：32：0.1）为流动相；检测波长为294nm。理论板数按厚朴酚峰计算应不低于5000。 对照品溶液的制备 精密称取厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含40 g的对照品溶液。

171 供试品溶液的制备 取本品10g，研碎，取约3.0g,精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml,密塞，称定重量，浸泡过夜，超声处理20分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，0.45 m滤膜过滤，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 l，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每1g含厚朴以厚朴酚（C18H18O2）计，不得少于0.90mg。

172 B 1 A C

173 如冰片、桉叶素、樟脑、厚朴酚、丁香酚、龙脑等。
5. 气相色谱法 可测定挥发油和挥发性成分。 如冰片、桉叶素、樟脑、厚朴酚、丁香酚、龙脑等。

174 例 马应龙麝香痔疮膏中冰片的含量测定 色谱条件与系统适用性试验 略 校正因子测定 精密称取萘适量，加环己烷溶解并制成每1ml含20mg的溶液，摇匀，作为内标溶液。另取冰片对照品45mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加环己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，取1l注入气相色谱仪，连续进样3~5次，按平均峰面积计算校正因子。

175 测定法 取本品约1g，精密称定，置具塞锥形瓶
中，精密加入内标溶液2ml，再精密加环己烷8 ml，混匀，超声处理5分钟，离心，滤过，取续滤液1L注入气相色谱仪，测定，即得。 本品每1g含冰片以龙脑（C10H18O）和异龙 脑（C10H18O）总量计，不得少于36mg。

176 第三节 中药指纹图谱研究技术 中药现代化研究系指运用现代的科学技术，研制、开发现代中药制剂，实现能用现代科学技术阐明其药效学物质和作用机制，能进行集团化种植和大规模生产，并能为国际市场所接受，有国际竞争力的现代中药制剂。

177 指纹图谱鉴定原理： 物质群在相同仪器、试验条件和操作方法下所得的（指纹）图谱如果具有相同性，即可反映这些物质群的同属性。

178 一、中药指纹图谱的定义及基本属性 中药指纹图谱的定义及其特点
中药材、提取物或中药制剂等经适当处理后，采取一定的分析手段，得到能够标示该中药材、提取物或中药制剂特征的共有峰的图谱，即运用现代分析技术对中药化学信息以图形的方式进行表征并加以描述。

179 中药指纹图谱有两个特点： 一是通过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪或产地； 二是通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制产品的质量，确保质量的相对稳定。

180 2. 中药指纹图谱的基本属性 * 整体性 将指纹图谱作为一个整体来分析 和比较它的综合特征以达到鉴别 目的 * 模糊性 强调分析、比较指纹图谱的相似 性，而不是完全相同

181 不同产地高良姜的气相指纹图谱

182 3. 制订指纹图谱的目的与意义 对中药质量控制的补充和提高。有利于控制中间体、成品的一致性，减少批间差异。掌握每个批次原药材、中间体中成分的变化，进行有指导的合理“勾兑”，保证成品在成分含量、组成比例上保持一致，减少批间差异。

183 4. 建立中药指纹图谱原则 中药指纹图谱的建立，应以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征性和重现性三个基本原则。唯此，才能保证指纹图谱的标准化、规范化、客观化，从而便于推广和应用。

184 　(1) 系统性  指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药所含大多数组分的类别或指标成分的全部。
(2) 特征性  指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与优劣，成为中药自身的“化学条码”。 　　

185 (3) 重现性  是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用程度，即不同操作者、不同实验室所重复做出的指纹图谱应在所允许的误差范围内，以体现其通用性和实用性。因而要求包括样品制备、分析方法、实验过程、数据采集、处理、分析等全过程都要规范化操作，同时，还应建立相应的评价机构，对其进行客观评价。

186 二、 中药指纹图谱的类型 按测定手段分类 中药化学指纹图谱 中药生物指纹图谱
（1） 中药化学指纹图谱系指采用光谱、色谱和其他分析方法建立的 用以表征中药化学成分特征的指纹图谱。 首选色谱方法和色谱联用技术

187 按测定手段分类 （2）中药生物指纹图谱 中药材DNA 中药基因组学 中药蛋白质组学 中药材DNA指纹图谱主要是测定各种中药材的DNA图谱，由于每个物种基因的唯一性和遗传性，中药材DNA指纹图谱可用于中药材的种属鉴定、植物分类研究和品质研究。

188 中药基因组学指纹图谱和中药蛋白质组学指纹图谱系指中药或中药制剂作用于某特定细胞或动物后，引起基因和蛋白的复杂变化，称之为生物活性指纹图谱。

189 2. 按应用对象分类 中药材指纹图谱 中药原料药指纹图谱 生产工艺过程中间产物指纹图谱 中药制剂指纹图谱

190 三、中药色谱指纹图谱研究的技术关键 （一）研究思路与内容 研究对象的确定     在调研有关文献、新药申报资料(质量部分和工艺部分)及其它研究结果的基础上，尽可能的详尽地了解药材、中间体及成品中所含成分的种类及其理化性质，综合分析后找出成品中的药效成分或有效成分，作为成品和中间体指纹图谱的研究对象，即分析检测目标。

191 2. 研究内容 　　在固定中药材品种、部位、产地、采收期以及加工工艺的前提下，需制订中药材、有效部位或中间体、注射剂的指纹图谱。

192 （二）研究方案 1.样品的选择与收集 原药材样品的收集原则 ①药材尽可能固定产地（如道地药材）、采收期、炮制方法； ②对已往生产使用过的药材应结合临床使用情况选择收集样品，对工艺稳定、疗效恒定、临床使用中很少出现异常的药材批次应重点选择； ③应收集不同产地、不同采收期的药材，这些药材虽然含量高低不同，组成比例各异，但当正常使用的药材一旦出现偏差时，可通过这些批次的药材实行合理“勾兑”。 ④中间体、注射剂因其生产工艺已经恒定，样品的收集原则也应重点选择工艺稳定、疗效恒定、临床使用中很少出现异常的批次。

193 2. 供试品的制备 　　根据所含成分的理化性质，通过溶剂提取、液液萃取、沉淀、吸附等方法，分离富集样品。例如，黄芪中黄酮类成分通过碱的萃取、皂苷类通过大孔吸附树脂吸附；苦参中总生物碱通过阳离子交换树脂分离；挥发性样品常用水蒸气蒸馏法制备。     样品富集后，还需通过氧化铝预柱、C18预柱、硅胶预柱、聚酰胺预柱等，除去色素等杂质，最后通过微孔滤膜，供HPLC测试。　　

194 　3. 参照物的选择 　　根据供试品中所含化学成分的性质，选择适宜的对照品作为参照物；如果没有适宜的对照品，可选择适宜的内标物作为参照物。参照物制备应根据检测方法的需要，选择适宜的方法进行。

195 4. 研究方法的选择     包括测定方法、仪器与试剂、测定条件等。研究方法应根据研究对象的物理化学性质来选择。大多数化合物可采用HPLC。挥发性成分应采用GC。采用上述方法难以分离检测的成分，可考虑使用TLC和HPCE。     一个中药制剂的指纹图谱可以同时采用多种方法进行研究。选择方法时，还需考虑药品检验系统复核时的设备、技术等因素。

196 5. 色谱条件的选择 指纹图谱的色谱条件是研究检测方法过程中最重要、关键性的内容。 以HPLC法为例，阐述各影响因素及解决途径。
（1）色谱柱 指纹图谱一般选用5~10μmC18填料柱，以4.6mm× 250mm较适宜，其它特殊的色谱柱，如氨基柱、腈基柱、酸性柱、碱性柱等，可视研究对象的不同而采用。

197 （2）流动相：乙腈、甲醇、水、四氢呋喃等 醇-水系统由于热力学和可压缩性因素，易导致基线漂移。 加入改善色谱峰分离程度及改善峰形的改性剂：
RP-HPLC，乙腈-水系统比较适合梯度洗脱。 醇-水系统由于热力学和可压缩性因素，易导致基线漂移。 加入改善色谱峰分离程度及改善峰形的改性剂： 磷酸、乙酸、三乙胺、二乙胺、正丁基溴化胺、十二烷基磺酸钠 磷酸-磷酸氢二钠/磷酸二氢钠、乙酸-乙酸钠缓冲溶液。 部分成分的极性较小，在流动相中可加入少量异丙醇、THF、 氯仿、环糊精等，增加流动相对样品的溶解性，可改善峰形以 及快速洗脱。 黄酮类、酚酸类 乙腈-水-酸系统 皂苷类 乙腈-水系统 生物碱类 乙腈-水-三乙胺

198 （3）检测器 检测波长选择有以下方法： ①参照样品和对照品的全波长紫外吸收光谱，选择吸收峰值； ②根据君、臣、佐、使的组方理论，在尽可能兼顾佐使药的同时，主要选择君、臣药中有效成分的吸收峰值； ③一个检测波长下的色谱图如不能达到控制质量的目的，可建立多个检测波长下的指纹图谱； ④一个检测器不能解决的也可同时采用多个检查手段。

199 （4）柱温 柱温的选择与恒定是影响指纹图谱技术稳定的主要因素之一。适宜的柱温不仅影响色谱峰的分离效果，而且柱温变化将导致色谱峰保留时间的迁移，技术参数的设置就失去了意义，因此，柱温必须限定。 当色谱图某个色谱峰因溶解度差而峰形较“钝”时，可适当提高柱温（30~50℃）；如样品中组分在常温或高温下不稳定，易发生水解、分解等变化时，可降低柱温。

200 （5）进样量 进样量对指纹图谱的结果影响不大，但加大进样量，可以减弱梯度洗脱时基线漂移的程度；然而色谱柱的载样量有一定的限度，进样量过大，色谱柱超载，导致色谱峰峰宽增加或色谱峰尖钝化，并影响柱的寿命。研究发现，进样量应控制最高色谱峰的吸收值在1000mAU以下适合。当等度洗脱时，基线平稳，进样量较平稳，进样量应尽量减少，一般控制最高色谱峰的吸收值在100mAU左右，不宜超过500mAU。

201 6. 指纹特征选择与技术参数 指纹图谱一旦建立，按照《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》（暂行）规定，除提供指纹图谱外，还应说明相应的技术参数。用大量的相对保留时间、共有峰峰面积比值等技术参数，不能直观地用来鉴定和判断。 通过大样本的指纹图谱的挖掘，找出隐藏其中的指纹特征，是指纹图谱研究的直接目的。

202 （1）共有指纹峰的标定：采用色谱法制订指纹图谱，必须根据参照物的保留时间计算指纹峰的相对保留时间。根据10批次以上供试品的检测结果，标定共有指纹峰。
（2）共有指纹峰面积的比值：以对照品作为参照物的指纹图谱，以参照物峰面积做为1，计算各共有指纹峰面积与参照物峰面积的比值；以内标物作为参照物的指纹图谱，则以共有指纹峰中其中一个峰的峰面积作为1，计算其他各共有指纹峰面积的比值。

203 （三）中药注射剂指纹图谱检测标准书写格式
中药材的名称、汉语拼音、拉丁名和来源； 供试品和参照物的制备； 对照品溶液或内标物溶液的制备； 测定方法（仪器、试剂、测定条件和测定方法）； 指纹图谱及各项技术参数； 起草说明； 有效部位或中间体的指纹图谱检测标准及起草说明

204 复习内容 掌握中药及其制剂分析的特点；中药制剂分析的程序；中药指纹图谱的定义、基本属性及技术关键
熟悉中药及其制剂中待测成分的提取分离与纯化方法；中药指纹图谱研究的类型 了解中药及其制剂的分类