第八章 对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类局麻药物的分析

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1 第八章 对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类局麻药物的分析
第八章　对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类局麻药物的分析

2 第一节 对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类药物的结构与性质
第一节 对氨基苯甲酸酯类和酰苯胺类药物的结构与性质 对氨基苯甲酸酯类药物基本结构与典型药物特点：

3 代表药物有： 　 盐酸普鲁卡因 苯佐卡因 盐酸丁卡因

4 二、酰苯胺类药物基本结构与典型药物 结构特点： 苯胺酰基衍生物，酰胺基邻位或对位有取代基。

5 代表药物有：　　　　 盐酸布比卡因 盐酸利多卡因

6 三、主要理化性质： 1. 芳伯氨基特性：具有芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应；可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。
1.  芳伯氨基特性：具有芳伯氨基，可发生重氮化—偶合反应；可与芳醛发生缩合反应，易氧化变色。 2.  酯键水解特性：具有酯键，易发生水解。水解的快慢受光线、温度或碱性条件影响。  3. 弱碱性：脂烃胺侧链为叔胺氮原子，故具有弱碱性；可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应；可在非水溶剂中被滴定 4. 与重金属离子反应：酰胺氮原子与铜离子、钴离子配位形成有色沉淀。 5. 吸收光谱特性：紫外吸收、红外吸收

7 第二节、鉴别试验 一、重氮化-偶合反应 具有芳伯氨基药物，如盐酸普鲁卡因等，在酸性溶液中与NaNO2发生重氮化反应，再与碱性-萘酚偶合产生红色偶氮化合物。

8 橙红色沉淀

9 盐酸丁卡因（芳香第二胺结构）与NaNO2作用生成乳白色N-亚硝基化合物沉淀，可与芳伯胺基的同类药物区别。

10 二、与金属离子的反应 具有烃胺侧链，与生物碱沉淀剂反应，根据沉淀颜色或测定沉淀熔点进行鉴别。 与铜离子的反应 与钴盐反应

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12 具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。
盐酸普鲁卡因胺的鉴别反应-羟肟酸铁的反应 具有芳酰胺结构，被H2O2氧化成羟肟酸，羟肟酸与FeCl3反应生成紫红色羟肟酸铁，随即变为暗棕色至棕黑色。如盐酸普鲁卡因胺。 具有酰胺结构的药物 羟肟酸 羟肟酸铁

13 三、水解产物反应 盐酸普鲁卡因的鉴别 盐酸普鲁卡因 + NaOH 普鲁卡因 油状物 对氨基苯甲酸钠 + 二乙氨基乙醇
 油状物 对氨基苯甲酸钠 + 二乙氨基乙醇 （使湿润的红色石蕊试纸变兰色） 对氨基苯甲酸钠 + HCl 对氨基苯甲酸（白色）

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15 苯佐卡因的水解反应

16 盐酸利多卡因 ChP（2010） 四、制备衍生物测熔点 三硝基苯酚衍生物
[鉴别] 取本品0.2g，加水20ml溶解。取溶液10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀；滤过，沉淀用水洗涤后，干燥，依法测定，熔点为228～232℃，熔融时同时分解。

17 利多卡因和布比卡因

18 硫氰酸盐衍生物 盐酸丁卡因 ChP（2010） [鉴别]（1）取本品约0.1g，加5%醋酸钠溶液10ml溶解后，加25%硫氰酸铵溶液1ml，即析出白色结晶；滤过，结晶用水洗涤，在80℃干燥，依法测定（附录ⅥC），熔点约为131℃。

19 五、吸收光谱特性 1.紫外吸收光谱 盐酸布比卡因
[鉴别]（2）取本品，精密称定，按干燥品计算，加0.01mol/L盐酸溶液制成每1ml中含0.40mg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在263nm与271nm的波长处有最大吸收；其吸收度分别为0.53－0.58与0.43－0.48。

20 2.红外吸收光谱法 利用化合物结构中特殊基团的振动和转动等红外活性振动产生的红外吸收峰对药物进行鉴别的方法。

21 第三节、特殊杂质与检查 一、盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查：离子对HPLC法 反相离子对高效液相色谱法 基本原理：在流动相总加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，两者形成中性离子对化合物，增加了被测样品组分在固定相中的溶解度，使被测组分的分配系数增大，达到样品组分分离测定的目的。 反相离子对色谱：分析酸类或带负电荷的药物时，常用季胺盐如四丁基铵作离子对试剂，分析碱类或带正电荷的药物时，常用磺酸盐类如庚烷磺酸盐和烷基硫酸盐类如十二烷基硫酸盐等。

22 离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因素，通常对离子的浓度为320mmol/L。
影响离子对形成的因素：反离子种类、浓度、流动相的组成、pH及离子强度 离子对的浓度：是控制反相离子对色谱溶质保留值的主要因素，通常对离子的浓度为320mmol/L。 流动相pH的选择：调解流动相的pH值可在较大范围内，改变弱酸或弱碱样品的保留值和分离选择性。通常测定酸性物质时调至pH77.5；测定碱性药物时调至pH33.5。

23 二、盐酸普鲁卡因注射液中有关物质和光解产物的检查：LC-MS法 三、盐酸利多卡因注射液中2,6-二甲基苯胺及其它杂质的检查：HPLC法 四、盐酸罗哌卡因的光学纯度检查：HPCE

24 第四节、含量测定 一、亚硝酸钠滴定法 1.  原理 具有芳伯氨基药物，在酸性条件下与NaNO2反应生成重氮盐，根据消耗NaNO2量，计算出含量。潜在芳伯氨基药物，如芳酰氨基、硝基等，可先水解或还原，得芳伯氨基后，再进行测定。

25 处理后亚硝酸钠滴定测定含量一般较少采用

26 2. 操作中的主要条件 滴定反应特点： 重氮化反应属于分子反应 滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定
2.  操作中的主要条件 滴定反应特点： 重氮化反应属于分子反应 滴定液NaNO2及反应生成的重氮盐都不稳定 反应速度受多种因素影响：温度、速度等

27 （1）加入溴化钾加快反应速度 重氮化反应机制： 第一步反应速度比较慢，而后两步反应速度则比较快。

28 加入KBr（催化剂），HBr与HNO2反应，可生成大量NOBr，加快反应速度。
K1比K2大300倍

29 （2）加过量盐酸加速反应 理论上:芳胺∶盐酸＝1∶1mol 实际上:芳胺∶盐酸＝1∶2.56mol
原因： 强酸性可加速反应 重氮盐在酸性下稳定 酸性下避免副反应发生。

30 如盐酸浓度太大，会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。
如酸度不足则没反应的芳胺与生成的重氮盐产生偶氮氨基化合物，而影响测定结果。 如盐酸浓度太大，会使游离芳伯氨的量减小（成盐），而影响重氮化反应速度，使反应速度减慢。

31 （3）反应温度 一般，温度升高反应速度加快。但重氮化反应所生成的重氮盐不稳定，温度升高重氮盐分解速度也加快。另外，温度高时，滴定液亚硝酸钠也容易分解逸失，而影响测定结果。所以，重氮化反应应在低温条件下进行。

32 （4）滴定速度 重氮化反应属分子反应，反应速度比较慢，滴定速度不能过快。 尤其是近终点时，更要慢慢地滴定。近终点时，游离芳伯胺浓度非常低，反应速度更慢。所以，每加一滴滴定液，要搅拌15分钟后再判断终点。

33 中国药典规定：在30C以下，把滴定管尖端插入液面下2/3处进行滴定。在滴定时一边搅拌一边加入大部分标准溶液。
标准溶液在液面下加入，可避免HNO2挥发。 到近终点时把滴定管提出液面，用水冲洗后再继续滴定至终点。

34 3.  指示终点的方法 重氮化滴定法指示终点的方法有: 永停法 电位法 外指示剂法 内指示剂法 我国药典主要采用永停滴定法指示终点

35 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O
G VV R1 R2 + V (1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前： 无过量 无电流 HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零 HNO 永停在某一位置） (2) 外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl NO + I KCl + 2NaCl + 2H2O

36 二、非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性,可非水滴定测定含量
二、非水溶液滴定法 脂烃胺侧链，具弱碱性,可非水滴定测定含量 三、紫外分光光度法 对乙酰氨基酚在0.4％氢氧化钠溶液中，于257nm波长处有最大吸收，其紫外吸收光谱特征，可用于其原料及其制剂的含量测定。 四、HPLC法 对乙酰氨基酚泡腾片、注射剂 可同时测定药物及其降解产物；外标法定量

37 第五节 体内药物分析 高效毛细管电泳法测定血浆中普鲁卡因、利多卡因、丁卡因和布比卡因。

38 高效毛细管电泳测定几种局麻药 电泳分析条件： 40 mmol/l的H3PO4-Tris buffer pH=5.0
毛细管：59 cm×70μm 柱温：18℃ 压力进样：3Kpa×5s 工作电压：20 KV 检测波长：220 nm

39 分析样品的处理： 血浆→碱化→（乙醚：二氯甲烷）萃取→离心→挥干有机溶剂→缓冲溶液溶解残渣→进样分析