亲权鉴定 一 亲权鉴定：应用遗传标记，根据遗传规律 对被控父母与子女血缘关系的鉴定。 二 遗传标记 一)遗传标记的选择

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1 亲权鉴定 一 亲权鉴定：应用遗传标记，根据遗传规律 对被控父母与子女血缘关系的鉴定。 二 遗传标记 一)遗传标记的选择 1 检测结果稳定、可靠。 2 方法简单、经济、易标准化。

2 3 在人体组织细胞、体液、分泌液广泛存在。 4 耐受环境因素，在斑痕中长期稳定存在。 5 非父排除率、个人识别能力高。
6 在应用之前必须获得遗传标记的群体数据， 突变率等相关资料。

3 二）检测遗传标记需用标准化方法，标准化方法的必备条件：
1 基因座名称、染色体定位等已有文献报道； 2 已完成种属特异性、灵敏度、稳定性等研究； 3 有可供使用的群体遗传数据，如等位基因频 率或单倍型频率； 4 亲子鉴定与群体遗传数据调查和分析的分型方法相同。

4 三 亲子鉴定常用的遗传标记 红细胞血型 ABO MN Rh 等 组织相容性抗原（HLA） 血液蛋白质遗传标记 红细胞酶型 EsD GLO1 PGM1等 血清型 Hp Gc Pi ITI ORM1等 DNA多态 STR VNTR

5 四常用DNA遗传标记及检测方法 1 遗传标记:微卫星DNA(短串联重复序列 short tandem repeats STR) 2 应用于法医鉴定的STR应满足以下条件 ① 宜选择四或五核苷酸重复的STR基因座； ② PCR扩增产物长度在300bp以下；

6 ③选多个STR基因座应不在同一条染色体上；
⑤基因频率分布均匀，没有高频或低频基因出现； ⑥杂合度高，最好大于0.80； ⑦突变率低。

7 3 检测方法 1)聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染分型。 DNA的提取 PCR扩增 扩增产物的聚丙烯酰胺凝胶电涌，银染分型

8 － ＋ 上图D6S2414基因座对4例亲子鉴定案的检测结果 4,11:等位基因分型标准物（从下而上8至13）
上图D6S2414基因座对4例亲子鉴定案的检测结果 4,11:等位基因分型标准物（从下而上8至13） 1,2,3分别为:10-12(父)、9-11(母)、10-11(子) 5,6,7分别为:10-10(父)、9-10(母)、10-10(子) 8,9,10分别为:11-12(父)、10-12(母)、10-11(子) 12,13,14分别为:8-9(父)、10-12(母)、10-10(子)

9 2）用自动激光荧光分析法分型。 DNA的提取 PCR扩增(每对引物中的一条标记荧光分子) 用ABI遗传分析仪检测PCR产物进行分型

10 9个STR基因座和1个性别识别基因座 D3S1358、vWA、FGA Amelogenin D8S1178、D21S11、D18S51
　　　Profiler Plus ABI 9个STR基因座和1个性别识别基因座 D3S1358、vWA、FGA Amelogenin D8S1178、D21S11、D18S51 D5S818、D13S317、D7S820

11 AmpFlSTR® Profiler Plus™ GS500-internal lane standard
9 STR Multiplex AmpFlSTR® Profiler Plus™ Kit available from PE Biosystems (Foster City, CA) 9 STRs amplified along with sex-typing marker amelogenin in a single PCR reaction 100 bp 400 bp 300 bp 200 bp Size Separation Color Separation D3 FGA vWA 5-FAM (blue) D13 D5 D7 NED (yellow) A D8 D21 D18 JOE (green) GS500-internal lane standard ROX (red)

12 Identifiler ABI 15个STR基因座和1个性别识别基因座 D8S1179、D21S11、D7S820、CSF1PO
Amelogenin D5S818、FGA D3S1358、TH01、D13S317、D16S539 D2S1338 D19S433、vWA、TPOX、D18S51

13 Identifiler 检测结果

14 Identifiler 分型结果

15 Identifiler 分型结果

16 Identifiler 分型结果

17 Identifiler 分型结果

18 五 亲权鉴定 一）类型 1 刑事案件： 1)无名尸骨(体)死者身份的鉴定； 2)性犯罪案件中受害人怀孕后,犯罪嫌 人的鉴定； 3)拐卖儿童；

19 2 民事案件： 1)家庭成员猜疑； 2)非婚生子女； 3)失散亲人认亲； 4)育婴室调错婴儿； 5)移民； 6)计划生育； 7)遗产继承； 8)试管婴儿或人工受精生父的鉴定。

20 二）亲子鉴定的常用检材 1 血(痕) 2 唾液(斑)、精液(斑)等体液(斑) 3 绒毛、羊水、人体组织 、毛根、软骨、 骨骼、牙齿等

21 三）亲权鉴定基本原理 1 子女的遗传基因 常染色体上的一对等位基因一个来自 父亲，另一个来自母亲，符合孟德尔 遗传定律。 Y染色体为父系遗传 mtDNA为母系遗传

22 2 亲权鉴定基本原理： 亲代 遗传标记检测 不符合 排除亲权 子代 遗传规律 符合 不能排除亲权  亲代 不能排除亲权 估计是生父(母) 子代 应用统计学理论及相关方法计算 的可能性

23 3 亲子关系鉴定原则 1）孩子不能有双亲均无的等位基因； 2）孩子必定得到父母双方一对等位基因中的 一个； 3）只有父母双方均携带同一相同基因，孩子 才可能为该基因的纯合子； 4）当父母一方或双方为某个基因的纯合子 时，这个基因必定要传给孩子。

24 四）非父排除概率：指不是小孩生父的男子能被遗传标记排除的概率。不是小孩生父的男子被指控为生父时，理论上可以根据遗传标记检测予以否定，随着检测遗传标记的增加，他被排除的概率越大；对孩子的生父，不论检测多少遗传标记，都能找到他与孩子有亲缘关系的证据。

25 若不是小孩生父而被控为生父的男子，用某种遗传标记检测有多大的可能性能被排除父权。即父权排除概率，也称非父排除概率(probability of exclusion，PE)，它是衡量遗传标记系统在亲子鉴定中实用价值大小的客观指标。

26 2 非父排除概率计算原理 排除概率的大小取决于遗传方式和群体基 因频率。 MN血型排除概率的计算 M基因频率为p N基因频率为q p+q＝1 (p+q)2＝p2＋2pq＋q2 ＝1 MM基因型频率＝p2 NN基因型频率＝q2 MN基因型频率＝2pq

27 MN血型系统的排除概率计算 母亲 频率 孩子 相对概率 可排除非 相对概率 排除概率 表型 表型 父表型 M p2 M p N q p3q2   p2 MN q M p p4q N q2 N q M p p2q3   q2 MN p N q pq4 MN 2pq M p/ N q p2q3   2pq N q/ M p p3q2 合计 MN血型系统的排除概率合计 pq(l-pq)

28 3 各种遗传标记的非父排除概率 排除概率依据遗传标记系统是否为显隐性或共显性遗传方式有不同的计算方法。 1)一个显性和一个隐性基因组成的系统 PE＝pq4 2)共显性基因的排除概率 PE＝pq(1－pq)

29 3)两个显性和一个隐性基因组成的系统 PE＝p(1-p)4＋q(1-q)4＋2pqr2＋pq(p＋q)r2
ABO血型系统中的IA与IB基因是显性基因， i是隐性基因，设p、q、r分别代表IA、IB和 i基因频率， PE＝p(1-p)4＋q(1-q)4＋2pqr2＋pq(p＋q)r2

30 4)复等位共显性基因的非父排除概率：目前常用的DNA遗传标记,如STR一个基因座有多个等位基因,均为显性。设pi为群体中第i个等位基因频率, pj为群体中第j个等位基因频率, 等位基因i不等于等位基因j，则非父排除概率为： PE＝∑pi(1－pi)2－1/2[∑∑pi2pj2(4－3pi－3pj)]

31 4 累积非父排除概率:上述非父排除概率的计算公式是针对某个基因座。亲权鉴定时联合检测多个基因座，应知道所检测的全部遗传标记对不是小孩生父的男子，否定父权有多大的可能性，即累积非父排除概率(cumulative probability of exclusion，CPE)。 计算累积非父排除概率的前提是一个遗传 标记独立于另一个遗传标记

32 CPE＝l－(1－PE1)(1－PE2)(1－PE3)(1－PEk) ＝l－∏(1－PEk)
  每个遗传标记不能排除父权的机会分别为 1-PE1，1-PE2，1- PE3……1-PEn，求其乘积，即得累积不能排除父权概率。用1减去累积不能排除父权概率, 即得累积非父排除概率。计算公式为： CPE＝l－(1－PE1)(1－PE2)(1－PE3)(1－PEk) ＝l－∏(1－PEk)

33 成都汉族群体13个STR基因座累计非父排除概率
基因座 排除概率 累积排除概率 TPOX D3S FGA D5S CSF1PO D7S D8S TH VWA D13S D16S D18S D21S

34 五)父权否定(exclusion of paternity)
1 经标准化实验检测遗传标记，被控父亲 (alleged father AF)不能提供给孩子必须的 遗传基因，在无突变时，可排除AF的父权， 断定他不是孩子的生父。 为了避免潜在遗传变异影响，排除父权至少 应根据两个以上遗传标记，任何情况下都不 能仅根据一个遗传标记排除父权。

35 2 下列情况可否定父权： 1）孩子带有生母和AF均无的某种遗传基因。 2）孩子没有AF必定要遗传给后代的基因。 3）孩子是某种遗传基因的纯合子，AF无该基因。 4）AF是某基因的纯合子，孩子缺乏该基因。

36 3 考虑因素 系统非父排除能力 排除标准：2个或以上蛋白质遗传标记排除 3个或以上DNA遗传标记排除 (本实验室)

37 4 错误否定父权的风险:检测的遗传标记增多，遇到遗传变异的可能性也增加。遗传变异使亲子之间的遗传关系不符合遗传规律。如果缺乏这方面的知识，容易错误否定父权。

38 遗传变异主要有：基因突变、沉默基因、替代等位基因、基因缺失、血型变异、基因互换、弱抗原、嵌合体、镶嵌抗原、生理与病理性变异等。尽管遇到遗传变异的概率很低，但为了避免潜在遗传变异的影响，排除父权至少应根据两个以上遗传标记。

39 5 防止错误否定父权的方法 当只有1个遗传标记否定父权时，为了防 止错误将父权否定，可采取下列措施。 1)用不同批号的抗血清试剂，由同一技术员 或其他技术员在同一实验室或其他实验室 重复试验。

40 不同批号或不同公司生产的抗血清试剂重 新测定，用杂合子红细胞作对照。 3)加测同一个血型系统其他血型抗原及抗
2)若怀疑血型抗原性弱，测不出来，可用 不同批号或不同公司生产的抗血清试剂重 新测定，用杂合子红细胞作对照。 3)加测同一个血型系统其他血型抗原及抗 体，当测出红细胞上无A及B抗原时，加测 红细胞上有无H抗原及血清中有无抗-H抗 体，区别O型与孟买型。

41 4)作家系调查确定基因型，如父子均为A型，母为B型，则孩子是AO杂合子,不会是AA纯合子。又如，父亲与孩子均为Hp2-2型，而孩子的生母是Hp1-1型，说明生母是Hp*1/Hp*0杂合子，孩子是Hp*2/Hp*0杂合子。

42 5)检测更多遗传标记。对于近亲婚配男女检测更多遗传标记特别重要，因双方有许多共同基因，否定父权较难。

43 六）认定父权 1 父权指数(paternity index PI):AF具备必需 基因成为孩子生父的机会与随机男子具备 必需基因成为孩子生父机会的比值。 它反映AF为孩子生父的可能性是随机男子成 为孩子生父可能性的多少倍。

44 2）PI计算（母亲为孩子生母，鉴定AF是否为孩
子生父） ① 测定母亲、孩子与AF的表现型 ② 计算母亲给孩子必需基因的机率 f ③ 随机男子给必需基因的机率 g=必需基因的频率 ④ 计算AF给必需基因的机率 c

45 X f×c c PI = = = Y f×g g ⑤ AF给必需基因成为孩子生父的机率 X＝f×c ⑥ 随机男子给必需基因成为孩子生父的机率

46 不能否定AF为孩子生父时，其与孩子有亲缘 关系的可能性。
3)相对父权机会(relative chance of paternity RCP): 不能否定AF为孩子生父时，其与孩子有亲缘 关系的可能性。 　　　　　　 PI 　相对父权机会(RCP)= ×100% PI+1 (PI为联合PI)

47 案例一 父权肯定 基因座 被控父亲 母亲 孩子 PI Cyar TH FES VWA D8S D5S D16S D20S D3S CSF1PO D7S D18S D1S DHFRP FIBRA D3S 联合PI=

48 AF M C PI D5S D5S818:*7=0.0325; *8=0.0041; *9=0.0772; *10=0.187; *11=0.2805; *12=0.2805; *13=0.126; *14=0.0041; *15=0.0081 AF提供必须基因的机会=0.5 随机男子提供必须基因的机会=0.187 0.5×0.5 PI= =2.6738 0.187×0.5 X f×c c PI = = = =0.5/g Y f×g g

49 X f×c c AF提供必须基因的机会 =0.5 随机男子提供必须基因的机会=0.232+0.302=0.534 0.5×1
AF M C PI VWA VWA *13 *14 *15 *16 *17 *18 *19 *20 AF提供必须基因的机会 =0.5 随机男子提供必须基因的机会= =0.534 0.5×1 PI= =0.9363 0.534×1 X f×c c PI= = = =0.5/(p+g) Y f×(p+g) (p+g)

50 相对父权机会(RCP)＝ PI+1 239631304.46 = ─────── 239631305.46 >99.9999996%

51 4）认定父权:经标准化实验检测遗传标记， AF不能被排除父权,计算概率后满足下列 指标，可认定AF的父权，推断他是小孩 的生父。

52 ①所检测的遗传标记系统累计非父排除概率大于99.95％；
②AF的累计父权指数大于10000，或AF的父权相对机会大于99.99％。 本实验室采用的标准： AF－生母－孩子：三联体 15个以上DNA遗传标记(GeneticMarker GM)， RCP≥0.9999，可以认为AF是孩子的生父。

53 24个以上DNA遗传标记(Genetic MarkerGM)，RCP≥0.9999，可以认为AF(M)是孩子的生父(母)。
达不到上述标准须增加遗传标记数量，提高系统非父排除能力。　

54 ﹡当有两个或两个以上的AF时，不能以RCP的
大小来判断谁是孩子的生父。 ﹡必须增加遗传标记数量，提高系统非父排 除能力。 5）遗传例外

55 案例二 遗传例外 基因座 被控父亲 母亲 孩子 Cyar04 4-8 4-4 4-4 TH01 6-7 7-8 6-8
案例二 遗传例外 基因座 被控父亲 母亲 孩子 Cyar TH VWA D5S D16S TPOX D3S CSF1PO D7S D9S D7S D8S D20S D13S D19S D19S DHFRP FIBRA D3S D18S

56 案例三 遗传例外(20个遗传标记) 基因座 被控父亲 母亲 胎儿组织 Cyar04 4-8 4-4 4-4 TH01 6-7 7-8 6-8
案例三 遗传例外(20个遗传标记) 基因座 被控父亲 母亲 胎儿组织 Cyar TH VWA D5S D16S TPOX D3S CSF1PO D7S D9S D7S D8S D20S D13S D18S D19S D19S DHFRP FIBRA D3S

57 七)特殊亲权鉴定方案 1 母子关系不能确定的亲权鉴定: 增加遗传标记数量，提高系统排除能力 2 母亲不到场的父权鉴定(单亲鉴定) 增加遗传标记数量,Y染色体DNA遗传标记应 用,提高系统排除能力

58 3 孩子与祖父辈的亲权鉴定 Y染色体DNA遗传标记，单倍型遗传标记， 线粒体DNA多态的应用 4 兄弟之间的亲权鉴定 Y染色体DNA遗传标记、线粒体DNA多态的应用

59 案例一:父权母权肯定 (24个遗传标记) 基因座 陈某(AF) 周某(AM) 骨骼 Cyar TH FES VWA D8S D5S D16S D20S D3S CSF1PO D7S D18S D1S DHFRP FIBRA D3S D21S D7S D13S FGA D18S TPOX D21S D12S

60 案例二 （24个遗传标记） 遗传标记 （AM1） (C1) ( AM2) (C2)
案例二 （24个遗传标记） 遗传标记 （AM1） (C1) ( AM2) (C2) D3S CSF1PO D16S D5S D8S D9S D20S D21S Cyaro TH D18S D7S D1S D3S D12S D12S D7S D18S D19S D6S D21S D18S FGA D13S

61 案例三 遗传标记 AF AF M 胎儿组织 VWA CSF1PO D16S D8S D9S D20S FGA D7S D21S Cyaro TH D18S D7S D1S D3S D12S D12S D7S D18S

62 案例四 遗传标记 康意金(AF1) 康凯(AF2) 李华(M) 康玉(C) ABO O A O O MN M MN MN M GC F F F-1S F PI M M M1M M1 ORM FS FS F FS ESD GLO PGM HLA A1,11;B7, A11,19;B13,16 A7,12;B8,15 A1,12;B7,15 D1S APOB

63 案例五 遗传标记 刘华(AF1) 刘勇(AF2) 李小芳(M) 刘枫(C) ABO A A A A MN N MN MN N
HP GC F F F PI M M M M1M2 ESD GLO PGM HLA A10,11;B46,- A9,11;B46,- A9,-;B40,- A9,11;B40,- D1S APOB

64 案例六 MN MN N M MN Hp 2-1 2-1 2-1 2-1 GC 1F 1F 1S 1F-1S
遗传标记 曾礼(AF1) 曾刚(AF2) 徐霞(M) 曾黎明(C) ABO O B A A MN MN N M MN Hp GC F F S 1F-1S PI M M1M M1M M1 ESD GLO PGM HLA A2,15;B17,27 A2,5;B17,20 A2,11;B40,46 A5,11;B20,46 D1S APOB

65 案例七 (17个遗传标记) 遗传标记 AF1 AF2 M 胎儿组织 VWA 14-17 13-17 14-16 14-17
　　案例七 (17个遗传标记) 遗传标记 AF AF M 胎儿组织 VWA CSF1PO D16S D8S D9S D20S FGA D7S D21S Cyaro TH D18S D7S D1S D3S D12S D12S

66 案例八 （11个遗传标记） 遗传标记 张军(AF) 陈方(AM) 张拣(C) ABO A A A MN N MN MN HP GC F －1F －1F PI M M M1 ESD GLO PGM HLA A10,-;B40, A9,11;B46,- A9,-;B40,- D1S APOB

67 1 与人体有关的各种体液(斑) 2 各种人体组织 3 毛发、骨骼、牙齿、指甲等 并非所有的生物性检材都能起到证据作用，
  个人识别 1 与人体有关的各种体液(斑) 2 各种人体组织 3 毛发、骨骼、牙齿、指甲等 并非所有的生物性检材都能起到证据作用， 只有经过专门检验后证明其与案件有关并能 对案件的真实情况起到证明作用的，方能作 为证据。

68 个人识别主要解决的问题： 1 确定检材的类别 2 鉴定其种属来源 3 个人识别

69 一 样品处理原则 1 检材的采取 1)现场勘查时，必须全面仔细的寻找一切可 疑物证 2)详细记录检材的名称、数量、形状、大小 和发现地点。 3)取检材时，尽量保持其原状不受损坏。

70 4)提取现场检材时，应同时提取受害人的 样本 5)提取尸血时，最好采取末梢血，如腕部 或踝部，不要采心血，尸体腐败时死后 血液循环，细菌可迅速进入心脏。 6)提取检材时，切勿用手直接触摸，避免 污染。

71 2 检材的包装与保存 1)不同的检材应分别包装，编号和记录。 2)斑痕凉干后用干净的纸袋包装，低温保存。 3)组织用乙醇或0.25M的乙二胺四乙酸二钠 (EDTA-Na2)固定，不能用甲醛固定。

72 3 检材的送检原则： 4 法医物证检验的原则： 及时 方法灵敏可靠 避免污染 严格遵守实验操作规程 认真记录检验方法和结果

73 二 生物性斑痕的个人识别 　1 个人识别的基本原理 DNA遗传物质 不同个体的独特性 同一个体的统一性 （同卵双生子除外）

74 O=40 B=25 ABO 14-14=1 100 AB=10 M=7 14-16=1 MN A=25 MN=11 14-17=2 VWA N=7 17-17=1 17-18=1 17-19=1

75 当检测的遗传标记数量足够多时，某一个体在一系列遗传标记上的表型组合就成为该个体所独有，而将他与人群中的其他个体区分开来。

76 上述例子中只能在100个人中排除99人，而表型为ABO:A MN:N VWA:17-19的个体虽然不能排出，但也不能肯定罪犯。检测的每个遗传标记的基因数和遗传标记数越多，各遗传标记基因型组合相同的人越少，支持嫌疑人为罪犯的可能性越大。

77 通过分析检材的一系列遗传标记为案件的侦破提供线索，为审判提供证据。
被害人阴 与嫌疑人相同 强奸案 拭精斑的 某种程度支持 一系列遗 嫌疑人为罪犯 传标记组合 与嫌疑人不相同 排除嫌疑人为罪犯

78 若精斑的一系列遗传标记的组合与嫌疑人相同，支持嫌疑人为罪犯的程度取决于所检测遗传标记的组合与群体中具有与所检测的遗传标记组合相同的个体数有关。

79 检测的遗传标记的组合在群体中越少，越支持嫌疑人为罪犯，极端情况是检测的遗传标记的组合在全人类数十亿人中是唯一的，则最大程度支持嫌疑人是罪犯。

80 这种统计学理论是遗传标记分析作为科学证据的基础。法医个人识别时,包括DNA在内的任何遗传标记分析都是基于这种统计学理论。

81 DNA遗传标记的等位基因及基因型多，多态性远远高于血型。联合使用多个DNA遗传标记可产生数以千万计的基因型组合，而每一种组合在群体中出现的频率非常低，足以区别群体中的不同个体，也易于实现高概率认定。

82 三 遗传标记的个人识别能力 1 个人识别机率(probability of discrimination DP) 从同一群体中，随机选择的两名个体在一系列 表现型上不相同的概率，为个人识别机率。 DP：用来评价某遗传标记区分不同个体的能力 大小。增加检测遗传标记的数量，可提高累计 个人识别机率(total probability of discrimination TDP)

83 一个遗传标记 n 的个人识别机率(DP)=1-Pi2 =1-Q i=1 n为某遗传标记的表现型数目 Pi为群体中第i个表现型的频率 Pi2为特定人群中，随机选择的两名个体，在 表现型上纯由于机会而一致的几率，即匹配概 率 matching probability P(m)

84 ABO的四种表型频率为 A= B= O= AB=0.1100 DP=1-[(0.2642)2+(0.3353)2+(0.2905)2+(0.1100)2] = =0.7231 MN血型的DP=0.6331 两血型总的TDP=1-[( )×( )] =1-(0.2787×0.3669) = =0.8978

85 表17-1-1. 遗传标记TH01的个人识别能力计算数据
表型 表型数 表型频率(Pi) Pi2 ．000289 ．005476 ．000064 ．015376 ．000625 ．003364 ．000289 ．069696 ．000625 ．000289 ．003364 ．000289 ．046225 ．001089 ．001681 ．000064 合计 ．148805

86 k TDP=1- ∏Qj j=1 Qj为第j个遗传标记的Q值
总Q值∏Qj为k个遗传标记Q的乘积

87 成都汉族9个STR基因座 基因座 DP 累计DP D3S vWA FGA D8S D21S D18S D5S 13S D7S <1/百亿

88 成都汉族13个STR基因座 基因座 DP 累计DP D3S1358 0.856 0.856 vWA 0.924 0.9891
FGA D8S D21S D18S D5S 13S D7S D16S TH TPOX CSF1PO < 1/千万亿

89 13个STR特定表型组合在群体中出现的概率 遗传标记 现场血痕 嫌疑人 表型 P 群体中存在 STR表型 STR表型 频率 该表型组合 的概率(ΠP) TPOX D3S FGA D5S CSF1PO D7S D8S TH VWA D13S D16S D18S D21S

90 四 不同生物性斑痕的鉴定方案 一)血痕 任务 是否血痕，是否人血痕，是谁的血痕 形态学检查预试验确证试验种属鉴定个人识别

91

92 1 是否血痕： 1)形态学检查 观察分布，位置、大小、形状、 范围、色泽等，与其它物品的相互关系，确 定取材方案。 2)预试验 原理：血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有 过氧化物酶活性，该酶能使H2O2变为H2O和 〔O〕,〔O〕使无色的联苯胺氧化为联苯胺蓝。

93 该方法快速，极灵敏，特异性不高。 阳性：可能是血痕 阴性：不是血痕 2)确证试验：血色原结晶： 原理 CH3COOH + NaCl Cl- + CH3COONa H+ Hb 正铁血红素 △ 氯化血红素结晶 (显微镜下为褐色菱形结晶)

94 方法评价：检测Hb，快速，特异性好， 灵敏度不高 阳性：是血痕 阴性：不是血痕或血痕被破坏。 2 种属鉴定：检测抗原或DNA 3 个人识别：测定遗传标记，与相关样本 直接比较，估计概率

95 8.13凶杀案DNA鉴定结果 D3S CSF1PO D16S D8S1179 死者 死者 死者 里屋床上血痕 衣柜背面上血痕 外屋床前地上血痕 菜刀 红色T恤衫 红色T恤衫 红色T恤衫 嫌疑人

96 二)精斑 任务：是否精斑，是单纯精斑还是混 合斑，是谁的精斑 形态学检查预试验确证试验种属 鉴定个人识别

97 1 形态学检查： 1)精液的理化特性 精液： 固体成分，主要为精子，少量的睾 丸细胞，白细胞等 精浆：由精囊液、前列腺液、尿道 球腺液、尿道旁腺液等组成、

98 精液为乳白色混浊的粘稠液体，有特殊的腥臭味，呈弱碱性，排出体外后约1小时左右液化成灰白色米汤样液体。
2)形态学检查:精斑外观因附着物不同而有差异：深色布类上的浓厚精斑，呈灰白色浆糊状斑迹。浅色布类上的精斑多呈黄白色地图状，边缘色较深。

99 原理：精斑中卵磷脂析出胆碱，遇碘形成过碘 胆碱。 筛选精斑，方法快速，特异性和灵敏度不高，所检出的成分不是精斑所特有。
 2 是否精斑 1)预试验： 碘化碘钾结晶实验， 原理：精斑中卵磷脂析出胆碱，遇碘形成过碘 胆碱。 筛选精斑，方法快速，特异性和灵敏度不高，所检出的成分不是精斑所特有。

100 阳性：可能是精斑 阴性：不是精斑或不能排除是精斑。 因精斑太新鲜，卵磷脂未分解成胆碱或精斑太陈旧，水洗或细菌污染，均呈阴性。

101 酸性复红亚甲蓝染色：精子头部呈红色，尾部蓝色。
 2)确证试验： 查精子 酸性复红亚甲蓝染色：精子头部呈红色，尾部蓝色。 3 种属鉴定：检测抗原或DNA 4 个人识别：测定遗传标记，与相关样本直接比较，估计概率

102 混合斑 混合斑： 混合斑是指两名或两名以上个体的体液、分泌液混合形成的斑痕。 1 由不同个体的同一种体液、分泌液混合而成，最常见为混合血痕； 2 由不同个体的不同体液、分泌液混合而成，最常见为精液与阴道分泌液组成的混合斑。

103 ②多人受伤的现场血迹，凶器、当事人身上或衣物上的血痕，多为2个或2个以上个体的混合血痕；
 3 混合斑检材常出现在下列情况： ①性犯罪案件检材，包括阴道拭子、内裤、卫生纸、床单、犯罪嫌疑人外生殖器拭子等相关检材，这类检材一般都包含有精子及阴道上皮细胞，属男、女个体成分的混合物； ②多人受伤的现场血迹，凶器、当事人身上或衣物上的血痕，多为2个或2个以上个体的混合血痕；

104 ③咬痕拭子含有咬者的口腔上皮细胞和被咬者的皮肤细胞；
④指甲垢，可能含有本人和被抓者的细胞； ⑤血衣有另一个人的汗液、唾液或尿液等。

105  4 精液与阴道液混合斑 精液与阴道分泌液混合斑是最常见的混合斑。检验目的主要是检测出精液成分的遗传标记，确定犯罪嫌疑人的基因型。也有少数案件要求确定阴道分泌液的遗传标记，认定受害者。

106 常染色体DNA分析 对混合斑作DNA分析，确定精液型别，关键是获得纯净的精子细胞DNA。
 5 精液与阴道液混合斑的个人识别 常染色体DNA分析 对混合斑作DNA分析，确定精液型别，关键是获得纯净的精子细胞DNA。

107 常用两步消化法。精子细胞膜蛋白质富含二硫交联结构，对去污剂及外源性蛋白酶有相当强抵抗作用。相比之下，阴道上皮细胞经不住常规使用的去污剂、蛋白酶的消化作用。

108 对笫一步消化的时间、温度、试剂的浓度作适当的调整。混合斑第一步消化后的上清液中含有阴道细胞DNA，可检测受害人的基因型。
第一步:消化阴道脱落上皮细胞 蛋白酶K 对笫一步消化的时间、温度、试剂的浓度作适当的调整。混合斑第一步消化后的上清液中含有阴道细胞DNA，可检测受害人的基因型。

109 第二步 蛋白酶K+二硫哦苏糖醇 消化液中是精子细胞的DNA，可分别进行DNA分型，并与犯罪嫌疑人比对，对排除或认定犯罪嫌疑人更可靠。

110 轮奸杀人案鉴定结果 VWA D20S D16S D8S1179 阴道拭子 死者 嫌疑人 嫌疑人 嫌疑人 嫌疑人 死者内裤 分析；阴道拭子和死者内裤都是混合斑，其中，嫌疑人3有D20S161、D16S539、D8S1179三个遗传标记可以排除，其他三个嫌疑人均不能排除

111 多起强奸案的分布消化法检测结果 遗传 受害者1 受害者2 受害者3 嫌疑人 标记 阴拭 阴拭 阴拭 XY XY XY XY XY
　　多起强奸案的分布消化法检测结果 遗传 受害者1 受害者2 受害者3 嫌疑人 标记 阴拭 阴拭 阴拭 XY XY XY XY XY D8S D21S D18S D3S VWA FGA D D13S D7S

112 唾液（斑）： 唾液是唾液腺的分泌物，唾液腺包括腮腺、颌下腺、舌下腺以及口腔粘膜的无数小唾液腺等。

113 1 唾液及唾液斑的提取 采取新鲜唾液样本时，要求被鉴定人先漱口，再将纱布或棉拭子放入口中，浸湿后在颊粘膜反复擦拭后取出，立即置通风干燥处晾干，分别包装，作好记录。也可将收集的唾液，置干净容器内，立即放水浴中煮沸10min，灭活唾液中的血型分解酶活性，然后置冰箱保存。

114 2 唾液斑的证明 1)唾液斑检验预试验 因唾液中含有大量的淀粉酶，可检查淀粉酶。但人体粪便、几乎所有的植物、发芽种子和真菌中均含淀粉酶，人体其他分泌液如鼻涕、尿、精液等也含少量淀粉酶，因此单测出斑痕中含有淀粉酶，不能确证唾液（斑）。

115 阳性：可能是唾液斑 阴性：不是唾液斑或是唾液斑但淀粉酶被 破坏 2)唾液斑的确证试验 检出口腔粘膜脱落上皮细胞，可确证唾液斑。

116 3)唾液斑的个人识别 唾液(斑)的个人识别，传统的方法是检测唾液(斑)中的ABO血型，70年代有用电泳方法检测唾液蛋白和酶的遗传多态性，目前主要用DNA分析法。

117 组织碎块 任务 是否人组织，是谁的组织 种属鉴定遗传标记测定与分析

118 骨骼 任务：是否骨骼，是否人骨，一人/多人骨，谁的骨骼 种属鉴定推测死者性别、年龄、身高 遗传标记测定与分析

119 毛发 任务：是否毛发，人/动物毛，谁的毛发 形态学检查鉴别人毛动物毛线粒体DNA测定

120 再见！